Hodnocení zákazníků
Citace použití produktu(2)
Srovnání cen
Popis
Poly DYKDDDDK (FLAG) Peptid lyofilizovaný prášek byl syntetizován 23 aminokyselinovými zbytky o molekulové hmotnosti 2 864 Da. V peptidu se třikrát opakuje motiv Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp. Osm aminokyselin na C-konci tvoří klasickou sekvenci FLAG (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).
Vlastnosti
Bílá
Prášek
Lyofilizovaný prášek
95.33 % (poslední šarže) Poly FLAG peptid lyofilizovaný prášek
(Doporučená pracovní koncentrace je 200-400 μg/ml pro eluci fúzních proteinů FLAG z kuliček Anti-DYKDDDDK (FLAG).
modrém ledu
2-8 °C
Použití
Pro použití při kompetitivní eluci fúzních proteinů DYKDDDDK (FLAG) z ANTI-FLAGmonoklonální protilátky v roztoku nebo vázané na agarózu na kuličkách Anti-DYKDDDDK (FLAG).
Pozor
1. Před prvním použitím si pečlivě přečtěte návod k použití;
2. Během používání a skladování kuliček se vyhněte zmrazování, sušení a vysokorychlostní centrifugaci;
3. Tento výrobek je určen pouze pro R&D použití, nikoli pro léky, domácnost nebo jiné použití. Informace o nebezpečnosti a bezpečném zacházení naleznete v bezpečnostním listu.
Postup
Eluce peptidů fúzního proteinu DYKDDDDK(FLAG) z kuliček Anti-DYKDDDDK(FLAG)
1. Důkladně suspendujte Anti-Flag Affinity Gel v lahvičce, aby byla suspenze pryskyřice rovnoměrná. Rychle přeneste 10 μl suspenze gelu (přibližně 5 μl objemu zabaleného gelu) do čerstvé zkumavky.
2. Přidejte 0,6 ml TBS. Důkladně suspendujte Anti-Flag Affinity Gel pipetováním. Odstřeďujte pryskyřici při 5000 otáčkách za minutu po dobu 30 sekunda opatrně odstraňte supernatant. Ujistěte se, že jste odstranili veškerý promývací pufr, aniž byste pryskyřici vyhodili. Opakujte 3-4krát.
3. K promyté pryskyřici přidejte 500 μl buněčných periplazmatických extraktů.
4. Jemně míchejte vzorky po dobu 2 hodin při 4 °C.
5. Odstřeďujte pryskyřici po dobu 30 sekund při 5000 ot/min. Přeneste supernatant do čerstvé zkumavky.
6. Promývejte pryskyřici 0,5 ml TBS, dokud OD280 supernatantu nebude číst＜0,05.
7. Eluce fúzního proteinu DYKDDDDK (FLAG) konkurencí s peptidem Poly DYKDDDDK (FLAG). Vázaný fúzní protein DYKDDDDK(FLAG) eluujte kompetitivní elucí s pěti alikvoty roztoku o objemu jedné kolony obsahujícího 200-400 ug/ml peptidu Poly DYKDDDDK(FLAG) v TBS.
8. Recyklace kuliček Anti-DYKDDDDK(FLAG)
Poly DYKDDDDK(FLAG) Peptidem nemusí eluovat veškerý DYKDDDDK(FLAG) Fusion Protein navázaný na kuličky Anti-DYKDDDDK(FLAG). Doporučuje se, aby kuličky Anti-DYKDDDDK(FLAG) byly ihned po použití regenerovány promytím třemi alikvotními dávkami 0,1 M glycinu HCl, pH 3,5 o objemu 5 ml. Gel by měl být okamžitě reequilibrován v TBS, dokud výtok nebude mít neutrální pH.
Poznámka: Nenechávejte kuličky Anti-DYKDDDDK(FLAG) v glycin HCl déle než 20 minut.
9. V případě, že se kuličky Anti-DYKDDDDK(FLAG) nacházejí v glycin HCl, je třeba je vyčistit. Uchovávání kuliček Anti-DYKDDDDK(FLAG)
Kulečky Anti-DYKDDDDK(FLAG) třikrát promyjte 5 ml 50% glycerolu s 10mM fosforečnanem sodným, 150 mM chloridem sodným, pH 7,4, s obsahem 0.Pak přidejte dalších 5 ml 50% glycerolu s 10 mM fosforečnanem sodným, 150 mM chloridem sodným, pH 7,4, obsahujícím 0,02% (w/v) azidu sodného a uchovávejte při -20 °C bez vypouštění.
Skladování & stabilita
Přípravek skladujte při teplotě 2-8°C.
Soubor ke stažení
Poly FLAG peptid lyofilizovaný prášek