EGFP y GFP: ¿en qué se diferencian? (Sep/02/2006 )

hi
¿qué diferencia hay entre la EGFP y la GFP?
¿y el anticuerpo de la GFP reconoce también la EGFP? si ambos requieren un anticuerpo diferente puede decirme sus nombres
gracias

-mili-
QUOTE (mili @ Sep 2 2006, 10:34 AM)
hi
¿qué diferencia hay entre EGFP y GFP?
¿y el anticuerpo contra la GFP reconoce también la EGFP? si ambas requieren anticuerpos diferentes puedes decirme sus nombres
gracias

La EGFP (Enhanced GFP) y la GFP se diferencian por unos pocos aminoácidos que hacen que la EGFP sea más fluorescente que la GFP. Un anticuerpo anti-GFP puede reconocer también la EGFP. Yo uso un anti-GFP de Abcam para reconocer la EGFP.

-dnafactory-

EGFP es un mutante de GFP. Ha aumentado la fluorescencia y el pico de excitación principal de la proteína se ha desplazado a 490 nm con el pico de emisión mantenido a 509 nm (EGFP).
Usted debe ser capaz de detectar EGFP con el anticuerpo anti-GFP.

-scolix-

EGFP también se cree que es un poco menos tóxico para las células que expresan. Todos los anticuerpos de GFP con los que he trabajado identifican la EGFP tan bien como la GFP nativa. El de clontech es genial!

-rkay447-

¿Es posible cambiar la EGFP en RFP o YFP por simple mutagénesis?

-Calvin*-

el anti-GFP policlonal de Cell signaling funciona bien, no hay diferencia para la GFP original, la EGFP o la mGFP;
la CFP y la YFP son mutaciones de la GFP, creo que la clonación con los vectores correspondientes parece ser más sencilla que mutar la GFP; ¿la RFP? – nunca he oído hablar de ello, DSred (Clontech) funciona bien

El Oso-

Preferiría trabajar con los respectivos vectores de protienos fluorescentes que mutarlos. Es mucho más fácil. En lugar de YFP, trabajaría con venus ( una versión modificada de YFP) y para RFP, trabajaría con DsRed2 o mCherry o mStrawberry (laboratorio de Tsien)- dependiendo de los experimentos.

-scolix-

dsRed y las otras proteínas fluorescentes rojas son bastante distintas de las GFP, por lo que los anticuerpos contra GFP no funcionarán con ellas. Las variantes CFP, YFP y eGFP son todas pequeñas modificaciones de la GFP y serán detectadas por los anticuerpos de la GFP.

-phage434-

He oído que son diferentes debido a una mutación puntual. De fenilalanina a leucina si no recuerdo mal.

-nmstew-

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