Præsenteret på: ASRM 2017 – San Antonio, Texas
Objektiv: At bestemme forekomsten og ploidystatus af brugbare embryoner, der stammer fra oocytter, der ikke viser to pronukler (0PN) på tidspunktet for befrugtningsvurderingen.
Design: Retrospektiv undersøgelse i et privat laboratorium for in vitro-befrugtning.
Materialer og metoder: I alt 3.370 blastocyster blev identificeret som værende morfologisk egnede til overførsel af friske embryoner, vitrificering eller trophectoderm biopsi til genetisk test af ploidystatus efterfulgt af vitrificering (dvs. brugbare blastocyster). Brugbare blastocyster blev opnået på dag 5, 6 eller 7. Modne oocytter blev befrugtet ved hjælp af ICSI, og der blev foretaget og registreret en pronuklear vurdering ved hjælp af et inverteret mikroskop 16-18 timer efter inseminationen. Embryoner med 2 pronukler blev adskilt fra alle andre embryoner fra 0PN-, 1PN-, 3PN- og ≥4PN-zygoter. Embryoerne blev gruppedyrket i et kontinuerligt enkeltkulturmedium (Irvine Scientific). Det kromosomale kopiantal blev vurderet for egnede blastocyster med Illumina MiSeq-platformen. Embryoner, der blev rapporteret som normale, havde ingen påviselig afvigelse i kopieringsnummeret ved en tærskelværdi på ≤30 %. En tærskelværdi på ≥50 % blev defineret for enhver hel kromosomforøgelse/-tab for kromosomerne 1, 2, 3, 4, 4, 5, 10, 12, 17, 19 og/eller 22. Der blev fastsat en tærskel på ≥30 % for kromosomerne 6, 7, 8, 9, 11, 13, 14, 14, 15, 16, 18, 20, 21, X, Y og eventuelle segmentale duplikationer og/eller deletioner for nogen af kromosomerne. Et resultat af en kompleks abnormitet blev defineret som en kombination af tre eller flere kopieringsnummeranormaliteter bestående af trisomi og/eller monosomi.
Resultater: I løbet af 18 måneder resulterede 830 friske oocytudtagninger i 7 258 zygoter med to haploide pronuclei (2PN). Disse 2PN-zygoter udviklede sig til 3 349 anvendelige blastocyster (46 %). 2,9 % af oocytudtagningerne havde brugbare blastocyster afledt af oocytter, der ikke viste pronuclei (0PN) på tidspunktet for befrugtningsvurderingen. 24 anvendelige blastocyster (fra 0PN-zygoter) fra 24 forskellige patienter blev vitrificeret. 14 (58 %) af disse blastocyster blev ikke testet med henblik på bekræftelse af kromosomalt kopiantal. 10 blastocyster afledt af 0PN-zygoter blev screenet ved PGS. Fire embryoner (44 %) blev rapporteret som normale, mens to embryoner blev rapporteret som unormale XO-embryoner og tre embryoner som komplekse unormale XY-embryoner. Der er endnu ikke sket nogen overførsel af en brugbar blasotocyst afledt af en 0PN.
Tabel 1: Ploidystatus for brugbare 0PN-blastocyster
| Embryo | Trophectoderm Diagnose |
| 1 | |
| 1 | Kompleks +5, +8, +16; XY |
| 2 | Abnormalt; XO |
| 3 | Kompleks -2, -3, +6, -8, -12; XY |
| 4 | Kompleks +3, -5, +19, -15, -16, -17, -18. -19, +20, +21; XO |
| 5 | Abnormalt; XO |
| 6 | Normal XX |
| 7 | Normal XX |
| 8 | Normal XY |
| 9 | Normal XY |
| 10-24 | Ukendt |
Konklusion: Vores resultater viser, at brugbare blastocyster, der stammer fra zygoter med unormal pronuklear (0PN) dannelse, kan udvikle sig til et kromosomalt normalt embryo. Disse embryoner kan imidlertid også have en høj sandsynlighed for flere kromosomale gevinster eller tab. Disse resultater svarer til tidligere rapporter om udviklingspotentiale, kromosomanalyse og igangværende graviditeter fra zygoter med unormale pronuklerier1-3. Patienterne bør rådgives om de kromosomale abnormiteter, der er forbundet med uprøvede anvendelige blastocyster, der stammer fra atypiske zygoter, og som ikke er testet. Yderligere undersøgelse af ploidystatus af anvendelige blastocyster, der stammer fra unormale zygotiske embryoner med en enkelt pronukleus (1PN), tre pronukler (3PN) eller højere (≥4PN), kan give yderligere oplysninger om bevaringsværdien af unormale pronukleare zygoter.