Előadás a következő helyen: ASRM 2017 – San Antonio, Texas
Célkitűzés: A két pronukleont (0PN) nem mutató petesejtekből származó felhasználható embriók előfordulásának és ploidia státuszának meghatározása a megtermékenyítés értékelésének időpontjában.
Design:
Anyagok és módszerek: Összesen 3370 blasztocisztát azonosítottak, amelyek morfológiailag alkalmasak voltak friss embrióátültetésre, üvegesítésre vagy trophectoderma-biopsziára a ploidia-státusz genetikai vizsgálatára, majd üvegesítésre (azaz felhasználható blasztociszták). A felhasználható blasztocisztákat az 5., 6. vagy 7. napon nyerték. Az érett petesejteket ICSI-vel termékenyítették meg, és a pronukleáris értékelést inverz mikroszkóp segítségével végezték el és rögzítették 16-18 órával a megtermékenyítés után. A 2 pronukleussal rendelkező embriókat elkülönítettük a 0PN, 1PN, 3PN és ≥4PN zigótákból származó összes többi embriótól. Az embriókat folyamatos, egyetlen táptalajon (Irvine Scientific) tenyésztettük csoportosan. A megfelelő blasztociszták kromoszóma-kópiaszámát az Illumina MiSeq platformmal vizsgáltuk. A normálisnak jelentett embrióknál nem volt kimutatható kópiaszám-eltérés, ≤30%-os küszöbértéknél. Az 1., 2., 3., 4., 5., 10., 12., 17., 19. és/vagy 22. kromoszóma teljes kromoszóma nyereségére/veszteségére ≥50%-os küszöbértéket határoztak meg. A 6., 7., 8., 9., 11., 13., 14., 15., 16., 18., 20., 21., X, Y kromoszómákra és bármelyik kromoszóma szegmentális duplikációjára és/vagy deléciójára ≥30%-os küszöbértéket határoztak meg. A komplex rendellenesség eredményét három vagy több kópiaszám-rendellenesség kombinációjaként definiáltuk, amelyek triszómiából és/vagy monoszómiából állnak.
Eredmények: A 18 hónap alatt 830 friss petesejt-nyerésből 7258 olyan zigóta született, amelyekben két haploid pronukleus volt (2PN). Ezekből a 2PN zigótákból 3349 használható blasztociszta fejlődött ki (46%). A petesejt-visszanyerések 2,9%-ában a megtermékenyítés értékelésének időpontjában pronukleusokkal nem rendelkező (0PN) petesejtekből származó, felhasználható blasztociszták keletkeztek. 24 különböző betegtől származó 24 felhasználható blasztocisztát (0PN zigótákból) vitrifikáltak. E blasztociszták közül 14-et (58%) nem vizsgáltak meg a kromoszóma-kópiaszám megerősítésére. 10 0PN zigótából származó blasztocisztát PGS-szűréssel vizsgáltak. Négy embriót (44%) normálisnak, míg két embriót kóros XO-nak és három embriót komplex kóros XY-nak nyilvánítottak. 0PN-ből származó, használható blasotocysta átültetésére még nem került sor.
1. táblázat:
| Embrió | Tropektoderma diagnózis |
| 1 | komplex +5, +8, +16; XY |
| 2 | rendellenes; XO |
| 3 | komplex -2, -3, +6, -8, -12; XY |
| 4 | Komplex +3, -5, +19, -15, -16, -17, -18. -19, +20, +21; XO |
| 5 | Abnormális; XO |
| 6 | Normális XX |
| 7 | Normális XX |
| 8 | Normális XY |
| 9 | Normális XY |
| 10-24 | Nem ismert |
Következtetés: Eredményeink azt mutatják, hogy a rendellenes pronukleáris (0PN) képződéssel rendelkező zigótákból származó felhasználható blasztocisztákból kromoszómailag normális embrió fejlődhet. Ezekben az embriókban azonban nagy valószínűséggel többszörös kromoszóma-nyereség vagy -veszteség is előfordulhat. Ezek az eredmények hasonlóak a fejlődési potenciálról, a kromoszómaanalízisről és a rendellenes pronukleuszt tartalmazó zigótákból származó, folyamatban lévő terhességekről szóló korábbi jelentésekhez1-3. A betegeket tanácsokkal kell ellátni az atipikus zigótákból származó, nem vizsgált, felhasználható blasztocisztákhoz kapcsolódó kromoszóma-rendellenességekkel kapcsolatban. Az abnormális zigótaembriókból származó, egyetlen pronukleussal (1PN), három pronukleussal (3PN) vagy annál magasabb (≥4PN) értékkel rendelkező felhasználható blasztociszták ploidia státuszának további vizsgálata további információt nyújthat az abnormális pronukleáris zigóták megtartási értékével kapcsolatban.