hi
como são diferentes EGFP e GFP um do outro?
e os anticorpos GFP também reconhecem EGFP? se ambos requerem anticorpos diferentes podem me dizer seus nomes
thanks

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O EGFP (Enhanced GFP) e GFP diferem para alguns aminoácidos que fazem o EGFP fluorescer mais forte do que a GFP. Um anticorpo anti-GFP pode reconhecer também o EGFP. Eu uso um anti-GFP da Abcam para reconhecer o EGFP.

EGFP é um mutante da GFP. Ele aumentou a fluorescência e o pico de excitação principal da proteína foi deslocado para 490 nm com o pico de emissão mantido a 509 nm (EGFP).
U deve ser capaz de detectar EGFP com anticorpos anti-GFP.

EGFP também é considerado um pouco menos tóxico para as células que se expressam. Todos os anticorpos GFP com os quais trabalhei identificam EGFP, bem como GFP nativos. O de clontech é ótimo!

É possível mudar EGFP para RFP ou YFP por simples mutagênese?

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O anti-GFP policlonal da sinalização celular funciona bem, sem diferença para GFP, EGFP ou mGFP originais;
CFP e YFP são mutações de GFP, acho que a clonagem com os vetores correspondentes parece ser mais simples do que a mutação de GFP; RFP? – nunca ouvi falar, DSred (Clontech) funciona bem

Prefiro trabalhar com os respectivos vectores protien fluorescentes do que mutá-los. É muito mais fácil. Em vez do YFP, eu trabalharia com venus ( uma versão modificada do YFP) e para RFP, eu trabalharia com DsRed2 ou mCherry ou mStrawberry (Tsien’s lab) – dependendo dos experimentos.

dsRed e as outras proteínas fluorescentes vermelhas são bastante distintas das GFPs, portanto anticorpos para GFP não funcionarão com elas. As variantes CFP, YFP e eGFP são todas pequenas alterações da GFP e serão detectadas por anticorpos GFP.

Souvi dizer que estas são diferentes por causa de uma mutação pontual. Fenilalanina para Leucina se eu me lembro bem.