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Description
Le Poly DYKDDDDK (FLAG) Peptide lyophilisé en poudre a été synthétisé par 23 résidus d’acides aminés avec un poids moléculaire de 2 864 Da. Le motif Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp est répété trois fois dans le peptide. Huit acides aminés à l’extrémité C-terminale constituent la séquence FLAG classique (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).
Propriétés
Blanc
Poudre
Poudre lyophilisée
95.33 % (le dernier lot) Peptide Poly FLAG poudre lyophilisée
(La concentration de travail recommandée est de 200-400 μg/mL pour éluer les protéines de fusion FLAG des billes Anti-DYKDDDDK (FLAG).
glace bleue
2-.8°C
Application
A utiliser pour l’élution compétitive des protéines de fusion DYKDDDDK (FLAG) de l’anticorps monoclonal ANTI-FLAG en solution ou lié à l’agarose sur les billes Anti-DYKDDDDK (FLAG).
Attention
1. Lisez attentivement le manuel d’utilisation avant la première utilisation;
2. Évitez la congélation, le séchage et la centrifugation à haute vitesse pendant l’utilisation et le stockage des billes;
3. Ce produit est destiné à un usage R&D uniquement, et non à un usage pharmaceutique, domestique ou autre. Veuillez consulter la fiche de données de sécurité pour des informations concernant les dangers et les pratiques de manipulation sûres.
Procédure
Elution peptidique de la protéine de fusion DYKDDDDK(FLAG) à partir de billes anti-DYKDDDDK(FLAG)
1. Suspendre soigneusement le gel d’affinité anti-Flag dans la fiole, pour une suspension uniforme de la résine. Transférer rapidement 10μl de la suspension de gel (environ 5μl du volume de gel emballé) dans un tube frais.
2. Ajouter 0,6 ml de TBS. Mettez soigneusement en suspension le gel d’affinité anti-flag en le pipettant. Centrifuger la résine à 5000 rpm pendant 30 secondeset retirer soigneusement le surnageant. Veillez à éliminer tout le tampon de lavage sans jeter la résine. Répétez l’opération 3 à 4 fois.
3. Ajoutez 500 μL d’extraits périplasmiques cellulaires à la résine lavée.
4. Agiter doucement les échantillons pendant 2 heures à 4°C.
5. Centrifuger la résine pendant 30 secondes à 5000 rpm. Transférer les surnageants dans un tube frais.
6. Laver la résine avec 0,5mL de TBS jusqu’à ce que la DO280 du surnageant lise<0,05.
7. Elution de la protéine de fusion DYKDDDDK (FLAG) par compétition avec le peptide Poly DYKDDDDK (FLAG). Eluer la protéine de fusion DYKDDDDK(FLAG) liée par élution compétitive avec cinq aliquotes de volume d’une colonne d’une solution contenant 200-400 ug/mL de peptide Poly DYKDDDDK(FLAG) dans du TBS.
9. Stockage des billes Anti-DYKDDDDK(FLAG)
Laver les billes Anti-DYKDDK(FLAG) trois fois avec 5 mL de glycérol à 50% avec 10mM de phosphate de sodium, 150 mM de chlorure de sodium, pH 7,4, contenant 0.02% (p/v) d’azide de sodium. puis ajouter encore 5 mL de glycérol à 50% avec 10 mM de phosphate de sodium, 150 mM de chlorure de sodium, pH 7,4, contenant 0,02% (p/v) d’azide de sodiumet conserver à -20°C sans vidange.
Stockage & stabilité
Conserver le produit à 2-8°C.
Téléchargement de fichier
Poly FLAG Peptide poudre lyophilisée
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