Clostridium botulinum – Botulismi (kliiniset muodot). Testit botulismin diagnosoimiseksi. Toksiinin osoittaminen potilaista, elintarvikkeista, rehusta, lietteestä tai vesisedimenteistä; vesilinnuista, muista näytteistä. Suositellut testit: toksiinin osoittaminen, C. botulinum -viljelmä, tyypitetty botulinumtoksiini; molekyylidiagnoosi (PCR).

Clostridium botulinumin ja botulinumtoksiinin/-toksiinien ominaispiirteet

Clostridium botulinum on tiukasti anaerobinen grampositiivinen bakteeri, suku Clostridium, suku Clostridiaceae, itiöemät, joka tuottaa neurotoksista toksiinia. Tätä bakteeria esiintyy yleensä maaperässä ja käsittelemättömässä makeassa vedessä ja sedimentissä (meret, järvet), ja se on levinnyt maailmanlaajuisesti. Joissakin olosuhteissa tämä organismi voi saastuttaa elintarvikkeita ja kasvaa niissä tuottaakseen toksiiniaan tai toksiinejaan. Botulismi on vakava ruokamyrkytyksen muoto, joka johtuu toksiinia sisältävän ruoan nauttimisesta. Vaikka tämä tauti on harvinainen, niiden kuolleisuus on korkea. Kun Yhdysvalloissa vuosina 1899-1990 havaituista 1036 tapauksesta määritettiin toksiinityyppi, 384 johtui A-toksiinista, 106 B-toksiinista, 105 E-toksiinista ja 3 F-toksiinista. Joskus voi esiintyä tapauksia, jotka johtuvat kahdesta toksiinista, esimerkiksi A:sta ja B:stä.

Kaikki ihmisten tai eläinten botulismin muodot johtuvat Clostridium botulinum -bakteerin lisääntyessä muodostuvan botuliinitoksiinin imeytymisestä. Toksiinin myrkyllisyys (neurotoksisuus) on erittäin korkea, joten se vaikuttaa erittäin alhaisissa pitoisuuksissa, se on lämpökestävä, kun taas bakteerin itiöt ovat kuumuutta kestäviä ja säilyvät hengissä yli 100ºC:een kuumennetuissa elintarvikkeissa, kuten lämpökäsitellyissä säilykkeissä. Lisäksi jotkin C. botulinum-, C. butyricum-, C. baratii- ja C. argentinense -kannat voivat tuottaa botuliinin neurotoksiineja.

On olemassa seitsemän toksiinityyppiä (A-G), jotka voidaan erottaa toisistaan neutralisaatiotestien avulla ja jotka ovat käyttökelpoisia kliinisessä ja epidemiologiassa. Tyypit A, B, E ja F ovat ihmisten botulismin pääasiallisia aiheuttajia, kun taas tyyppejä C ja D esiintyy eläinten botulismitapauksissa, joihin sairastuvat eniten luonnonvaraiset linnut ja siipikarja, nautaeläimet, hevoset ja eräät kalalajit. Tyypit A ja B ovat yleisimpiä ihmisillä, ja ne liittyvät pääasiassa kotona valmistettujen vihannessäilykkeiden saastumiseen, mutta Euroopassa näitä tyyppejä on havaittu myös lihatuotteiden yhteydessä. E-tyyppiä (kalat) esiintyy vesiympäristöissä, ja se korreloi saastuneeseen kalaan tai äyriäisiin liittyvien E-botulismitapausten kanssa, ja se on lisääntymässä. F-tyyppi on poikkeuksellinen. C-tyyppi jaetaan C1-tyyppiin (neurotoksiini) ja C2-tyyppiin (ei neurotoksiini, vaikuttaa verisuonten läpäisevyyteen ja on enterotoksinen). G-tyyppiä tuottaa C. argentiniense (eristetty maasta Argentiinassa, kuolleiden potilaiden seerumista, vaikka osallisuus on epäselvä).

Toksiinit syntetisoituvat bakteerin kasvun aikana inaktiivisena proteiinina (150 kDa), joka vapautuu bakteerista lyysin aikana. Aktivoituakseen muodostuvan toksiinin tulisi hajota kahdeksi polypeptidiketjuksi (50 ja 100 kDa).

C. botulinum, voidaan erottaa ryhmiin niiden viljelyominaisuuksien, biokemiallisten ja fysiologisten ominaisuuksien mukaan. Kaikki A-tyypin viljelmät ja osa B- ja F-tyypin viljelmistä ovat proteolyyttisiä. C. botulinum -viljelmät, jotka tuottavat C- ja D-toksiineja, eivät ole proteolyyttisiä, kun niitä viljellään väliaineessa, jossa on hyytynyttä munanvalkuaista tai lihaa. Kaikki tyypit E ja jotkin tyypin B ja F kannoista ovat ei-proteolyyttisiä, mutta niillä on hiilihydraattiaineenvaihdunnan piirteitä, jotka eroavat ei-proteolyyttisistä ryhmistä, jotka ovat tyyppejä C ja D. Tyypin G kantoja ei ole Tutkittu riittävän yksityiskohtaisesti, jotta niitä voitaisiin tehokkaasti ja tyydyttävästi luonnehtia.

Optimaalinen lämpötila kasvulle ja toksiinin tuotannolle on proteolyyttisten kantojen kohdalla noin 35ºC; ei-proteolyyttisten kantojen kohdalla 26-28ºC. Ei-proteolyyttiset B-, E- ja F-kannat voivat tuottaa toksiinia jäähdytyslämpötiloissa (3-4ºC). Muiden kuin proteolyyttisten kantojen toksiinit saavat suurimman myrkyllisyytensä vasta, kun toksiini aktivoidaan trypsiinillä. Proteolyyttisten kantojen toksiinit syntyvät yleensä aktivoituneessa muodossaan.

Botulismin kliiniset muodot

Ihmisen botulismin kliinisiä muotoja on neljä:

• Ruokamyrkytys (elintarvikevälitteinen botulismi), joka johtuu Clostridium botulinum -botulinumin saastuttaman ruoan nauttimisesta, jossa toksiinia muodostuu.

• Haavabotulismi, syntyy Clostridium botulinum -bakteerin aiheuttamasta haavainfektiosta ja toksiinin kehittymisestä in vivo bakteerien kasvettua haavassa.

• Vauvabotulismi, syntyy toksiinin muodostumisesta Clostridium botulinum -bakteerin kolonisoimien pienten lasten ruuansulatuskanavassa (tavallisimmin saastuneen hunajan tai maissisiirapin nauttiminen), minkä jälkeen toksiini imeytyy. Näillä potilailla voi olla vasta-aineita toksiinia vastaan.

• Aikuisten suolistobotulismi, joka aiheutuu Clostridium botulinum -botulinumin aiheuttamasta ruoansulatuskanavan kolonisaatiosta iäkkäillä, jota seuraa toksiinin imeytyminen. Näillä potilailla voi olla vasta-aineita toksiinia vastaan.

Missä tahansa ihmisen botulismin kliinisissä muodoissa ja yhtä lailla eläinten botulismissa toksiini tunkeutuu vereen ruoansulatuskanavasta, kun sitä nautitaan valmiiksi ruoan mukana, tai kun sitä tuottaa bakteeri, joka kolonisoi ruoansulatuskanavan (pikkulapset tai aikuiset), tai poikkeustapauksissa lapset bakteerin infektoimasta haavasta. Jotkin elintarvikkeet sisältävät botuliinitoksiinia todennäköisemmin kuin toiset. Elintarvikkeiden, joiden pH on alle 4,5, on vaikeampi olla botulismin aiheuttajia, koska tässä pH:ssa C. botulinum ei pysty lisääntymään eikä tuottamaan toksiinia (näin on esimerkiksi hedelmämehujen ja etikkamarinoitujen elintarvikkeiden kohdalla). Sitä vastoin elintarvikkeet, joiden pH on yhtä suuri tai suurempi kuin 4,5, voivat aiheuttaa botulismia, koska niissä b. c. voi lisääntyä ja tuottaa toksiinia (tämä koskee lihaa, kalaa, vihanneksia, valmisruokia jne.), kaikissa näissä elintarvikkeissa hapeton altistuminen, kuten säilykkeissä tai tyhjiöpakatuissa elintarvikkeissa, ja joiden pH on suurempi kuin 4,6. Tämä tarkoittaa, että b. c. voi aiheuttaa botulismia. Esimerkkejä vaarallisista elintarvikkeista ovat: savustettu kinkku, savustettu kala- tai vihannessäilykkeet (joiden lämpökäsittely ei riitä tappamaan itiöitä) jne. C. botulinumilla saastuneet tölkit ovat yleensä kaarevia, vaikka näin ei tapahdu tyypin E kohdalla.

Aineeseen imeytyvä toksiini sitoutuu palautumattomasti liikehermosolujen hermo-lihasliitoksiin estäen asetyylikoliinin vapautumisen ja aiheuttaen velttohalvauksen tai lihasheikkoutta.

Kliinisesti tyypillistä on akuutti veltostunut halvaus, joka alkaa yleensä molemminpuolisella kallohermojen osallistumisella vaikuttaen kasvojen, pään ja nielun lihaksiin ja laskeutuu sitten symmetrisesti vaikuttamaan rintalihaksiin ja raajoihin. Kuolema johtuu hengitysvajauksesta, joka johtuu kielen ja nielun lihasten halvaantumisesta, jolloin ylähengitystiet tukkeutuvat, tai pallean ja välikarsinan lihasten halvaantumisesta. Tästä syystä potilaiden on saatava botuliinitoksiinia ja hengitysteiden tehohoitoa tarvitaan.

Botulismin diagnostiset testit

Botuliinitoksiinin osoittaminen näytteistä tai elintarvikkeista ilman viljelyä (ks. suositeltava näyte kohdassa “IVAMIn tarjoama testi ja tarvittavat näytteet”).

Tätä suositellaan potilaalle, jolla on kliinistä näyttöä botulismista.

Botuliinitoksiinin osoittaminen voidaan suorittaa nesteestä, kuten verestä saadusta seerumista. Se voidaan havaita myös sellaisten syötyjen elintarvikkeiden jäännöksistä, jotka ovat aiheuttaneet botulismitapauksen tai -epidemian. Jotta testi voidaan tehdä ruoan jäänteistä, niistä on saatava uuttosuodos. Imeväisbotulismi- tai suolistobotulismitapauksissa voidaan havaita toksiinin esiintyminen lasten tai potilaiden ulosteissa, mutta pidetään suositeltavampana suorittaa alustava ulosteviljely (ks. jäljempänä ). Botulismitoksiinin havaitseminen missä tahansa näistä tapauksista tehdään rokottamalla mikroskooppeihin, jotka saavat halvausoireita, joita seuraa kuolema, jos niihin rokotetaan botuliinitoksiinia. Sen vahvistamiseksi, että hiiret ovat kuolleet rokotetun botuliinitoksiinin vuoksi, tarvitaan neutralointitesti, jolla vahvistetaan, että botuliinitoksiinia oli läsnä, ja tunnistetaan läsnä olevan botuliinitoksiinin tyyppi. Tämä neutralointitesti suoritetaan siten, että rokotettu tuote (ihmisen tai eläimen seerumi, nautitusta ruoasta saatu uute, …) kohdistetaan kunkin toksiinityypin spesifisiin antiseerumeihin.

Ennen neutralointitestivaihetta on tarpeen laskea tappava vähimmäisannos (MLD). Näin laskemme suurimman (korkeimman) laimennoksen, joka aiheuttaa tartunnan saaneiden eläinten kuoleman, ja inokuloitu tilavuus on aiheuttanut eläinten kuoleman sisältävät tappavan vähimmäisannoksen (LMD).

Toksiinityypin tunnistamiseksi, kun tiedetään “Minimaalinen letaalinen annos”, tämä kohdataan erilaisilla botulinumtyypin toksiinin vasta-aineilla. Nämä seokset inokuloidaan yhtä suurina määrinä koehiiriin ja ne, jotka selviytyvät, on inokuloitu seoksella, joka koostuu “pienimmästä tappavasta annoksesta” sekä antiseerumista tyyppiä vastaan, joka on pystynyt neutraloimaan.

Toksiinin osoittaminen näytteistä/tuotteista esiviljelyn jälkeen (katso Suositeltu näyte sen jälkeen IVAMIn tarjoamassa testissä ja vaaditut näytteet).

Kun näytteestä löytyy Clostridium botulinum -bakteeria, joka tuottaa toksiinia, suositellaan esiviljelyä edeltävää viljelyä, jotta toksiini voidaan tutkia näytteen viljelyn jälkeen. Tällaisia ovat imeväisbotulismia tai suolistobotulismia sairastavan potilaan ulosteet, sellaisen syödyn ruoan jäänteet, jossa bakteerit olivat lisääntyneet (esim. säilykepurkki), epäilty elintarvike, joka saattaa sisältää bakteereita (esim. pullistunut säilykepurkki), elintarvike, joka on tarkastettu tämän bakteerin esiintymisen poissulkemiseksi (esim, makkarat, kinkut, säilyketölkit), tai muut näytteet, kuten makean veden lietteet tai meriveden sedimentit jne. alueilta, joilla on havaittu vesilintujen kuolleisuutta.

Viljelyssä laboratoriossa, sopivissa elatusaineissa, toksiini tuotetaan, jos bakteeri on olemassa, ja viljelmäfiltraatin saaminen voi olla hyödyllistä sen esiintymisen tutkimiseksi, kun filtraattia inokuloidaan hiiriin. Jos rokotetut hiiret sairastuvat, osoittaa Clostridium botulinum -botulinumin todennäköistä esiintymistä näytteessä tai kasvua viljelyssä. Hiiret ovat kuitenkin saattaneet kuolla muusta syystä, joten ennen raportin antamista on tarkistettava, että ne ovat todella kuolleet siihen, että ne on rokotettu botulinumtoksiinilla.

Botulinumtoksiinin esiintymisen vahvistamiseksi viljelyssä voidaan tehdä neutralisaatiotestejä käyttämällä kullekin botulinumtoksiinityypille spesifisiä antiseerumeita (neutralisaatiotesti) tai Clostridium botulinum -geenien ja sen tyypin havaitseminen viljelmän elatusaineen seassa (molekulaarinen osoittaminen PCR:llä).

Neutralointitesti suoritetaan siten, että inokuloitu näyte (viljelyfiltraatti) kohdataan kullekin toksiinityypille spesifisiin antiseerumeihin.

Ennen neutralointitestivaihetta on tarpeen laskea pienin tappava annos (MLD). Näin lasketaan (suurin) enimmäislaimennus, joka aiheuttaa inokuloitujen eläinten kuoleman, ja inokuloitu tilavuus on aiheuttanut eläinten kuoleman sisältää pienimmän tappavan annoksen.

Toksiinityypin tunnistamiseksi, kun “pienin tappava annos” on saatu selville, suoritetaan vastakkainasettelu pienimmän tappavan annoksen ja erityyppisten anti-botuliiniseerumien välillä. Nämä seokset inokuloidaan yhtä suurina määrinä koehiiriin, ja ne, jotka selviytyvät hengissä, on inokuloitu seoksella, joka koostuu “pienimmästä tappavasta annoksesta” ja sen tyypin antiseerumista, joka on kyennyt neutraloimaan.

Molekyylitunnistuksella PCR:llä vältetään aika, joka tarvitaan pienimmän tappavan annoksen (MLD, minimum lethal dose) ja neutralisaatiotestin laskemiseen.

Botuliinitoksiinin vasta-aineiden osoittaminen (ks. suositeltu näyte sen jälkeen kohdassa IVAMIn tarjoama testi ja vaadittavat näytteet)

• Potilaat, joita hoidetaan laimennetulla botuliinitoksiinilla, kuten ne, jotka saavat botoxia esteettisiä tai lääketieteellisiä hoitoja varten (esim. gr. kasvojen kolmoishermoneuralgiasta johtuva kipu), sen vaikutusta estävien vasta-aineiden esiintymisen toteamiseksi.

• Potilaat, joilla epäillään imeväisikäisen botulismia tai aikuisen botulismia ja joiden ulosteesta tai seerumista ei ole pystytty löytämään Clostridium botulinum toxin -bakteeria.

• Rokotetut henkilöt, jotka ovat kiinnostuneita tarkistamaan suojan tilan.

Clostridium botulinum -toksiinia on käytetty hyvin suurina laimennoksina paikallisesti annosteltuna spastisten prosessien hoitoon. Nämä prosessit ovat osoittautuneet hyödylliseksi lääkkeeksi. Nämä prosessit ovat yleensä kroonisia spastisia, mikä edellyttää, että toksiinia annetaan pysyvästi. Siksi hoidon aikana voi syntyä resistenssiä, joka johtuu potilaan asteittaisesta immunisoitumisesta koko hoidon ajan, jolloin vaikutus olisi rajallinen. Tämän immunisaation havaitsemiseksi on mitattava tarkasti ja herkästi botuliinitoksiini A:n ja/tai B:n vasta-aineiden olemassaolo.

Hyväksytty vertailumenetelmä botuliinitoksiinin vasta-aineiden havaitsemiseksi ja kvantifioimiseksi on hiirillä tehtävä neutralointitesti (Mouse Neutralization Assay), jossa botuliinitoksiinin laimennos, joka on kvantifioitu hiiren tappavalla 50 %:n annoksella (DL50), sekoitetaan seerumin/plasman erilaisiin emäksisiin 2- tai emäksisiin 4-laimennoksiin, ja inkuboinnin jälkeen kutakin niistä inokuloidaan vatsan sisäisesti koeryhmiin hiiriä. Suurin testiseerumin laimennos, joka vähentää toksisuutta, vastaa vasta-ainetitteriä vastaavaa botuliinitoksiinia vastaan. Tätä laimennosta verrataan kansainväliseen standardiin, jolloin tulokset saadaan kansainvälisinä yksikköinä (IU/ml) (1 IU määritellään vasta-aineen määräksi, joka neutraloi 10 000 LD50 A tai B-toksiinin tai 1000 LD50 E-tyypin toksiinin). Testeissä käytetty toksiinimäärä on sellainen, jonka neutraloi 0,02; 0,005 ja 0,0125 IU/ml vasta-ainetta tyypin A, B ja E osalta (Hatheway ym. 1984). Seerumit, jotka suojaavat hiiriä titteri 1: 4 ilmoitetaan <0,08 IU/ml tyypille A tai <0,02 IU/ml tyypille B. Testi on työläs, kallis ja pitkäaikainen suorittaminen, joten vaihtoehtoja on etsitty enmzimoinmunoanálisis-pohjaisilla menetelmillä (ELISA), joissa käytetään botuliinitoksiinilla päällystettyjä mikrolevyjä. ELISA:lla saadut arvot eivät kuitenkaan joskus täysin korreloi hiirillä suoritetun neutralisaatiotestin kanssa.

Ennen neutralisaatiotestivaihetta on tarpeen laskea toksiinin pienin tappava annos (DLM). Pienimmän tappavan annoksen laskeminen suoritetaan tekemällä viljelyfiltraatista 10 peruslaimennoksia, laimentamalla puolet fysiologisella keittosuolaliuoksella, jotta saadaan sama laimennos kuin potilaan seerumin tai plasman kanssa sekoitettu toksiini, ja inokuloimalla kukin laimennosseos laboratoriohiiriin. Näin lasketaan (suurin) enimmäislaimennos, joka aiheuttaa tartunnan saaneiden eläinten kuoleman. Inokuloitu määrä, joka on aiheuttanut eläinten kuoleman, sisältää pienimmän tappavan annoksen (MLD).

Kun pienin tappava annos on tiedossa, lasketaan pienin ei-tappava annos (dmnm), joka vastaa pienintä toksiinimäärää vakiomäärän antitoksiinin läsnä ollessa, joka ei tapa rokotettuja hiiriä. Tämä toksiinimäärä neutraloidaan vastaavilla yksiköillä anti-A-antitoksiinia tai anti-B-antitoksiinia. Pienintä ei-tappavaa annosta kutsutaan siksi, että se on toksiinin vähimmäismäärä, joka ei aiheuta hiirten kuolemaa antitoksiinin läsnä ollessa.

IVAMI:n tarjoamat testit ja vaadittavat näytteet:

• Botuliinitoksiinin osoittaminen ihmisiin kohdistuneissa tapauksissa tai elintarvikevälitteisen botulismin taudinpurkauksissa:

• • Potilaan seerumi (vähintään 5 mL), joka on saatu viimeisimmän kerran hiiriin inokulointia varten, ja sen perusteella suoritettava toksiinin tyypitys, jos hiiret ovat kärsineet.

• • Imeväisbotulismin tai suolistobotulismin tapauksissa botuliinitoksiini voidaan havaita lasten/potilaiden ulosteista, mutta suosittelemme suositeltavampaa suorittaa alustava ulosteen viljely.

• Toksiinin ja/tai Clostridium botulinum -botuliinin havaitseminen nautituista elintarvikkeista, joiden epäillään aiheuttavan botulismia, tai tarkastettavista elintarvikkeista

• • Näyte epäillystä tai tarkastettavasta elintarvikkeesta (suositellaan vähintään noin 100 grammaa), jotta voidaan valmistaa näyte, joka on tarkoitettu hiirien inokulaatioon ja esiasteen toksiinin esiintymisen havaitsemiseen elintarvikkeissa, sekä viljelyn suorittamiseksi suodoksen saamiseksi hiirien rokottamista varten ja sen määrittämiseksi, oliko näytteessä toksiinia tuottavia bakteereja; Jos sinulla on vain ruokajäämiä, on suositeltavaa lähettää koko käytettävissä oleva määrä.

• Clostridium botulinum -bakteerin osoittaminen imeväisten botulismin tai suolistobotulismin tapauksissa

• • Suoliston kolonisaatiosta johtuvien imeväisten botulismin tai suolistobotulismin tapausten ulosteet (10 g), viljelmän viljelyä ja toksiinin osoittamista varten viljelmän filtraatista hiiriä rokottamalla.

• Clostridium botulinum -botuliinin toteaminen haavabotulismitapauksissa

• • Haavan eksudaatti haavabotulismia epäiltäessä, viljelyä ja toksiinin toteamista varten viljelyfiltraatissa hiiren inokulaation avulla. Jos näyte kuljetetaan aerobisesti, Clostridium botulinum on saattanut inaktivoitua, olisi helpompaa tehdä molekyylitesti Clostridium botulinum -geenien esiintymisen varalta ja jos se on positiivinen, tunnistaa botuliinitoksiinin tyyppi havaitsemalla kutakin toksiinityyppiä vastaavat geenit.

• Clostridium botulinum -botulinumin osoittaminen näytteistä, jotka on otettu makean veden lietteestä tai meriveden sedimenteistä ja muista tuotteista, jotka eivät sisälly edellisiin jaksoihin

• • Noin 100 g:n näytteet, joiden avulla voidaan suorittaa Clostridium botulinum -botulinum -bakteerin kasvuviljely ja saada viljelyfiltraatti, jota voidaan käyttää hiirten rokottamiseen.

• Botuliinitoksiinin vasta-aineiden osoittaminen seerumista tai plasmasta

• • Seerumista tai plasmasta (noin 10 ml) seerumin tai plasman neutralointivasta-aineiden testaamiseksi seerumissa tai plasmassa laboratoriossa saatavilla olevia eri toksiineja vastaan. Tämä testi on kiinnostava määritettäessä spesifisten vasta-aineiden esiintymistä botuliinitoksiinilla hoidetuilla henkilöillä, potilailla, joilla epäillään imeväisbotulismia, aikuisilla, joilla bakteeria ei ole pystytty löytämään ulosteesta, tai rokotetuilla henkilöillä suojan tilan tarkistamiseksi. Botuliinitoksiinilla hoidettujen henkilöiden kohdalla on ilmoitettava, minkä tyyppistä toksiinia potilaalle on annettu.

Aika tulosten ilmoittamiseen (TAT)

• Emme voi antaa tarkkoja aikoja. Jos testataan vain toksiinin havaitsemiseksi hiiri-inokulaatiolla ja tulos on negatiivinen, tulosraportti olisi enintään viikon kuluttua. Jos testaukseen sisältyy näytteen viljely ja sen jälkeen hiirten viljelmäsuodoksen inokulaatiolla tehdyn toksiinin toteaminen, aika olisi kaksi viikkoa. Jos jokin näistä testeistä hiiren inokulaatiolla, näytteestä otetulla uutteella tai viljelyfiltraatilla oli positiivinen, neutralisointitesti olisi suoritettava hiirillä sen vahvistamiseksi, että kyseessä on botulinumtoksiini, ja sen tyypin tunnistamiseksi neutralisointitesteillä, valmistumisaika on 15 päivää.

• Reaaliaikaiset PCR-testit raportti on 3 tai 4 päivän kuluessa.

Lomake, jossa on tuotteen ominaisuudet ja valittu testi/valitut testit

• Jos haetaan testien suorittamista tuotteella, on toimitettava kirje, jossa on tuotteen ominaisuudet ja valitut testit, jotka halutaan suorittaa lähetetyllä näytteellä.

Näytteen määrä

• Katsotaan kussakin tapauksessa IVAMI:n tarjoamien testien tyypin mukaan.

Näytteiden säilytysolosuhteet ja lähettäminen

• Näytteet lähetetään niissä olosuhteissa, joissa näyte tavallisesti on, suojattuna kuljetusta varten. Jos kyseessä ovat näytteet, jotka voivat hajota, koska se on saastunut bakteereilla tai omalla orgaanisella aineellaan (pilaantuvat tuotteet, eläinten tai ihmisten seerumit, ulosteet, liete, … …), näytteet on varastoitava ja lähetettävä jäädytettyinä tai ainakin olosuhteissa, jotka takaavat jäähdytyksen kuljetuksen aikana (näyteastia laatikossa -laajennettua polystyreeniä- (valkoinen korkki), jossa on kylmäpakkaukset jäädytettyinä. Huomautus: tämä organismi itsessään ei aiheuta biologisen altistumisen aiheuttamaa kontaminaatioriskiä.

Testauksen kustannukset

• Toksiinin osoittaminen ihmisissä esiintyvissä elintarvikkeista aiheutuvan botulismin tapauksissa/epidemioissa

• • hiirten rokottaminen potilaan seerumilla tai otteella nautitusta elintarvikkeesta ………………………………. ……………………………………………………………………………………………………………Konsultaatio [email protected]

• • Jos tulos on positiivinen, varmistustesti neutraloinnin ja toksiinityypin tunnistamiseksi …………….. …………………………………………………………………………………………………………..Konsultoidaan [email protected] .

• Toksiinin ja/tai Clostridium botulinum -botulinumin toteaminen nautituista elintarvikkeista, joiden epäillään aiheuttavan botulismia, tai valvonnanalaisista elintarvikkeista

Clostridium botulinum -botulinumin toteaminen imeväisbotulismitapauksissa tai suolistobotulismitapauksissa

Vaihtoehtoinen: Hiirten inokulaatiotesti seerumilla tai otteella nautitusta ruoasta ………………………………….. ……………………………………………………………………………………………………………Konsultoi [email protected]

• Suositellaan. Viljelytesti, jota seuraa hiirien inokulaatio viljelyfiltraatilla ………………………….. …………………………………………………………………………………………………………..Konsultoi [email protected]

.

• Jos tulos on positiivinen, varmistustesti neutralointia ja toksiinityypin tunnistamista varten …………………….. …………………………………………………………………………………………………………..Consult [email protected]

• Clostridium botulinum -botulinumin toteaminen haavabotulismin yhteydessä

• Viljelytesti, jonka jälkeen hiiret inokuloidaan viljelyfiltraatilla …………………….. Konsultoidaan [email protected]

• Jos tulos on positiivinen, varmistustesti neutralointia ja toksiinityypin tunnistamista varten …………….. ……………………………………………………………………………………………………………Konsultoidaan [email protected]

• Clostridium botulinum -bakteerin toteaminen lietteestä / makeasta vedestä tai merisedimenteistä otetuista näytteistä ja muista tuotteista, joita ei ole mainittu edellisissä jaksoissa

• • Viljelytesti ja sen jälkeen hiirien inokulointi viljelyfiltraatilla …………………….. Konsultoidaan [email protected]
  • Jos tulos on positiivinen, varmistustesti neutralointia ja toksiinityypin tunnistamista varten ………………. …………………………………………………………………………………………………………..Konsultoidaan [email protected]

• Botulinumtoksiinivasta-aineen osoittaminen seerumista tai plasmasta (viittaa vasta-ainetyyppiin, joten on ilmoitettava, minkä tyyppistä toksiinia henkilölle on annettu) ……………………………………………….. Consult [email protected]