Abstract

BACKGROUND : Les translocations robertsoniennes comportent des risques reproductifs qui dépendent des chromosomes impliqués et du sexe du porteur. Nous décrivons cinq couples qui se sont présentés pour un diagnostic génétique préimplantatoire (DPI). MÉTHODES : Le DPI a été réalisé à l’aide d’une biopsie d’embryon au stade de clivage (jour 3), d’une hybridation in situ par fluorescence (FISH) avec des sondes spécifiques de locus, et d’un transfert d’embryon au jour 4. RÉSULTATS : Le couple A (45,XX,der(14;21)(q10;q10)) avait déjà eu deux grossesses, dont une avec une translocation de la trisomie 21. Une grossesse unique réussie a suivi deux cycles de DPI. Le couple B (45,XX,der(13;14)(q10;q10)) avait fait quatre fausses couches, dont deux avec une translocation de la trisomie 14. Un cycle de DPI a donné lieu à des triplés. Le couple C (45,XX,der(13;14)(q10;q10)) a connu quatre années d’infertilité ; deux cycles ont échoué. Le couple D (45, XY, der(13;14)(q10;q10)) a présenté une oligozoospermie. Une grossesse unique a suivi deux cycles de DPI. Le couple E (45,XY,der(13;14)(q10;q10)) avait un nombre de spermatozoïdes dans la fourchette normale et de faibles niveaux de spermatozoïdes aneuploïdes. Le DPI n’a donc pas été recommandé. Aucune preuve d’une incidence élevée d’embryons présentant des compléments chromosomiques chaotiques ou en mosaïque n’a été trouvée. CONCLUSIONS : Pour les couples fertiles, une évaluation minutieuse des risques et un conseil génétique doivent précéder la considération d’un DPI. Lorsque les couples transloqués ont besoin d’une conception assistée pour une subfertilité, le DPI est un dépistage précieux du déséquilibre, même lorsque le risque d’anomalie chromosomique viable est faible.

Introduction

Les translocations robertsoniennes (fusion centrée de deux chromosomes acrocentriques) se produisent avec une prévalence de ∼1 sur 1000 dans la population générale (Gardner et Sutherland, 1996). Les formes non homologues sont de loin les plus courantes, c’est-à-dire celles impliquant deux chromosomes acrocentriques différents – soit deux chromosomes différents du groupe D (chromosomes 13, 14 et 15), soit deux chromosomes différents du groupe G (21 et 22), soit un chromosome du groupe D et un chromosome du groupe G. Lors de la méiose, ces réarrangements forment des trivalents, dont la ségrégation peut aboutir à des gamètes nullisomiques ou disomiques pour l’un des chromosomes impliqués dans le réarrangement et par conséquent à un zygote avec une trisomie ou une monosomie pour l’un des chromosomes impliqués. Les zygotes présentant une monosomie ne sont pas compatibles avec la vie et la plupart des conceptus de trisomie par translocation devraient entraîner une perte au premier trimestre ou avant ; cependant, certains survivent au-delà du deuxième trimestre et jusqu’au terme.

La translocation robertsonienne la plus courante se situe entre les chromosomes 13 et 14. Cette translocation D/D constitue ~75% de toutes les Robertsoniennes (Gardner et Sutherland, 1996). Le résultat potentiel d’un déséquilibre chromosomique chez le nouveau-né est la trisomie de translocation 13 (syndrome de Patau) ; il existe un risque empirique de survenue au diagnostic prénatal du deuxième trimestre de <0,4% (Boué et Gallano, 1984 ; Gardner et Sutherland, 1996). Il existe également un potentiel de disomie uniparentale (UPD) pour le chromosome 14 suite à une trisomie de sauvetage, avec un risque estimé à ~0,1-0,5% (Gardner et Sutherland, 1996). On s’attend à ce que la trisomie de translocation 14 entraîne une perte au cours du premier trimestre. Pour les porteurs de der(13;14), le risque global de fausse couche ne devrait pas être significativement différent du risque de fond de 15% (Harris et al., 1979) (jusqu’à deux fausses couches) ; cependant, certains individus porteurs de der(13;14) présentent une infertilité ou des avortements spontanés récurrents. Les autres Robertsoniens D/D sont beaucoup moins fréquents et les risques spécifiques n’ont pas été déterminés ; cependant, on peut s’attendre à ce que les der(13;15) et der(14;15) présentent des risques similaires à ceux du der(13;14) (Gardner et Sutherland, 1996).

Le Robertsonien le plus commun après le der(13;14) est le der(14;21). Le résultat déséquilibré potentiel à naître de cette Robertsonienne D/G est la translocation trisomie 21 entraînant le syndrome de Down ; pour les femmes porteuses, le risque empirique de survenue au diagnostic prénatal du deuxième trimestre est de 15 %, avec un risque de 10 % de trisomie 21 à naître plus un petit risque d’UPD 14, comme précédemment. Pour les porteurs masculins, le risque de trisomie 21 par translocation au deuxième trimestre est de <0,5% (Boué et Gallano, 1984 ; Gardner et Sutherland, 1996), peut-être en raison du désavantage sélectif pour les spermatozoïdes portant un homologue supplémentaire du chromosome 21.

On peut s’attendre à ce que les autres Robertsoniens D/G qui impliquent le chromosome 21 présentent des risques reproductifs similaires à ceux de la der(14;21) ; ceux qui impliquent le chromosome 22 ont un risque plus faible puisque la trisomie 22 a un potentiel de viabilité très limité.

Le diagnostic prénatal est disponible pour les porteurs de translocations Robertsoniennes depuis de nombreuses années. Cependant, l’interruption de grossesse en cas de trisomie de translocation n’est pas une option acceptable pour certains couples et, pour les porteurs de ces translocations, il existe un intérêt croissant pour le diagnostic génétique préimplantatoire (DPI) en conjonction avec la conception assistée par FIV ou par injection intracytoplasmique de spermatozoïdes (ICSI).

Le DPI est désormais proposé par une quarantaine de centres dans le monde, dont cinq au Royaume-Uni. L’hybridation in situ en fluorescence (FISH) est utilisée pour la détermination du sexe dans le cas d’affections liées au chromosome X (Handyside et Delhanty, 1997 ; Kuo et al., 1998 ; Staessen et al., 1999 ; Pettigrew et al., 2000) et pour étudier le statut des embryons de couples dont l’un des partenaires est porteur d’un réarrangement chromosomique. Le DPI pour les réarrangements chromosomiques a commencé par la mise au point de sondes spécifiques pour chaque translocation réciproque ou robertsonienne (Munné et al., 1998a), ce qui a permis de distinguer les embryons normaux de ceux qui sont porteurs de la forme équilibrée de la translocation. Une approche plus générale des translocations réciproques est devenue possible (Handyside et al., 1998 ; Scriven et al., 1998) avec le développement de sondes subtélomériques spécifiques pour chaque chromosome (National Institutes of Health and Institute of Molecular Medicine Collaboration, 1996). Cette approche a conduit à des grossesses réussies chez des porteurs de translocation réciproque (Van Assche et al., 1999 ; Munné et al., 2000 ; Scriven et al., 2000) mais ne permet pas de distinguer les embryons “normaux” des embryons “équilibrés”. Un taux de grossesse de 19% par transfert d’embryon a été rapporté pour le DPI de réarrangement chromosomique (ESHRE PGD Consortium Steering Committee, 2000).

Le DPI de translocations robertsoniennes a été entrepris avec succès par plusieurs centres dans le monde, à la fois par biopsie du corps polaire (Munné et al, 1998a,b), et par biopsie de blastomère, où un ou deux blastomères sont prélevés sur l’embryon au stade 6-10 cellules (jour 3 post-fertilisation) (Escudero et al., 2000 ; Munné et al., 2000). Cependant, certains centres ont signalé des niveaux élevés de mosaïcisme et de chaos dans les embryons de porteurs de translocation robertsonienne (Conn et al., 1998, 1999), ce qui a entraîné une réduction des taux de réussite de la grossesse. Ces observations ont conduit à la suggestion que les translocations robertsoniennes pourraient d’une certaine manière prédisposer à la mal-ségrégation et/ou à l’absence de développement normal de l’embryon.

Dans notre propre centre, nous avons évalué un certain nombre de couples robertsoniens et avons entrepris à ce jour sept cycles pour quatre couples, ce qui a donné lieu à trois grossesses et quatre bébés nés. Cet article présente notre expérience des couples Robertsoniens explorant la possibilité d’un DPI et les détails des cycles effectués, y compris les données indiquant que les rapports précédents de niveaux élevés d’embryons anormaux chez ces porteurs de translocation peuvent être au moins en partie artefactuels.

Matériels et méthodes

Caryotypage et bilan cytogénétique pour le DPI

Le caryotypage par analyse chromosomique en métaphase à bande G des lymphocytes de sang périphérique cultivés a été réalisé selon les techniques standard. Les études FISH sur les noyaux en métaphase et interphase ont utilisé les combinaisons de sondes et la méthode décrites ci-dessous. Les deux partenaires ont été évalués pour s’assurer que les sondes s’hybrident comme prévu ; 10 étalements en métaphase ont été examinés pour chaque partenaire et 200 noyaux en interphase ont été évalués. Les profils de signal des sondes dans les noyaux en interphase ont été notés selon les critères de notation classiques (Munné et al., 1998b). Les combinaisons de sondes ont été évaluées qualitativement en ce qui concerne la discrétion et la luminosité du signal, et les données quantitatives ont été utilisées pour estimer l’efficacité de chaque sonde indépendamment et la spécificité de chaque test. Comme cela est requis au Royaume-Uni, une licence a été obtenue auprès de la Human Fertilisation and Embryology Authority (HFEA) pour entreprendre le DPI pour chaque combinaison de sondes différentes.

Les études FISH sur les spermatozoïdes ont été réalisées sur des têtes de spermatozoïdes matures décondensées avec 10 mmol/l de dithiothreitol (DTT) en utilisant les combinaisons de sondes et la méthode décrites ci-dessous.

Stimulation ovarienne, culture d’embryons et biopsie

Ces dernières sont telles que décrites précédemment (Scriven et al, 2000). Brièvement, la réduction de la phase lutéale avec l’acétate de buséréline, agoniste de l’hormone de libération des gonadotrophines, par voie intranasale (Suprefact ; Hoechst) a été suivie d’une stimulation ovarienne avec 225 i.u. par jour de FSH recombinante (Gonal-F, Serono). La gonadotrophine chorionique humaine (HCG ; Profasi, Serono) a été administrée lorsqu’au moins trois follicules avaient un diamètre >18mm. Le prélèvement d’ovocytes a été effectué par ponction guidée par ultrasons 36 heures après l’administration de HCG. Les ovocytes et les embryons ont été cultivés dans des milieux séquentiels FIV (Science Scandinavia, Gothenberg, Suède) sous huile dans de l’air contenant 5% de CO2. Pour le prélèvement des ovocytes et la fertilisation pendant la nuit, le milieu IVF a été utilisé. Les embryons normalement fécondés ont été transférés dans des microgouttes G1.2 le jour 1, et dans des microgouttes G2.2 à midi le jour 2 pour la culture de nuit. Au jour 3, la procédure de biopsie de l’embryon a été effectuée après décompactage dans un milieu de biopsie d’embryon scandinave sans Ca/Mg (Science Scandinavia) et une solution de Tyrode acidifiée pour le forage de la zone. Les blastomères ont été évalués pour la présence de noyaux avant la biopsie, et un blastomère avec un noyau distinct a été identifié pour être retiré de chaque embryon. Les embryons ont ensuite été lavés et replacés dans des microgouttes G2,2 jusqu’au transfert des embryons le jour suivant.

Etalement des noyaux interphasiques des blastomères

Chaque blastomère unique a été transféré dans une goutte de 1-2 μl de solution de Tween 20 à 0,2% dans du HCl 0,01N sur une lame silanisée. Le blastomère a été observé sous un stéréomicroscope pendant l’étalement pour s’assurer de la présence d’un noyau. Les lames ont été laissées sécher à l’air pendant ~20 min, lavées dans du PBS pendant 5 min et déshydratées par une série d’éthanol.

FISH

Les blastomères biopsiés ont été hybridés avec les sondes suivantes : Couple A : indicateur spécifique de locus (LSI) 21 (SpectrumOrange ; Vysis, Inc., USA) et une sonde subtélomérique 14q biotinylée (non commerciale) ; Couples B, C et D : QuintEssential 13 (marqué à la digoxygénine, Appligene Oncor Lifescreen) et TelVysion 14q (SpectrumOrange ; Vysis Inc., USA). Le matériel cible et la sonde ont été codénaturés à 75°C pendant 5 minutes, puis hybridés pendant un minimum de 14 heures à 37°C. Un lavage rigoureux pour éliminer la sonde non liée a été effectué dans une solution saline standard de citrate 2× (SSC) à 70-72°C pendant 5 minutes. La sonde biotinylée a été détectée avec de l’isothiocyanate de fluorescéine (FITC)-Avidine (Vector Labs, Burlingame, CA) ; la sonde marquée à la digoxygénine a été détectée avec du FITC-anti-digoxygénine (Boehringer Mannheim, UK). Les préparations ont été contre-colorées avec du 4,6-diamino-2-phényl-indole (DAPI)/Vectashield (Vector Labs) et visualisées à l’aide d’un microscope à fluorescence Olympus, équipé d’un jeu de filtres Pinkel 83 000. Les images ont été produites en utilisant le logiciel d’imagerie Quips (Vysis, UK).

Les embryons non transférés ont été désagrégés et étalés au jour 4 ou 5 et les noyaux obtenus ont été hybridés avec les mêmes mélanges de sondes que ci-dessus.

Classification des résultats FISH

Les taux d’erreur FISH ont été calculés comme décrit ci-dessus. Les cellules biopsiées ont reçu un statut ‘normal/équilibré’ si la FISH indiquait clairement deux signaux pour chaque chromosome testé, tel que défini par les critères de notation publiés (Munné et al., 1998b). Les embryons entiers ont reçu le statut “normal/équilibré” si la FISH de suivi a montré un modèle de signal uniforme “normal/équilibré” dans les limites du test FISH (intervalle de confiance (IC) de 95 % de la spécificité basée sur le bilan lymphocytaire). Par exemple, lorsque le test FISH avait une spécificité de 88 %, un embryon de suivi se verrait attribuer le statut ” normal/équilibré ” si jusqu’à 3 noyaux sur 12 présentaient des schémas de signal déviants, en supposant qu’aucun mécanisme plausible pour les schémas de signal anormaux (par exemple, une indication claire d’une deuxième lignée cellulaire) ne puisse être invoqué.

Les cellules biopsiées et les embryons entiers se voyaient attribuer un statut ‘déséquilibré’ si les noyaux présentaient une déviation claire et cohérente par rapport au schéma de signal ‘normal/équilibré’.

Les cellules biopsiées se voyaient attribuer un statut ‘non concluant’ si le schéma de signal ne correspondait pas à un résultat normal net, généralement parce que deux signaux se trouvaient à proximité l’un de l’autre, ce qui pouvait être noté soit comme deux signaux, soit comme un signal ‘divisé’. Les embryons entiers se voyaient attribuer un statut ‘non concluant’ si la qualité des noyaux obtenus entraînait une mauvaise hybridation, ce qui signifiait qu’un diagnostic concluant n’était pas possible.

Les embryons entiers se voyaient attribuer un statut ‘mosaïque’ s’il y avait des preuves de deux lignées cellulaires, sur la base de ≥2 noyaux pour chaque lignée cellulaire.

Les embryons entiers se sont vus attribuer un statut ‘chaotique’ s’il y avait une proportion insuffisante (c’est-à-dire en dehors de l’IC à 95%, comme ci-dessus) de noyaux avec des schémas de signaux scorables uniformes pour attribuer l’embryon à l’une des autres catégories.

Résultats

Cas A:

Le partenaire féminin de 39 ans avait le caryotype 45,XX,der(14;21)(q10;q10). Ce couple avait un enfant phénotypiquement normal (caryotype non connu) et une grossesse précédente avait été trouvée avec une translocation trisomie 21 (syndrome de Down). Le bilan FISH de ce couple a montré que les efficacités de la sonde LSI 21 et de la sonde 14q étaient respectivement de 97,4 et 90,7%. La spécificité du test était de 88,3 %. Deux cycles de DPI ont été réalisés.

Dans le premier cycle, 11 ovocytes ont été recueillis, dont sept ont été fécondés normalement, et cinq embryons ont été biopsiés au jour 3. Parmi ceux-ci, quatre ont donné un schéma de signal normal/équilibré dans la cellule biopsiée, et les trois présentant la meilleure morphologie au jour 4 ont été transférés. Aucune grossesse n’a eu lieu. Le cinquième embryon présentait un signal de +14, +21. Les embryons non transférés et deux embryons anormalement fécondés ont été étalés le quatrième jour. La FISH de suivi a confirmé le diagnostic sur l’embryon non transféré, normal/équilibré, tandis que le cinquième embryon a montré un complément chaotique, triploïde. Les résultats sont détaillés dans le tableau I.

Dans le second cycle, 15 ovocytes ont été recueillis, 10 ont été fécondés normalement et neuf embryons ont été biopsiés au jour 3. Parmi ceux-ci, trois présentaient un schéma de signal normal/équilibré ; Les trois ont été transférés et une grossesse unique en est résultée. Le couple a opté pour un prélèvement de villosités choriales à 12 semaines de gestation et il a été démontré que le fœtus présentait la forme équilibrée de la translocation : 45,XX,der(14;21)(q10;q10). Une fille phénotypiquement normale est née à 38 semaines de gestation. Parmi les embryons non transférés, le diagnostic par biopsie a indiqué un cas de +21, -21, +14 et -14, et deux cas non concluants. La FISH de suivi après l’étalement des embryons a confirmé les diagnostics de trisomie 21 et de monosomie 21, mais les noyaux restants des embryons diagnostiqués comme aneuploïdes pour le chromosome 14 étaient cohérents avec un complément chromosomique normal/équilibré. En outre, l’un des embryons dont le diagnostic par biopsie n’était pas concluant était également compatible avec un complément chromosomique normal/équilibré, tandis que l’autre avait dégénéré et qu’un seul noyau a été retrouvé après étalement et qu’aucun diagnostic n’a été obtenu. Un embryon anormalement fécondé s’est révélé être triploïde en mosaïque.

Donc, pour ce couple, où il a été possible de parvenir à un diagnostic et en excluant les embryons anormalement fécondés, le pourcentage global d’embryons compatibles avec une ségrégation alternée (normale/équilibrée) était de 77%, avec 15% compatibles avec une ségrégation adjacente (translocation trisomie ou monosomie). Deux des embryons normaux/équilibrés ont été diagnostiqués comme déséquilibrés lors de la biopsie, probablement en raison d’une erreur dans la technique FISH. Ces résultats sont détaillés dans le tableau I.

Cas B

La partenaire féminine de 34 ans avait le caryotype 45,XX,der(13 ;14)(q10 ;q10) et se présentait avec des antécédents de quatre fausses couches, dont deux avaient fait l’objet d’un caryotype qui avait révélé une trisomie 14. Le bilan FISH a montré que les efficacités de la sonde QuintEssential 13 et de la sonde TelVysion 14q étaient respectivement de 97,2 et 91,0 %. La spécificité du test était de 88,5 %. Un cycle de DPI a été réalisé.

Dix ovocytes ont été recueillis, dont huit ont été fécondés normalement par FIV. Huit embryons ont été biopsiés au jour 3, dont cinq présentaient un schéma de signal normal/équilibré (tableau I). Trois d’entre eux ont été transférés, entraînant une grossesse triple et la naissance ultérieure de deux garçons et d’une fille, tous phénotypiquement normaux et porteurs de la translocation. Parmi les embryons restants, deux ont été diagnostiqués à la biopsie comme étant +13 et un comme étant +14. Les diagnostics de trisomie 14 et d’une des trisomies 13 ont été confirmés lors du suivi ; le troisième embryon anormal s’est avéré avoir un complément chromosomique chaotique. Deux embryons anormalement fécondés ont également été étalés ; l’un était une mosaïque triploïde et l’autre était haploïde.

Parmi les embryons, 63% étaient donc compatibles avec une ségrégation alternée et 25% avec une ségrégation adjacente. Ces résultats sont détaillés dans le tableau I.

Cas C

La partenaire féminine de 37 ans avait un caryotype 45,XX,der(13 ;14)(q10 ;q10). Aucune grossesse n’avait été obtenue après quatre ans sans contraception. Deux cycles de DPI ont été réalisés.

Dans le premier cycle, six ovocytes ont été recueillis dont deux ont été fécondés par FIV. Un embryon était adapté à la biopsie et a été diagnostiqué comme normal/équilibré et transféré. Aucune grossesse n’a eu lieu. Un embryon anormalement fécondé a été étalé et s’est avéré être haploïde.

Dans le second cycle, cinq ovocytes ont été recueillis dont deux étaient adaptés à l’injection en utilisant l’ICSI. Les deux ont donné lieu à des embryons adaptés à la biopsie, ont été diagnostiqués comme normaux/équilibrés et transférés. Aucune grossesse n’a résulté (voir tableau I).

Cas D

Le partenaire masculin de 35 ans (le partenaire féminin avait 34 ans) avait le caryotype 45,XY,der(13 ;14)(q10 ;q10) et présentait une oligozoospermie (0,2-2×106/ml). Le couple n’avait jamais eu de grossesse auparavant. La FISH du sperme a indiqué que 14 % des gamètes étaient aneuploïdes pour le chromosome 13 ou le chromosome 14. Deux cycles de DPI ont été réalisés.

Dans le premier cycle, cinq ovocytes ont été recueillis et quatre ont été fécondés normalement après ICSI. Quatre embryons ont été biopsiés au jour 3 ; trois d’entre eux ont été diagnostiqués comme normaux/équilibrés et deux ont été transférés, mais aucune grossesse n’a résulté. Le troisième embryon normal/équilibré a été étalé et s’est avéré normal/équilibré lors du suivi. Le quatrième embryon n’était pas concluant à la biopsie et s’est avéré avoir une monosomie 14 lors du suivi.

Dans le deuxième cycle, cinq ovocytes ont été recueillis et tous ont été fécondés normalement après ICSI. Cinq embryons ont été biopsiés le jour 3, dont trois ont été diagnostiqués comme normaux/équilibrés et transférés le jour 5. Sur les deux embryons non transférés, l’un a été diagnostiqué comme +13 et l’autre comme -14. Cependant, dans les deux cas, le suivi n’a pas été concluant. Parmi les embryons, 67% étaient donc compatibles avec un complément normal/équilibré pour les chromosomes de la translocation. Une grossesse unique en a résulté et le couple a refusé le diagnostic prénatal. Un examen détaillé de l’anomalie fœtale à 20 semaines de gestation a révélé des anomalies fœtales importantes, notamment une agénésie du corps calleux, une anomalie du tube neural et une anomalie cardiaque du septum ventral. Le caryotype du fœtus s’est révélé être une trisomie 18 primaire à la suite d’une amniocentèse. Cette anomalie n’était probablement pas liée à la translocation, mais un effet interchromosomique ne peut être exclu (Blanco et al., 2000).

Cas E:

Le partenaire masculin de 41 ans (la partenaire féminine avait 37 ans) (caryotype 45,XY,der(13;14)(q10;q10)) avait une numération des spermatozoïdes dans la fourchette normale. La translocation avait été une découverte fortuite et la fertilité du couple n’était pas établie. L’étude des spermatozoïdes a montré que 1,5 % des spermatozoïdes présentaient une disomie 13 ou 14 ; le DPI n’a pas été recommandé car le couple a de grandes chances d’obtenir une grossesse viable et chromosomiquement normale sans DPI.

Ces résultats sont résumés dans les tableaux I et II. La figure 1 montre deux biopsies d’embryons différents et les résultats du suivi.

Discussion

Parmi les embryons normalement fécondés décrits ici, 20% étaient le résultat d’une ségrégation anormale de la translocation. Ce chiffre est considérablement plus élevé que les risques théoriques lors du diagnostic prénatal, probablement parce que, in vivo, la plupart des embryons anormaux ne parviendraient pas à établir une grossesse. Le dépistage des embryons présentant un produit de Robertson déséquilibré avant le transfert devrait augmenter les chances de réussite de la grossesse. Étant donné que les taux globaux de grossesse continue après un DPI sont du même ordre que ceux qui suivent une FIV/ICSI réalisée pour une infertilité, le DPI peut être considéré comme un complément utile à la conception assistée pour les couples présentant des translocations robertsoniennes et ayant également des problèmes de fertilité. Et ce, quelle que soit la nature de la Robertsonienne ou des risques reproductifs empiriques qui lui sont associés.

Cependant, un conseil est nécessaire pour les couples dont la fertilité est avérée. Des antécédents de pertes récurrentes de grossesse peuvent ne pas être associés à la translocation, en particulier dans le cas des translocations robertsoniennes 13;14 ; ce lien ne peut être établi que par le caryotypage des produits de la conception, comme dans le cas B ci-dessus, où deux fausses couches sur quatre s’étaient révélées être des trisomies 14. Si le DPI est demandé pour des couples pour lesquels le lien n’a pas été établi, il convient de se demander s’il est approprié de soumettre une femme fertile à des procédures de FIV lorsque le rôle de la translocation n’est pas connu. La possibilité d’autres facteurs contributifs tels que le syndrome des antiphospholipides doit être étudiée de manière approfondie et le couple doit être conseillé en conséquence.

Les risques empiriques de reproduction pour les porteurs masculins de la translocation Robertsonienne 13;14 sont faibles. Une FISH du sperme utilisant des sondes pour les chromosomes de translocation peut être utilisée pour établir le niveau d’aneuploïdie, et dans le cas d’un nombre normal de spermatozoïdes et de faibles niveaux d’aneuploïdie, le DPI peut ne pas être indiqué, comme dans le cas E. Pour certains mâles qui présentent une oligozoospermie et une translocation robertsonienne, comme dans le cas D, l’ICSI peut être nécessaire pour surmonter l’infertilité, auquel cas le DPI serait un complément utile, comme discuté ci-dessus.

Des niveaux élevés de mosaïcisme et de chaos dans les embryons de porteurs de translocation robertsonienne ont été signalés (Conn et al, 1998, 1999). Ces auteurs ont constaté que seulement 13% des embryons testés étaient normaux ou équilibrés pour les chromosomes de la translocation. Dans les cycles rapportés ici, en excluant les embryons fertilisés anormalement, 70% des embryons étaient normaux ou équilibrés pour les chromosomes de translocation. Seuls deux embryons (6 %) étaient chaotiques, et le véritable mosaïcisme n’a été observé que dans les embryons anormalement fécondés (tableau I). Certains embryons présentaient des cellules tétraploïdes, indiquant un échec de la caryocinèse et/ou de la cytokinèse dans la cellule prélevée et considérée comme une observation normale. Ces embryons n’ont donc pas été classés comme étant en mosaïque. Nos résultats diffèrent du chiffre publié de 51% d’embryons classés comme mosaïques ou chaotiques ; ces niveaux élevés peuvent être le reflet des conditions de culture des embryons (Scriven et al., 2000). Nous concluons que les translocations robertsoniennes ne prédisposent pas à une division cellulaire anormale dans les embryons au stade de clivage, bien qu’il reste possible que certains couples produisent une proportion élevée d’embryons chromosomiquement anormaux (Munné et al., 1996 ; Delhanty et al., 1997), peut-être en raison de défauts dans les mécanismes de contrôle du cycle cellulaire non associés à un quelconque réarrangement chromosomique.

En conclusion, cet article ne soutient pas l’affirmation selon laquelle les translocations robertsoniennes prédisposent à des embryons présentant des divisions de clivage anormales. Le DPI peut donc être envisagé, et s’est avéré être une stratégie efficace pour les porteurs de ces réarrangements chromosomiques. L’absence d’issue favorable pour l’un des couples décrits est probablement due à des problèmes de fertilité prépondérants, sans lien avec la translocation. Nous espérons qu’une grossesse réussie pourra être établie pour ce couple lors d’un prochain cycle. Dans tous les cas de subfertilité, le DPI peut être considéré comme un dépistage précieux du déséquilibre, même lorsque le risque d’anomalie chromosomique viable est faible. Le conseil aux couples porteurs de ces translocations doit tenir compte des antécédents obstétricaux du couple et des autres porteurs dans la famille, conjointement avec les chiffres de risque établis de fausse couche et d’anomalie chromosomique à la naissance ; le DPI n’est pas toujours indiqué.

Les auteurs souhaitent remercier la contribution des autres membres du Centre Guy’s and St Thomas’ pour le DPI.

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