1.2.2.6 Flavonoidit
Styphnolobium japonicumista (Leguminosae) määritettiin samanaikaisesti LC-ESI-MS/MS:llä kuusi tärkeintä flavonoidia, mukaan lukien sophorikosidi, genistiini, genisteiini, rutiini, kversetiini ja kaempferoli (Chang et al., 2013). Kuuden aktiivisen yhdisteen sisällön kvantitatiivinen ero oli hyödyllinen monien eri lähteistä peräisin olevien näytteiden kemotaksonomiassa ja monien samankaltaisten näytteiden standardoinnissa ja erottelussa. Kahdentoista flavonoidiyhdisteen avulla voitiin erottaa toisistaan 34 tyrnimarjanäytettä (Chen et al., 2007). Hippophae rhamnoides ssp. sinensis (Elaeagnaceae) ja H. rhamnoindes ssp. yunnanensis eivät eronneet selvästi toisistaan, mikä viittasi siihen, että näillä kahdella alalajilla saattaa olla kemotaksonomian kannalta hyvin läheinen suhde. Flavonoidiglykosideja käytettiin Unani-yrttilääkkeen kamomillan (Matricaria chamomilla) aitouden todentamiseen sen väärennöksistä eli Anthemis nobilis, Matricaria aurea ja Inula vestita (Ahmad et al., 2009).
Farmakologisesti aktiivisia isoflavoniaglykoneja genisteiiniä, daidzeiinia, formononetiiniä ja biokaniini A:ta käytettiin 13 Trifolium (apila; Leguminosae) -lajin luokitteluun, jotka ovat kotoisin Puolasta (Zgórka, 2009). Naftodiantronit (esim. hyperisiini ja pseudohyperisiini), flavonoliglykosidit (esim. isoquercitrin ja hyperosidi), biflavonoidit (esim. amentoflavoni), floroglukinolijohdannaiset (esim. hyperforiini ja adhyperforiini) ja ksantonit voivat toimia kemotaksonomisina merkkiaineina eri taksonomisilla tasoilla (esim, perheestä lajiin) (Crockett ja Robson, 2011), mikä osoittaa, että tietyt biosynteettiset reitit ovat säilyneet taksonissa tai vaihtoehtoisesti syntyneet kaksi tai useampia kertoja taksonin sisällä evolutiivisen konvergenssin kautta. Flavonoidit ovat käyttökelpoisia kemotaksonomisia merkkiaineita Iris-suvussa (Iridaceae; Wang et al., 2010).
7-metoksyloituja flavonoideja on kemotaksonominen piirre, jota esiintyy usein Anacardiaceae-suvussa (Feuereisen et al., 2014).
Tyrni (Hippophae rhamnoides) sisältää runsaasti monia bioaktiivisia yhdisteitä (esim. vitamiineja, fenoleja ja karotenoideja), jotka ovat tärkeitä ihmisen terveydelle ja ravitsemukselle. Fenolisteista marjat ja lehdet sisältävät runsaasti flavonoleja, jotka ovat laadukkaita ja aitoja biomarkkereita. Kuuden viljellyn tyrnilajikkeen (Hippophae rhamnoides ssp. carpatica) marjat ja lehdet analysoitiin UHPLC-PDA-ESI-MS:llä (Pop et al., 2013). Marjat ja lehdet sisälsivät pääasiassa isorhamnetiini-(I)glykosideja eri suhteissa. I-3-neohesperidosidi, I-3-glukosidi, I-3-ramnosyyliglukosidi, I-3-sophorosidi-7-rhamnosidi ja vapaa isorhamnetiini olivat vallitsevia marjoissa (17 tunnistetusta yhdisteestä), I-3-ramnosyyliglukosidi, I-3-neohesperidosidi, I-3-glukosidi, kversetiini-3-pentosidi, kaempferoli-3-rutinosidi ja kversetiini-3-glukosidi olivat vallitsevia lehdissä (19:stä tunnistetusta yhdisteestä). Marjat sisälsivät keskimäärin 917 mg/100 g DW flavonoliglykosideja. Lehtien flavonoliglykosidipitoisuus oli suurempi kuin marjojen, keskimäärin 1118 mg/100 g DW. PCA:n avulla analysoidun kvantitatiivisen tietokokonaisuuden vaihtelu selitti 91 prosenttia kokonaisvarianssista marjojen osalta ja 73 prosenttia lehtien osalta, mikä osoittaa näytteiden hyvän erottelukyvyn. Flavonolijohdannaiset voivat olla biomarkkereita, joiden avulla voidaan erottaa lajikkeet toisistaan ja tunnistaa erityisesti marjojen ja lehtien koostumus.
Dasymaschalon ja Desmos ovat kaksi itsenäistä Annonaceae-suvun sukua, mitä tukevat karkeamorfologia, lehtien anatomia ja molekyylifylogenia. Nämä suvut sisältävät formyylisubstituoituja flavonoideja, joilla on substituoitu A-rengas ja substituoimaton B-rengas, jotka voivat olla kemotaksonomisia merkkiaineita (Zhou et al…,
Flavonoidiglykokonjugaatit kahdeksan pohjoisamerikkalaisen lupiinilajin (Lupinus elegans, L. exaltatus, L. hintonii, L. mexicanus, L. montanus, L. rotundiflorus, L. stipulatus ja Lupinus sp.), kolme Välimeren alueen lajia (L. albus, L. angustifolius ja L. luteus) ja yksi Etelä-Amerikasta peräisin oleva, Euroopassa kotieläiminä pidetty laji (L. mutabilis) analysoitiin kahdella LC-MS-järjestelmällä (Wojakowska et al., 2013). CID/MSn-kokeita käyttävän LC-MS-profiloinnin tuloksena 12 lupiinilajista löydettyjen 175 flavonoidiglykokonjugaatin rakenteet tunnistettiin kolmella luotettavuustasolla Metabolomics Standards Initiative -aloitteen mukaisesti, pääasiassa tasoilla 2 ja 3. Kasviuutteista tunnistettujen flavonoidijohdannaisten joukossa oli isomeerisiä tai isobaarisia yhdisteitä, jotka erosivat toisistaan aglykonien hydroksylaatioasteen ja glykosidi-, asyyli- tai alkyyliryhmien esiintymisen suhteen molekyyleissä. Glykokonjugaattimolekyylien alkuainekoostumus määritettiin protonoitujen/deprotonoitujen molekyylien tarkoista m/z-arvoista (+/-), jotka mitattiin yli 5 ppm:n tarkkuudella. Aglykonien rakenteista, sokeriryhmien tyypistä (heksoosi, deoksiheksoosi tai pentoosi) ja joissakin tapauksissa niiden sijoittumisesta aglykoniin sekä flavonoidiglykokonjugaattien asyylisubstituenteista saatiin tietoa. Flavonoidikonjugaattien profiloinnista saatuja tietoja käytettiin tutkittujen lupiinilajien kemotaksonomiseen vertailuun. Välimeren ja Pohjois-Amerikan lupiinien välille saatiin selkeä erottelu.
On tarpeen määrittää flavonoidien HPLC-sormenjälki kuudesta usein käytetystä kiinalaisesta materia medica -aineesta, joita käytetään Qi-virtauksen säätelyyn, mukaan lukien Citri grandis (Mao Ju Hong), C. grands (Guang Ju Hong), Citri Reticulatae Pericarpium (Chen Pi), Citri Reticulatae Pericarpium Viride (Qing Pi), Aurantii Fructus (Zhi Ke) ja Aurantii Fructus Immaturus (Zhi Shi) Citrusista (Chen ja Lin, 2011). HPLC suoritettiin C18-kolonnissa metanoli-vesi (etikkahappoa sisältävällä) kolonnilla. Kuusi kasviperäistä lääkettä jaettiin naringiinityyppiin ja hesperidiinityyppiin. C. grandisilla ja C. grandsilla oli viisitoista yhteistä piikkiä; Citri Reticulatae Pericarpiumilla, Citri Reticulatae Pericarpium Viridellä, Aurantii Fructuksella ja Aurantii Fructus Immaturuksella oli kymmenen yhteistä piikkiä. Kaikilla yrteillä oli viisi yhteistä huippua. C. grandisin ja C. grandsin kromatogrammien holistinen samankaltaisuus oli välillä 0,928-0,996. Citri Reticulatae Pericarpiumin, Citri Reticulatae Pericarpium Viriden ja Aurantii Fructus Immaturuksen osalta se oli välillä 0,922-0,997. Aurantii Fructuksen ja keskinäisen mallin välinen samankaltaisuus oli kuitenkin vain 0,454-0,773. Flavonoidien vakiintuneita sormenjälkiä voidaan käyttää erojen vertailemiseen intuitiivisesti. Tyypillisten piikkien korkeus ja piikkien pinta-alat ovat erilaiset, mutta se, liittyykö se kuuden lääketieteellisen materiaalin erilaiseen Qi-virtausta säätelevään tehtävään, odottaa lisätutkimusta.
129 lehtinäytettä 35 lajista ja yhdestä lajikkeesta kiinalaisesta Epimediumista (Berberidaceae), joista suurin osa oli sijoitettu subgen. Epimedium ja sektioon Epimedium. Diphyllon, analysoitiin HPLC-menetelmällä (Guo et al., 2008a). Kaikkien näytteiden HPLC-profiilit icariinille ja vastaaville yhdisteille saavutettiin, lajiteltiin ja analysoitiin. Toisen piikkiryhmän (“ABCI”-piikkiryhmän) merkkien mukaan kromatogrammit jaettiin neljään päätyyppiin ja yhdeksään alatyyppiin. Kukkien morfologian kanssa tehdyn korrelaatioanalyysin perusteella II-3 oli alkeellisin tyyppi; II-1, IV ja I-3 olivat alkeellisia ja läheistä sukua II-3:lle; I-1 oli perustyyppi; ja I-2, I-4, III ja II-2 olivat johdettuja tyyppejä. HPLC-kromatogrammityyppijako vastaa W. T. Stearnin luokittelua, joka koskee sektiota. Diphyllon neljään sarjaan vuonna 2002.