Az új Lactobacillus casei HD-010-vel fermentált hagyma (Allium cepa L.) kivonat antihiperlipidémiás és antioxidatív potenciálja

Abstract

A tanulmány célja az új Lactobacillus casei HD-010-val fermentált hagyma (Allium cepa L.) kivonat antihiperlipidémiás és antioxidatív potenciáljának vizsgálata volt. Általában a fermentált hagymakivonatot antioxidatív aktivitása (ORAC), az adipociták differenciálódását gátló hatása, kvercetin tartalma és antihiperlipidémiás aktivitása miatt használják. Az erjesztett hagymakivonatnak a hiperlipidémiára gyakorolt hatásáról azonban még nem számoltak be ApoE-hiányos egerek orális adagolását követően. A fermentált hagymakivonat hiperlipidémiára gyakorolt hatásának megértése érdekében a jelen vizsgálatban pozitív kontrollként benzafibrátot (10 mg/kg testsúly/nap) alkalmaztunk. Hetente szérumot gyűjtöttünk, hogy elemezzük az alacsony sűrűségű lipoprotein (LDL), a nagy sűrűségű lipoprotein (HDL), a triglicerid (TG) és a koleszterin szintjét, a 3-hidroxi-3-metilgutaryi-CoA (HMG-CoA) reduktáz aktivitást és a koleszterinészter-transzportfehérje (CETP) aktivitását. A fermentált hagymával kezelt csoportban a HDL-szint szignifikánsan emelkedett, míg a TG és az LDL szintje szignifikánsan csökkent a kontrollcsoportéhoz képest. Ezenkívül a HMG-CoA reduktáz gátló aktivitása 20%-kal nőtt a fermentált hagymával kezelt csoportban 100 mg/kg adagban. A CETP aktivitását a fermentált hagymával kezelt csoportokban a kontrollcsoporthoz képest szignifikánsan gátolták. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy az erjesztett hagyma megelőző/terápiás hatással van a hiperlipidémiás betegségekre. Lehetséges, hogy funkcionális élelmiszerként fejleszthető.

1. Bevezetés

A közelmúltban az élelmiszer-fogyasztási minta jelentősen megváltozott a hagyományos erjesztett élelmiszer-alapú bevitelről (Kimchi, erjesztett szójabab stb.) a zsírtartalmú nyugatias étrendre (hús, zsírok stb.) Ázsiában, beleértve Koreát is . A nyugatias táplálkozási mintákról ismert, hogy növelik az elhízás, a magas vérnyomás, a cukorbetegség és a hiperlipidémia kockázatát . A hiperlipidémia a szív- és érrendszeri betegségek kockázati tényezője. A hiperkoleszterinémia ellenőrzése fontos a hiperlipidémia megelőzése érdekében. A véráramban lévő trigliceridszint csökkentése a szív- és érrendszeri betegségben szenvedő betegek egyik kezelési módja az LDL-receptorok indukálásával és a VLDL-szekréció bizonyos gyógyszerekkel történő korlátozásával .

A hiperlipidémia tüneteinek csökkentésére számos gyógyszer létezik, például HMG-CoA reduktáz gátló (sztatinok), PPAR-alfa aktivátor (fibrát), CETP-gátló, epesav-szekvenzánsok és ACAT-gátló . Az ezekkel a gyógyszerekkel történő hosszú távú kezelésnek azonban vannak mellékhatásai. Ezért számos tanulmány próbálta növelni a gyógyszerek hatékonyságát .

A vér koleszterinkoncentrációjának csökkentése a funkcionális élelmiszerek és gyógyszerek fejlesztésének fontos kutatási kérdése a szív- és érrendszeri betegségek kockázatának csökkentése érdekében. A növényekből vagy szervezetekből származó természetes komponensek potenciális jelöltek a betegségek kitörési kockázatának csökkentésére. A hagymát (Allium cepa L.) a vér koleszterinszintjének csökkentésére használják. Ázsiában hagyományosan gyógyszerként használták lázcsökkentő, parazitaellenes, méregtelenítő és bélgyulladáscsökkentő hatása miatt . A hagyma fő vegyületei a flavonoidok (kvercetin, kvercitrin és rutin) és kénvegyületek (allyl-propil-diszulfid, diallyl-diszulfid), amelyek egészségjavító hatásúak . Egy másik módszer a koleszterinszint csökkentésére a Lactobacillus erjesztés alkalmazása. A Lactobacillus koleszterincsökkentő hatását tanulmányozták. Klaver és munkatársai arról számoltak be, hogy a Lactobacillus képes dekonjugálni az epesavat és gátolja a koleszterin működését. A fermentált hagymakivonatnak a hiperlipidémiára gyakorolt hatásáról szájon át történő adagolást követően ApoE-hiányos egerekkel azonban még nem számoltak be. Ezért e vizsgálat célja az új Lactobacillus casei HD-010-vel fermentált hagyma (Allium cepa L.) antihiperlipidémiás és antioxidatív potenciáljára összpontosított a lipidanyagcserében.

2. Anyagok és módszerek

2.1. A fermentált hagyma (Allium cepa L.) antihiperlipidémiás és antioxidatív potenciálja. A baktériumtörzs kiválasztása és tenyésztési körülmények

Tíz törzset azonosítottak fermentált hagymából, és a fő törzs a Lactobacillus casei HD-010 volt (1. táblázat). Pozitív kontrollként a Korean Collection for Type Cultures-ből származó L. casei KCTC 2180-t használtuk. Az azonosított L. casei HD-010 törzset 30°C-on tenyésztettük 10 napig hagymakivonat fermentálásához. A hagymakivonatot kétszeres desztillált vízzel történő háromszori mosás után aprított tiszta hagymával készítettük. Az erjesztéshez 121°C-on 15 percig tartó, autoklávozott hagymakivonatot használtunk. A törzsazonosító táptalajt 5,5%-os MRS húsleves (Difco, Franciaország) és 2,0%-os agar (Difco, Franciaország) felhasználásával készítettük. A folyékony táptalajt a törzsazonosító táptalajként 2,0% agar nélkül készítettük.

Kódnév Eredmények Homológia (%)
HD-001 Bradyrhizobium japonicum 97
HD-002 Bacillus sp. 95
HD-003 Bacillus sp. 95
HD-004 Bacillus clausii 89
HD-005 Janibacter sp. 96
HD-006 Bacillus clausii 90
HD-007 Burkholderia tropica 100
HD-…008 Bacillus sp. 97
HD-009 Paenibacillus sp. 100
HD-010 Lactobacillus casei 100
1. táblázat
Az izolált baktériumok azonosítása 16s-rRNS alapján.

2.2. A fermentált hagymakivonat előállítása

A hagymakivonat fermentálásához 30 literes fermentort (Biostat C Plus, Sartorius, Svédország) használtunk 100%-os hagymakivonattal, steril körülmények között. A hagymakivonat lehűtése után 1%-os HD-010-t, amelyet 37°C-on, rázással (200 rpm) 24 órán keresztül inkubáltunk, beoltottunk a fermentálóba, és 37°C-on, rázással (25 rpm) 10 napig tenyésztettük. Miután a fermentált hagymakivonatot szűrővel (0,2 μm pórusméret) leszűrtük, a kivonatot liofilizáltuk (PVTFD20RS, Ilshin Lab. Co. Ltd., Korea) és a kísérlet elvégzéséig -80°C-on tároltuk. Pozitív kontrollként L. casei KCTC 2180-t használtunk. Ezt ugyanolyan módszerrel állítottuk elő, mint a L. casei HD-010-t.

2.3. Az oxigéngyök-abszorpciós kapacitás (ORAC)

A fermentált hagyma, a szerves oldószeres rétegek, a frakciók és az alfrakciók antioxidáns kapacitását a Gillespie et al. által leírt ORAC-próbával határoztuk meg. Röviden, a mintákat vagy troloxot (0, 6,25, 12,5, 25, 50 és 100 μg/ml) foszfát pufferelt sóoldattal (75 mmol/L, pH 7,4, Thermofisher scientific, Waltham, MA, USA) kevertük. A 96 lyukú lemez mélyedéseibe gyökgenerátorként β-fikoeritrint (0,2 mmol/L) és 2,2′-azobisz(2-amidinopropán) dihidrokloridot (AAPH, 200 mmol/L, Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Osaka, Japán) adtunk. A fluoreszcenciát fluoreszcens ELISA olvasóval (VICTOR®, PerkinElmer, USA) mértük kétpercenként hatvan percen keresztül (gerjesztési hullámhossz: 535 nm, emissziós hullámhossz: 590 nm). Az AUC (görbe alatti terület) kiszámításához használt egyenlet a következő volt:

melyben f0 a 0 percben mért kezdeti fluoreszcencia leolvasás és fi az i (1-től 60-ig terjedő) percben mért fluoreszcencia leolvasás.

2.4. Adipocita sejttenyésztés és differenciálás

A 3T3-L1 sejtvonalakat az American Type Culture Collection-től (ATCC, USA) vásároltuk. A 3T3-L1 preadipocita sejteket 96 lyukú lemezekbe ültettük, lyukanként 1 × 104 sejt sűrűséggel. És 37°C-on, 5% CO2 mellett tenyésztettük Dulbeco’s Modified Eagle Media (DMEM, Gibco, Invitrogen, USA) médiumban, amelyet 10% újszülött borjúszérummal (Gibco, Invitrogen, USA) és 100 U/ml penicillin-streptomicinnel (Gibco, Invitrogen, USA) egészítettünk ki. Ezután a 3T3-L1 preadipocita sejteket 10% magzati szarvasmarha szérumot (FBS, Gibco), 10 μg/ml inzulint (Sigma-Aldrich), 0,5 mM 3-izobutil-1-metilxantint (IBMX, Sigma-Aldrich) és 1 μM dexametazon (Sigma-Aldrich) tartalmazó differenciáló tápfolyadékban (MDI) tenyésztettük. Két nappal a differenciálódás induktorral (MDI, beleértve 0,5 mM IBMX-et, 1 μM dexametazon és 10 μg/ml inzulint) történő stimulálás után a táptalajt 10% FBS-t és 10 μg/ml inzulint tartalmazó DMEM-re váltottuk. Két nappal később a táptalajt ismét 10% FBS/DMEM-re cseréltük. A sejteket kétnaponta 10% FBS/DMEM-ben tenyésztettük. A teljes differenciálódást a 8. napra értük el. A hagymakivonat-mintákat a differenciálódás indukcióját követő négy napon különböző koncentrációban (6,25 ~ 100 μg/ml) adtuk a 3T3-L1 sejtkultúrához.

Az intracelluláris lipidtartalmat 96 lyukú lemezekben mértük AdipoRed™ assay reagenssel (Cambrex, MA, USA). A 8. napon a kezelőközeget eltávolítottuk, és a sejteket 4%-os formaldehid oldatban szobahőmérsékleten (25°C) 5 órán keresztül fixáltuk. A sejtek PBS-szel történő öblítése után minden egyes lyukba 200 μl PBS-t és 5 μl AdipoRed reagenssel adtunk. A 10 perces szobahőmérsékleten történő inkubációt követően a lemezeket fluoreszcens ELISA olvasóval (VICTOR®, PerkinElmer, USA) mértük 485 nm-es gerjesztési hullámhosszon és 535 nm-es emissziós hullámhosszon. Az egyes csoportok értékeit az 50%-os hatékony gátlási koncentráció (EC50) kiszámításához használtuk az adipociták differenciálódásának csökkentésére. Pozitív kontrollként benzafibrátot és szimvasztatint használtunk.

2.5. L. casei HD-010

L. casei HD-010-vel erjesztett hagymakivonat elválasztása és frakcionálásaFagyasztva szárított erjesztett hagymakivonatokat desztillált vízben reszuszpendáltunk és négy különböző szerves oldószerrel (n-hexán, CH2Cl2, etil-acetát és n-butanol) és maradék H2O-val particionáltunk. Ezeket a frakciókat dekompressziós dúsításnak és fagyasztva szárításnak vetettük alá a maradék oldószer eltávolítása érdekében. A CH2Cl2 rétegeket egymás után HP-20, szilikagél és RP-C18 nyitott oszlopkromatográfiára alkalmaztuk azonos oszlopfeltételek mellett (3,8 x 60 cm, 300 g), hogy a L. casei HD-010-vel (LFAc) fermentált hagymából származó aktív vegyületet nyerjük.

2.6. Kvercetin tartalom

A fermentált hagyma kivonatok kvercetin tartalmát analitikus HPLC-vel (Shimadzu CBM-20A Network LC rendszer LC-6AD pumpával, SPD-M20APDA detektorral, SIL-10AF sorozatú automatizált folyadékmintavevővel felszerelve) kvantitatív módon elemeztük. Eclipse Plus-C18 oszlopot (Agilent, 3,0 x 100 mm, 0,35 μm) használtunk a következő feltételek mellett: áramlási sebesség 1,0 ml/perc; teljes futási idő 30 perc; mobil fázis 90% ACN plusz 0,02 M KH2PO4 (pH 2,0 H3PO4-mal); a minták vagy STD injektálási térfogata 20 μl; és hullámhossz 372 nm. A kvercetin (Q4951) összehasonlító származékos standardként (CAS-szám: 117-39-5, Sigma-Aldrich, USA)

2,7. Állatkísérletek

A hím ApoE-hiányos egereket (öt hetesek) a koreai Central Laboratory Animal Inc. szállította, és 23 ± 0,5°C-on, 55 ± 7% páratartalom mellett, fény-sötét ciklusban (12 óra : 12 óra) tartották őket. Minden állatot legalább egy hétig akklimatizáltak. Ketrecben tartották őket, és alacsony zsírtartalmú, alacsony koleszterinszintű D12336 kontrolltáplálékkal etették (Central Laboratory Animal Inc., Szöul, Korea).

Minden állatkísérletet a Kyungpook Nemzeti Egyetem patogénmentes barrier zónájában végeztek. A vizsgálatban alkalmazott összes eljárást a Kyungpook Nemzeti Egyetem Állatgondozási és Állatfelhasználási Bizottsága hagyta jóvá (IACUC jóváhagyási szám: KNU2012-136).

A kontrollcsoportot magas zsírtartalmú diétával etették. A pozitív kontrollcsoportot benzafibráttal (10 mg/kg) etették. Az erjesztett hagymakivonatot három csoportban különböző mennyiségben, 0,5 ml sóoldatban szájon át adagolva etettük (alacsony dózis, 25 mg/kg; közepes dózis, 50 mg/kg; és magas dózis, 100 mg/kg). A csak sóoldatot tartalmazó csoportot negatív kontrollként használtuk (N=10/csoport) . A vizsgálat állatkísérleti tervét az 1. ábra mutatja.

1. ábra
Állatkísérleti terv.

2.7.1. Állatkísérleti terv. A lipidtartalom mérése

A vért az egérből retroorbitális sinus vérzéses módszerrel gyűjtöttük az intraorbitális vénás plexus segítségével hetente hat héten keresztül. A vérmintákat szobahőmérsékleten 30 percig inkubáltuk, majd 4°C-on 600 g-nél 10 percig centrifugáltuk. A széramintákat előkészítettük és a vizsgálatig -80°C-on tároltuk. A HMG-CoA reduktáz és CETP gátló aktivitást az utolsó kísérleti időpontban ( heti minták) gyűjtött szérummintákból mértük. A HMG-CoA reduktáz és CETP gátló aktivitást HMG-CoA reduktáz assay kit (Sigma, USA), illetve CETP assay kit (Biovision, USA) segítségével mértük. A szérumban az összkoleszterin (TC), LDL-koleszterin (LDL-C), HDL-koleszterin (HDL-C), triglicerid (TG) tartalmát Asan kit (Asan medical company, Korea) és Beckman Coulter biokémiai analizátor segítségével mértük.

2.8. Statisztikai elemzés

Az eredmények átlag ± standard eltérés (átlag ± SD) értékben kerülnek bemutatásra. Az adatok statisztikai elemzését kétoldali Student’s t-próbával határoztuk meg.

3. Eredmények és megbeszélés

3.1. A fermentált hagyma antioxidatív aktivitást mutat

Vizsgáltuk a L. casei HD-010-val (LFAc) fermentált hagymakivonat antioxidatív aktivitását ORAC-méréssel. Az LFAc magasabb ORAC-értékkel rendelkezett, mint a pozitív kontrollként használt Trolox (az LFAc-kivonat ORAC-értéke = 1,02).

Az L. casei HD-010-vel fermentált hagymakivonat mely frakciói tartalmaznak antioxidáns összetevőket, a kivonatot négy különböző szerves oldószerrel tovább szeparáltuk az Anyagok és módszerek fejezetben leírtak szerint. Az LFAc-EtOAc frakcióknak volt a legmagasabb ORAC értéke (LFAc-EtOAc ORAC = 1,12) (2. ábra), ami arra utal, hogy a L. casei HD-010-vel fermentált hagymakivonat EtOAc frakciói (LFAc) antioxidatív összetevőt tartalmaztak. Ez az eredmény arra utal, hogy a L, casei HD-010-vel (LFAc) fermentált hagymakivonat antioxidatív aktivitással rendelkezik.

2. ábra
A L. caseiHD-010-val (LFAc) fermentált hagymakivonat frakcióinak antioxidatív aktivitása szerves oldószerekkel. Az antioxidáns vizsgálat során oxigéngyök-abszorpciós kapacitás (ORACPE) értékeket kaptunk a különböző szerves oldószeres frakciók felhasználásával. Pozitív kontrollként troloxot használtunk (az ORAC-érték 1,00 volt). Az adatokat átlag ± SD (n = 3) értékben adtuk meg. #p<0,05 a kontrollcsoporthoz képest (FO kezelt csoport); ##p<0,05 a kontrollcsoporthoz képest (AO kezelt csoport); ###p<0,05 az LFAc kezelt csoporthoz képest; p<0,05 a pozitív kontrollcsoporthoz képest (L. casei KCTC 2180 kezelt csoport); p<0,05 a pozitív kontrollhoz képest (Trolox kezelt csoport); FO, friss hagyma; AO, autokláv hagyma; LFAc, fermentált hagyma L. casei HD-010; Hx, n-hexán; CH2Cl2, diklórmetán; EtOAc, etil-acetát; BuOH, n-butanol; L. casei KCTC 2180, fermentált hagyma L. casei KCTC 2180-zal.

3.2. Az L. casei KCTC 2180, fermentált hagyma L. casei KCTC 2180-val. Adipocita differenciálódás gátlása

A L. casei HD-010-val erjesztett hagyma (LFAc) gátló hatást mutatott az adipociták differenciálódására a friss hagymához vagy az autoklávozott hagymához képest (> 20%). Az LFAc gátló hatása kifejezetten a CH2Cl2 rétegben volt megfigyelhető (> 45%) (3. ábra). Pozitív kontrollként a benzafibrátnak nem volt hatása a differenciálódásra. A szimvasztatinkezelés azonban több mint 90%-os differenciálódásgátlást mutatott. Az LFAc tehát a HMG-CoA reduktáz aktivitás blokkolásával gátló funkciót tölt be.

3. ábra
L. casei HD-010-val (LFAc) fermentált hagyma (Allium cepa L.) kivonatának adipocita differenciálódás gátlása. Az adatok átlag ± SD (n = 3). p<0,05 versus FO, AO, LFAc vagy LFAc-Hx kezelt csoport; #p<0,05 versus pozitív kontroll (benzafibrát kezelt csoport); ##p<0,01 versus pozitív kontroll (benzafibrát kezelt csoport). FO, friss hagyma; AO, autoklávos hagyma; LFAc, L. casei HD-010-val fermentált hagyma; Hx, n-hexán; CH2Cl2, diklórmetán; EtOAc, etil-acetát; BuOH, n-butanol.

3.3. Hx, n-hexán. A L. casei HD-010-val erjesztett hagymakivonat diklórmetán rétegei (LFAc) egyaránt rendelkeznek adipociták differenciálódását gátló és antioxidatív hatással

A fiziológiai aktivitás kiváltására szolgáló LFAc-ban lévő aktív vegyület tisztítása és azonosítása érdekében a CH2Cl2 rétegeket több izolálási eljárásnak vetettük alá (HP-20, szilikagél és RP-C18 nyitott oszlop). A HLFAc-30 és SLFAc-4 frakciókat erős adipocita differenciálódást gátló aktivitással egymás után kaptuk (a dátum nem látható), miután az SLFAc-4 frakciókat RP-C18 nyitott oszlopon tovább izoláltuk.

Az LFAc utáni hiperlipidémia gátló funkció vizsgálatára az MC frakciót HP-20, szilikagél és RP-18 nyitott kromatográfiának vetettük alá. A HP-20-ból származó LFAc-HP3 frakció, a szilikagélből származó LFAc-S4 frakció és a C1-ből származó LFAc-C3 esetében antioxidáns és adipociták differenciálódását gátló hatást figyeltünk meg (2. táblázat).

Minták Gátlás. (EC50 = μg/ml) ORAC
LFAc_CH2Cl2 53.25 1.10 ± 0.015
LFAc_C1 53.41 1.06 ± 0.028
LFAc_C2 56.56 1.04 ± 0.013
LFAc_C3 40.25 1.15 ± 0.021
LFAc_C4 42.98 1.16 ± 0.057
LFAc_C5 >100 ND
Trolox ND 1.00 ± 0.017
Az adatok átlag ± SD (n = 3); p<0.05 a kontrollcsoporthoz képest (PBS kezelt csoport); p<0.05 a pozitív kontrollhoz képest (Trolox kezelt csoport). ND (not detected).
2. táblázat
Adipocita differenciálódás gátlása és az LFAc_S4-ből származó alfrakciók antioxidatív aktivitása C18 nyitott oszlop használatával.

3.4. táblázat. Kvercetin-tartalom

Vékonyréteg-kromatográfiát (TLC) használtunk a nyers hagymakivonat (FO), a sterilizált hagymakivonat (AO) és a fermentált hagymakivonat (LFAc) komponenseinek elkülönítésére. A mintázat nem különbözött a minták között, és négy fő foltot találtunk (az adatok nem láthatóak). Az LFAc-C4 frakció mutatta a legjobb adipociták differenciálódását gátló hatást, és egy hatékony egyetlen frakciót azonosítottak. A kvercetin, a hagyma egyik fő összetevője, az LFAc-C4 frakcióból volt azonosítható. A FO, AO, LFAc és LFAc_CH2Cl2 frakciókat HPLC-vel vizsgálták. A kvercetin-tartalom ezekben a frakciókban a következő volt: FO, 3,90 ± 0,041 mg/ml; AO, 7,13 ± 0,009 mg/ml; LFAc, 2,89 ± 0,064 mg/ml; és LFAc_CH2Cl2, 20,53 ± 0,304 mg/ml. A kvercetin-tartalmat a fermentációs eljárás nem változtatta meg. A probiotikumokkal történő fermentációt követően azonban a kvercetin tartalom közel 10-szeresére nőtt az LFAc-CH2Cl2-ben (4. ábra).

4. ábra
A hagyma (Allium cepa L.) kivonat kvercetin tartalmának mennyisége fermentációval vagy anélkül HPLC analízissel. Az adatok átlag ± SD (n = 3) értékben vannak feltüntetve. FO, friss hagyma; AO, autoklávos hagyma; LFAc, L. casei HD-010-val fermentált hagyma; CH2Cl2, diklórmetán.

3.5. Állatkísérletek
3.5.1. Testtömeg

A fermentált hagymakivonat testtömegre gyakorolt hatását hat héten keresztül vizsgálták magas zsírtartalmú diétával táplált egereken. A fermentált hagymakivonattal etetett csoportban a testtömegben bármilyen jelentős csökkenést észleltek. A hagymában lévő élelmi rostok, flavonoidok és kénes komponensek hatékonyan csökkentették a testtömegüket a csak magas zsírtartalmú diétával táplált csoporthoz képest (az adatok nem láthatóak). Ez az eredmény arra utal, hogy az erjesztett hagymakivonat orális adagolása nincs közvetlen hatással a testsúlyra, ami összhangban van más vizsgálatokkal .

3.5.2. A szérum lipidtartalmának mérése

A szérumot hat héten keresztül hetente gyűjtöttük, és értékeltük az LDL-C, HDL-C, TG és TC tartalmának változását. A kísérlet végén a szérumot a HMG-CoA reduktáz és a CETP gátló hatását vizsgáltuk. A fermentált hagymakivonattal etetett csoportok (alacsony, közepes és magas) az ötödik héttől kezdve szignifikáns csökkenést mutattak az LDL-C szintjében. A közepes és magas fermentált hagymakivonattal etetett csoportok testsúlya folyamatosan csökkent (3. táblázat). Emellett a HDL-C-szint az első héttől az adagolást követő hatodik hétig emelkedett (4. táblázat). Az LSP-11 felülúszóval etetett csoportban a HDL-C és az LDL-C szintje a harmadik és az ötödik héten jelentős változást mutatott. Ezek az adatok arra utalnak, hogy a fermentált hagymakivonat szinergikus hatással lehet a Lactobacillus casei HD-010 másodlagos metabolitjainak funkcióira.

.

Kezelés Dózis
(mg/kg/nap)
Low density lipoprotein (LDL, mg/dl)
0 hét 1 hét 2 hét 3 hét 4 hét 5 hét 6 hét
Kontroll 0 575.9±51.05 620.0±96.49 536.6±93.56 621.9±47.44 509.8±67.23 675.9±54.93 592.4±37.39
Low 25 581.4±81.00 624.1±58.78 462.3±72.85# 624.4±26.62 484.6±52.17# 517.0±92.00 553.5±40.53
Mid 50 532.6±81.58 605.1±63.79 441.3±72.70# 597.1±55.23# 477.1±98.76# 486.7±59.18 547.4±31.61
High 100 517.0±39.48 595.9±64.42 336.4±62.60 591.0±89.04## 454.9±20.30## 484.2±69.66 500.3±77.92
L. casei KCTC 2180 100 612.6±60.79 677.9±114.79 593.6±47.41 723.1±28.63 625.6±55.93 685.7±72.79 624.0±26.55
Benzafibrát 10 597.3±90.47 581.8±40.11 513.4±67.09 652.3±83.81 649.9±69.99 652.4±76.33 590,0±24,63
Az adatok átlag ± SD-ben vannak feltüntetve (10 állat csoportonként; három független kísérletet végeztünk).
A kontroll és a kezelt értékek közötti statisztikai szignifikancia meghatározása kétfarkú Student’s t-teszttel történt p értékkel; p érték < 0.05 és p érték < 0,001 (a kontroll csoporttal szemben); #p érték < 0,05 és ##p érték < 0,001 (a L. casei KCTC 2180 és a benzafibráttal kezelt csoporttal szemben).
3. táblázat
A fermentált hagyma hatása a L. casei KCTC 2180 és benzafibráttal kezelt csoporttal szemben. casei HD-010 szérum alacsony sűrűségű lipoprotein szintjére ApoE-hiányos egerekben.

.

Kezelés Dózis
(mg/kg/nap)
High density lipoprotein (HDL, mg/ dl)
0 hét 1 hét 2 hét 3 hét 4 hét 5 hét 6 hét
Kontroll 0 45.5±7.41 47.1±1.05 44.3±8.95 50.8±3.20 36.0±4.23 31.4±4.43 44.8±2.27
Alacsony 25 45.5±1.06 50.7±1.91 46.2±7.38 57.4±1.28 56.6±9.70 48.0±9.51 45.6±8.59
közép 50 52.8±3.02 58.2±3.77 52.9±6.82## 65.3±0.92 58.6±4.10 51.8±3.41 56.2±7.73
magas 100 56.6±8.96 64.2±6.00 55.4±6.81## 70.3±3.64 66.3±4.18 62.5±5.13 56.6±1.98
L. casei KCTC 2180 100 45.2±3.90 52.7±3.95 38.9±5.06 54.4±2.40 46.3±6.13 48.8±8.62 43.6±6.55
Benzafibrát 10 43.2±2.95 48.0±2.99 39.1±5.29 55.7±4.66 35.8±0.92 32.1±5.85 42.7±6.30
Az adatok átlag ± SD-ben vannak feltüntetve (csoportonként 10 állat; három független kísérletet végeztünk).
A kontroll és a kezelt értékek közötti statisztikai szignifikancia meghatározása kétfarkú Student’s t-próbával történt, és p-értékként van megadva; p-érték < 0,05 és p-érték < 0,001 (a kontroll csoporttal szemben); #p-érték < 0,05 és ##p-érték < 0,001 (a L. casei KCTC 2180 és a benzafibrát kezelt csoporttal szemben).
4. táblázat
A L. casei HD-010-val fermentált hagyma hatása a szérum nagy sűrűségű lipoprotein szintjére ApoE-hiányos egerekben.

A szérum TG szintje minden csoportban enyhén csökkent a kontrollhoz képest. Ez a csökkenés azonban statisztikailag nem volt szignifikáns. Konkrétan a magas fermentált hagymakivonattal etetett csoportban a TG-szint szignifikáns csökkenést mutatott az első, második, harmadik és ötödik héten (5. táblázat). A TC-szint az ötödik héttől kezdve csökkent a fermentált hagymakivonattal etetett csoportban (6. táblázat). A benzafibráttal és Lactobacillus felülúszóval etetett pozitív kontrollcsoport azonban nem mutatott szignifikáns különbséget a TC-szintben a kontrollcsoporthoz képest.

Kezelés Dózis
(mg/kg/nap)
Triglicerid (TG, mg/ dl)
0 hét 1 hét 2 hét 3 hét 4 hét 5 hét 6 hét
Kontroll 0 406.6±35.68 561.2±54.01 334.4±60.37 652.3±65.16 302.3±48.56 412.2±75.99 284.8±54.11
alacsony 25 379.1±76.36 553.5±70.59 301.0±75.14 628.2±63.90 288.3±45.88 396.2±59.68 266.6±23.08
közép 50 363.5±64.19 461.6±99.73 270.1±16.91 581.1±34.41 283.1±43.47 321.0±82.27 265.7±16.24
magas 100 395.5±61.04 449.7±59.96 228.5±42.10 537.3±62.24 273.4±60.84 241.5±68.03 252.5±39.91
L. casei KCTC 2180 100 410.4±78.77 475.9±41.84 275.2±37.67 507.0±24.04 241.7±57.09 255.9±65.39 270.3±26.89
Benzafibrát 10 380.5±86.76 529.5±90.37 285.3±52.13 656.7±71.61 257.2±33.35 396.9±99.12 273.6±39.73
Az adatok átlag ± SD-ben szerepelnek (csoportonként 10 állat; három független kísérletet végeztek).
A kontroll és a kezelt értékek közötti statisztikai szignifikancia meghatározása kétfarkú Student’s t-próbával történt, és p-értékként van megadva; p-érték < 0,05 és p-érték < 0,001.
5. táblázat
A fermentált hagyma hatása L. casei HD-010 hatására a szérum trigliceridszintre ApoE-hiányos egerekben.

.

Kezelés Dózis
(mg/kg/nap)
Teljes koleszterinszint (TC, mg/dl)
0 hét 1 hét 2 hét 3 hét 4 hét 5 hét 6 hét
Kontroll 0 702.7±40.72 779.4±88.99 647.8±89.39 803.2±41.15 621.8±71.15 789.7±55.05 699.1±41.20
Low 25 702.7±88.48 785.5±63.45 568.7±82.61 807.5±19.50 598.8±46.83 644.3±79.84 644.8±39.13
közép 50 658.1±73.41 755.7±51.34 548.3±67.92 778.6±57.04 592.3±91.15 602.7±62.89 641.1±60.00
magas 100 652.7±28.06 750.1±60.31 437.4±61.70 768.7±83.53# 575.9±20.40# 595.0±73.14 619,4±78,28
L. casei
KCTC 2180
100 739,9±48,37 825,8±113,75 687,6±52.21 879.0±32.08 720.2±66.89 785.8±79.01 715.2±33.01
Benzafibrát 10 716.6±90.81 735.7±26.94 609.5±66.18 839.3±92.52 737.1±73.97 763.9±87.42 687.4±19.36
Az adatok átlag ± SD (csoportonként 10 állat; három független kísérletet végeztek).
A kontroll és a kezelt értékek közötti statisztikai szignifikancia meghatározása kétfarkú Student’s t-próbával történt, és p-értékként van megadva; p-érték < 0,05 és p-érték < 0,001 (a kontroll csoporttal szemben); #p-érték < 0,05 és ##p-érték < 0,001 (a L. casei KCTC 2180 és a benzafibrát kezelt csoporttal szemben).
6. táblázat
A L. casei HD-010-val fermentált hagyma hatása a szérum összkoleszterinszintjére ApoE-hiányos egerekben.

Az ApoE-hiányos egerek modelljét használtuk annak érdekében, hogy felmérjük a fermentált hagyma kivonat hatékonyságát a lipidfelhalmozódás csökkentésében, a HMG-CoA reduktáz gátlásában és a CETP gátlásában. A HMG-CoA reduktáz részt vesz a koleszterinszintézisben . A fermentált hagymakivonat beadását követően csökkent. Ez a csökkenés azonban statisztikailag nem volt szignifikáns (5. ábra). A CETP fehérje a HDL és az LDL szállítójaként működik a szervezetbe, a HMG-CoA reduktáz pedig részt vesz a koleszterinszintézisben . Amint az 5. ábra mutatja, a CETP-aktivitás és a HMG-CoA reduktáz jelentősen csökkent a fermentált hagymakivonat adagolását követően (5. ábra). Ezek az adatok arra utalnak, hogy az erjesztett hagymakivonat a CETP-aktivitás gátlásán keresztül hatékonyan gátolhatja a bélrendszeri zsíradszorpciót.

(a)
(a)
(b)
(b)

(a)
(a)(b)
(b)

5. ábra
A fermentált hagyma hatása L. caseiHD-010 hatása a szérum CETP és HMG- CoA reduktáz aktivitásra ApoE-hiányos egerekben hat hét után. Az adatok átlag ± SD-ben vannak feltüntetve (csoportonként 10 állat; három független kísérletet végeztünk). A kezeletlen és a kezelt értékek közötti statisztikai szignifikancia meghatározása kétfarkú Student’s t-próbával történt, és p-értékként van megadva; p-érték < 0,05 és p-érték < 0.001(kontra kontrollcsoport); #p érték < 0,05 és ##p érték < 0,001 (kontra L. casei KCTC 2180 és benzafibrát kezelt csoport).

A hiperlipidémia fontos kérdés az egészségügyben. Számos súlyos szív- és érrendszeri betegségben játszik szerepet. Számos kísérleti és klinikai vizsgálat kimutatta, hogy a hiperlipidémia magas vérnyomást, cukorbetegséget és elhízást okozhat .

Sok tanulmány számolt be arról, hogy a hagyma összetevői vagy a Lactobacillus csökkenthetik a vér lipidtartalmát. A hagyma jól ismert hagyományos gyógymód. Számos epidemiológiai tanulmányban vizsgálták . Az ázsiai országokban a dialilszulfidot és kvercetint tartalmazó hagyma és fokhagyma növényeket a szív- és érrendszeri betegségek megelőzésére használják. A hagyma körülbelül 90% vizet, 7 ~8% cukrot (főleg fruktózt) és kisebb mennyiségű vitamint tartalmaz . Az S-metil-L-cisztein-szulfoxid a hagyma egyik összetevője. Csökkentheti a vér lipidtartalmát . A kvercetin hasonló hatást fejt ki a lipidtermelés és szintézis csökkentésében állatkísérletben . A Lactobacillus szintén csökkentheti a vér koleszterinszintjét. Számos tanulmány kimutatta, hogy a Lactobacillus képes gátolni az epesav-felszívódást és a koleszterin sejtfalhoz való kötődését . A fermentált hagymakivonatot azonban még nem vizsgálták jól. Kevés kutatócsoport tett kísérletet fermentált hagymakivonat italtermék kifejlesztésére.

Ebben a tanulmányban megpróbáltuk azonosítani a hagyma fermentálásához megfelelő baktériumot és meghatározni a vérzsírszintre gyakorolt hatását. Adataink arra utalnak, hogy a fermentált hagymakivonat orális adagolással hatással van a lipidanyagcserére.

4. Következtetések

A fermentált hagyma antihiperlipidémiás hatásáért felelős fő aktív anyag a kvercetin volt. Eredményeink arra utalnak, hogy a fermentált hagyma megelőző/terápiás hatással van a hiperlipidémiás betegségekre. Lehetséges, hogy funkcionális élelmiszerként fejleszthető.

Adatok elérhetősége

Az adatok a http://www.nodagi.net online adattárához kapcsolódnak.

Érdekütközések

A szerzők kijelentik, hogy a cikk publikálásával kapcsolatban nincsenek érdekellentétek.

A szerzők hozzájárulása

Woong-Suk Yang és Jin-Chul Kim egyenlő mértékben járultak hozzá a munkához.

A köszönetnyilvánítás

A jelen tanulmányt részben a Nodaji Co. Ltd., (Pohang, Korea) támogatta a 2012-es évben.

Vélemény, hozzászólás?

Az e-mail-címet nem tesszük közzé.