Těhotenství myší lze načasovat dvěma způsoby:
Vyhodnocení vaginální cytologie
Pro získání vaginálního vzorku pro určení fáze estrálního cyklu myši vložte navlhčený vatový tampon do vaginálního otvoru ručně znehybněné myši. Většina komerčně dostupných tamponů je příliš velká na to, aby se snadno vešly do vaginálního otvoru průměrně velké myši, ale tampon vhodné velikosti lze vyrobit omotáním malého množství sterilní vaty kolem tupého konce párátka. Jemně, ale pevně otáčejte tamponem v pochvě myši a dbejte na to, abyste udrželi kontakt s poševní stěnou. Po vyjmutí tamponu jej otřete o čisté skleněné mikroskopické sklíčko, abyste na něj přenesli vaginální vzorek. Nechte sklíčko oschnout a poté použijte 0,1% vodný roztok methylenové modři k obarvení vaginálního materiálu. Po zaschnutí barviva prohlédněte vzorek pod mikroskopem. Stádium říje lze určit podle typů a relativního počtu přítomných buněk:
- Pokud je myš v diestru, uvidíte převážně polymorfonukleární leukocyty (PMN) a některé epiteliální buňky.
- Pokud je myš v proestru, uvidíte převážně jádrové a rohovité epiteliální buňky. Pokud je myš v časné proestruře, uvidíte některé PMN.
- Jestliže je myš v estru, uvidíte převážně zrohovatělé epiteliální buňky. Pokud je myš v časném estru, můžete vidět několik buněk s jádry.
- Pokud je myš v metestru, uvidíte převážně zrohovatělé epiteliální buňky a PMN a několik jaderných epiteliálních buněk.
K páření i ovulaci obvykle (ale ne vždy) dochází během říje, která obvykle nastává přibližně šest hodin po začátku období tmy a trvá 12-14 hodin. Pro časované rozmnožování umístěte samici k samci během fáze proestru. Chcete-li ověřit, zda došlo k páření, zkontrolujte samici následující ráno, zda má vaginální zátku (viz níže).
Kontrola vaginálních zátek
Ačkoli se vyhodnocení vaginální cytologie běžně používá k určení nejvhodnější doby pro páření u některých domácích druhů (např. psů), u myší to není tak praktické, protože mají velmi krátký estrální cyklus (celkem 4-5 dní). Praktičtějším přístupem u myší je jednoduše umístit samce a samici vedle sebe a pak brzy ráno zkontrolovat samici, zda má vaginální zátku. Zátka je tvořena koagulovanými sekrety z koagulačních a vezikulárních žláz samce. Zpravidla vyplňuje vagínu samice a přetrvává 8-24 hodin po páření. Chcete-li vidět zátku, zvedněte samici za základnu ocasu a prohlédněte si její poševní otvor, zda v něm není bělavá hmota. Může být obtížné ji spatřit, zejména pokud jste v tomto postupu méně zkušení. Lépe ji uvidíte, pokud mírně roztáhnete pysky vulvy vatovým tamponem nebo tupým koncem plochého párátka. Pokud zátka není, nechte samici u samce a kontrolujte ji každé ráno, dokud zátku neuvidíte.
Pokud potřebujete velké množství časovaných březích samic, můžete využít vlivu feromonů a sociálních faktorů na estrální cyklus. Umístěte samice do velkých skupin bez samců v blízkosti. Tím prodloužíte diestrus a potlačíte říji, což je jev známý jako Whittenův efekt. Protože feromony myších samců mohou tento efekt narušit, je třeba zabránit čichové stimulaci samic držených ve skupině myšími samci. Pokud jsou samice umístěny se samci (obvykle 1-3 samice na jednoho samce), estrální cyklus se u většiny samic obnoví do tří dnů. Chcete-li identifikovat ty, které se pářily, prohlédněte je denně, zda nemají vaginální zátku.
Přítomnost vaginální zátky nezaručuje březost: svědčí pouze o tom, že došlo k sexuální aktivitě. Pravděpodobnost březosti po páření se liší podle kmene myší a podle fáze estrálního cyklu, kdy k páření dochází. U většiny kmenů je míra březosti nejvyšší u samic s potlačenou říjí, u nichž se vaginální zátka objeví třetí den po nasazení na samce. Zatímco u samic C3H/HeJ a BALB/cJ se zátkami nalezenými třetí den je míra březosti ~100 %, resp. 44 %, u samic se zátkami nalezenými pátý den je to pouze 62 %, resp. 31 %. Naproti tomu zatímco u samic C57BL/6J je míra březosti pouze 39 % u samic se zátkami nalezenými třetí den, u samic se zátkami nalezenými čtvrtý den je to 69 %.
Pokud je samice se zátkou březí, považuje se za první den březosti den následující po nalezení zátky.