Prezentat la: ASRM 2017 – San Antonio, Texas
Obiectiv: Pentru a determina apariția și starea de ploidie a embrionilor utilizabili derivați din ovocite care nu prezintă doi pronuclei (0PN) în momentul evaluării fertilizării.
Design: Studiu retrospectiv într-un laborator privat de fertilizare in vitro.
Materiale și metode: Un total de 3.370 de blastociste au fost identificate ca fiind morfologic adecvate pentru transferul de embrioni proaspeți, vitrificare sau biopsie de trophectoderm pentru testarea genetică a statutului de ploidie urmată de vitrificare (adică blastociste utilizabile). Blastocistele utilizabile au fost obținute în ziua 5, 6 sau 7. Ovocitele mature au fost fertilizate prin ICSI, iar evaluarea pronucleară a fost efectuată și înregistrată cu ajutorul unui microscop inversat la 16-18 ore după inseminare. Embrionii cu 2 pronuclei au fost separați de toți ceilalți embrioni proveniți din zigoturile 0PN, 1PN, 3PN și ≥4PN. Embrionii au fost cultivați în grup într-un mediu de cultură unic continuu (Irvine Scientific). Numărul de copii cromozomiale a fost evaluat pentru blastocistele adecvate cu ajutorul platformei Illumina MiSeq. Embrionii raportați ca fiind normali nu au avut nicio aberație detectabilă a numărului de copii, la un prag de ≤30%. Un prag de ≥50% a fost definit pentru orice câștig/pierdere de cromozomi întregi pentru cromozomii 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12, 17, 19 și/sau 22. Un prag de ≥30% a fost definit pentru cromozomii 6, 7, 8, 9, 11, 13, 14, 15, 16, 18, 20, 21, X, Y și pentru orice duplicații și/sau deleții segmentare pentru oricare dintre cromozomi. Un rezultat de anomalie complexă a fost definit ca o combinație de trei sau mai multe anomalii ale numărului de copii constând în trisomie și/sau monosomie.
Rezultate: Pe parcursul a 18 luni, 830 de prelevări de ovocite proaspete au avut ca rezultat 7.258 de zigoți cu doi pronuclei haploizi (2PN). Acești zigoți 2PN s-au dezvoltat în 3.349 de blastociste utilizabile (46%). 2,9% dintre prelevările de ovocite au avut blastociste utilizabile derivate din ovocite care nu prezentau pronuclei (0PN) în momentul evaluării fertilizării. Au fost vitrificate 24 de blastociste utilizabile (din zigoți 0PN) de la 24 de pacienți diferiți. 14 (58%) dintre aceste blastociste nu au fost testate pentru confirmarea numărului de copii cromozomiale. 10 blastociste derivate din zigoturi 0PN au fost examinate prin PGS. Patru embrioni (44%) au fost raportați ca fiind normali, în timp ce doi embrioni au fost raportați ca fiind anormali XO și trei embrioni ca fiind anormali XY complex. Nu a avut loc încă niciun transfer al unui blastocist utilizabil derivat dintr-un 0PN.
Tabelul 1: Starea de ploidie a blastocisturilor 0PN utilizabile
| Embrion | Trophectoderm Diagnostic |
| 1 | Complex +5, +8, +16; XY |
| 2 | Anormal; XO |
| 3 | Complex -2, -3, +6, -8, -12; XY |
| 4 | Complex +3, -5, +19, -15, -16, -17, -18. -19, +20, +21; XO |
| 5 | Anormal; XO |
| 6 | Normal XX |
| 7 | Normal XX |
| 8 | Normal XY |
| 9 | Normal XY |
| 10-24 | Inconștient |
Concluzie: Rezultatele noastre demonstrează că blastocistele utilizabile derivate din zigoți cu formare pronucleară anormală (0PN) se pot dezvolta într-un embrion normal din punct de vedere cromozomial. Cu toate acestea, acești embrioni pot avea, de asemenea, o mare posibilitate de câștiguri sau pierderi cromozomiale multiple. Aceste rezultate sunt similare cu rapoartele anterioare privind potențialul de dezvoltare, analiza cromozomială și sarcinile în curs de desfășurare provenite de la zigoți care conțin pronuclei anormali1-3. Pacientele ar trebui să fie consiliate cu privire la anomaliile cromozomiale asociate cu blastocistele utilizabile netestate derivate din zigoți atipici. Investigarea suplimentară a statutului de ploidie a blastocisturilor utilizabile derivate din embrioni zigotici anormali cu un singur pronucleu (1PN), trei pronuclei (3PN) sau mai mare (≥4PN) poate oferi informații suplimentare cu privire la valoarea de retenție a zigoților cu pronucleare anormale.
.