Présenté à : ASRM 2017 – San Antonio, Texas
Objectif : Déterminer l’occurrence et le statut de ploïdie des embryons utilisables dérivés d’ovocytes ne présentant pas deux pronucléi (0PN) au moment de l’évaluation de la fécondation.
Conception : Étude rétrospective dans un laboratoire privé de fécondation in vitro.
Matériels et méthodes : Un total de 3 370 blastocystes ont été identifiés comme étant morphologiquement adaptés au transfert d’embryons frais, à la vitrification ou à la biopsie du trophectoderme pour un test génétique du statut de ploïdie suivi d’une vitrification (c’est-à-dire les blastocystes utilisables). Les blastocystes utilisables ont été obtenus au jour 5, 6 ou 7. Les ovocytes matures ont été fécondés par ICSI et l’évaluation des pronucléaires a été effectuée et enregistrée à l’aide d’un microscope inversé 16 à 18 heures après l’insémination. Les embryons avec 2 pronucléi ont été séparés de tous les autres embryons issus des zygotes 0PN, 1PN, 3PN et ≥4PN. Les embryons ont été cultivés en groupe dans un milieu de culture unique continu (Irvine Scientific). Le nombre de copies chromosomiques a été évalué pour les blastocystes appropriés avec la plateforme Illumina MiSeq. Les embryons déclarés normaux ne présentaient aucune aberration détectable du nombre de copies, à un seuil de ≤30%. Un seuil de ≥50% a été défini pour tout gain/perte de chromosome entier pour les chromosomes 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12, 17, 19 et/ou 22. Un seuil de ≥30% a été défini pour les chromosomes 6, 7, 8, 9, 11, 13, 14, 15, 16, 18, 20, 21, X, Y et toute duplication et/ou délétion segmentaire pour l’un des chromosomes. Un résultat d’anomalie complexe a été défini comme une combinaison de trois ou plusieurs anomalies du nombre de copies consistant en une trisomie et/ou une monosomie.
Résultats : Sur une période de 18 mois, 830 prélèvements d’ovocytes frais ont donné lieu à 7 258 zygotes avec deux pronucléus haploïdes (2PN). Ces zygotes 2PN se sont développés en 3 349 blastocystes utilisables (46%). 2,9 % des prélèvements d’ovocytes ont donné lieu à des blastocystes utilisables dérivés d’ovocytes ne présentant pas de pronucléus (0PN) au moment de l’évaluation de la fécondation. 24 blastocystes utilisables (provenant de zygotes 0PN) de 24 patients différents ont été vitrifiés. 14 (58%) de ces blastocystes n’ont pas été testés pour la confirmation du nombre de copies chromosomiques. 10 blastocystes dérivés de zygotes 0PN ont été testés par PGS. Quatre embryons (44 %) ont été déclarés normaux, deux embryons ont été déclarés anormaux XO et trois embryons ont été déclarés anormaux complexes XY. Aucun transfert d’un blasotocyste utilisable dérivé d’un 0PN n’a encore eu lieu.
Tableau 1 : Statut de la ploïdie des blastocystes 0PN utilisables
| Embryon | Diagnostic durophectoderme |
| 1 | Complexe +5, +8, +16 ; XY |
| 2 | Anormal ; XO |
| 3 | Complexe -2, -3, +6, -8, -12 ; XY |
| 4 | Complexe +3, -5, +19, -15, -16, -17, -18. -19, +20, +21 ; XO |
| 5 | Anormal ; XO |
| 6 | Normal XX |
| 7 | Normal XX |
| 8 | Normal XY |
| 9 | Normal XY |
| 10-24 | Inconnu |
Conclusion : Nos résultats démontrent que les blastocystes utilisables issus de zygotes présentant une formation anormale des pronucléaires (0PN) peuvent se développer en un embryon chromosomiquement normal. Cependant, ces embryons peuvent également présenter une forte probabilité de gains ou de pertes chromosomiques multiples. Ces résultats sont similaires aux rapports précédents sur le potentiel de développement, l’analyse chromosomique et les grossesses en cours à partir de zygotes contenant des pronucléi anormaux1-3. Les patientes doivent être informées des anomalies chromosomiques associées aux blastocystes utilisables non testés provenant de zygotes atypiques. Une étude plus approfondie du statut de ploïdie des blastocystes utilisables dérivés d’embryons zygotes anormaux avec un seul pronucléus (1PN), trois pronucléus (3PN) ou plus (≥4PN) peut fournir des informations supplémentaires concernant la valeur de rétention des zygotes pronucléaires anormaux.