Apresentado em: ASRM 2017 – San Antonio, Texas
Objectivo: Para determinar a ocorrência e estado de ploidia de embriões utilizáveis derivados de oócitos que não apresentem dois pronúcleos (0PN) no momento da avaliação da fertilização.
Design: Estudo retrospectivo em laboratório privado de fertilização in vitro.
Materiais e Métodos: Um total de 3.370 blastocistos foram identificados como sendo morfologicamente adequados para a transferência de embriões frescos, vitrificação ou biópsia de trofetos para testes genéticos de estado ploidístico seguido de vitrificação (ou seja, blastocistos utilizáveis). Os blastocistos utilizáveis foram obtidos nos dias 5, 6, ou 7. Os oócitos maduros foram fertilizados usando ICSI e a avaliação pronuclear foi feita e registrada usando um microscópio invertido 16-18 h após a inseminação. Embriões com 2 pronúcleos foram separados de todos os outros embriões provenientes de 0PN, 1PN, 3PN e ≥4PN zigotos. Os embriões foram cultivados em um único meio de cultura contínuo (Irvine Scientific). O número de cópias cromossômicas foi avaliado para blastocistos adequados com a plataforma Illumina MiSeq. Os embriões relatados como normais não apresentaram aberração detectável do número de cópias, com um limiar de ≤30%. Um limiar de ≥50% foi definido para qualquer ganho/perda cromossômica inteira para os cromossomos 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12, 17, 19, e/ou 22. Um limiar de ≥30% foi definido para os cromossomas 6, 7, 8, 9, 11, 13, 14, 15, 16, 18, 20, 21, X, Y e quaisquer duplicações e/ou exclusões segmentares para qualquer um dos cromossomas. Um resultado de anormalidade complexa foi definido como uma combinação de três ou mais anormalidades de número de cópias consistindo de trissomia e/ou monossomia.
Resultados: No período de 18 meses, 830 novas retiradas de oócitos resultaram em 7.258 zigotos com dois pronúcleos haplóides (2PN). Estes 2PN zigotos desenvolveram-se em 3.349 blastocistos utilizáveis (46%). 2,9% dos oócitos recuperados tinham blastocistos utilizáveis derivados de oócitos que não apresentavam pronúcleos (0PN) no momento da avaliação da fertilização. 24 blastocistos utilizáveis (de 0PN zigotos) de 24 pacientes diferentes foram vitrificados. 14 (58%) desses blastocistos não foram testados para confirmação do número de cópias cromossômicas. 10 blastocistos derivados de zigotos 0PN foram testados pelo PGS. Quatro embriões (44%) foram relatados como normais enquanto dois embriões foram relatados como XO anormal e três embriões como XY anormal complexo. Ainda não ocorreu a transferência de um blasotocisto utilizável derivado de um 0PN.
Tabela 1: Ploidy Status of Usable 0PN Blastocysts
| Embryo | Trophectoderm Diagnosis |
| 1 | Complex +5, +8, +16; XY |
| 2 | Anormal; XO |
| 3 | Complexo -2, -3, +6, -8, -12; XY |
| 4 | Complexo +3, -5, +19, -15, -16, -17, -18. -19, +20, +21; XO |
| 5 | Anormal; XO |
| 6 | Normal XX |
| 7 | Normal XX |
| 8 | Normal XY |
| 9 | Normal XY |
| 10-24 | Desconhecido |
Conclusão: Os nossos resultados demonstram que os blastocistos utilizáveis derivados de zigotos com formação pronuclear anormal (0PN) podem evoluir para um embrião cromossomicamente normal. No entanto, estes embriões também podem ter uma alta possibilidade de múltiplos ganhos ou perdas cromossômicas. Estes resultados são semelhantes aos relatórios anteriores de potencial de desenvolvimento, análise cromossômica e gravidezes em curso de zigotos contendo pronúcleos anormais1-3. Os pacientes devem ser orientados quanto às anormalidades cromossômicas associadas a blastocistos não testados derivados de zigotos atípicos. Mais investigações sobre o estado ploidístico de blastocistos utilizáveis derivados de embriões zigóticos anormais com um único pronúcleo (1PN), três pronúcleos (3PN) ou superior (≥4PN) podem fornecer mais informações sobre o valor de retenção de zigotos pronucleares anormais.