Presentado en: ASRM 2017 – San Antonio, Texas
Objetivo: Determinar la ocurrencia y el estado de ploidía de los embriones utilizables derivados de ovocitos que no muestran dos pronúcleos (0PN) en el momento de la evaluación de la fertilización.
Diseño: Estudio retrospectivo en un laboratorio privado de fecundación in vitro.
Materiales y métodos: Se identificaron un total de 3.370 blastocistos morfológicamente adecuados para la transferencia de embriones en fresco, la vitrificación o la biopsia de trofectodermo para el análisis genético del estado de ploidía seguido de la vitrificación (es decir, blastocistos utilizables). Los blastocistos utilizables se obtuvieron el día 5, 6 o 7. Los ovocitos maduros se fecundaron mediante ICSI y la evaluación de los pronúcleos se realizó y registró con un microscopio invertido entre 16 y 18 horas después de la inseminación. Los embriones con 2 pronúcleos se separaron de todos los demás embriones procedentes de cigotos 0PN, 1PN, 3PN y ≥4PN. Los embriones se cultivaron en grupo en un medio de cultivo único continuo (Irvine Scientific). Se evaluó el número de copias cromosómicas de los blastocistos adecuados con la plataforma Illumina MiSeq. Los embriones reportados como normales no tenían ninguna aberración detectable en el número de copias, con un umbral de ≤30%. Se definió un umbral de ≥50% para cualquier ganancia/pérdida de cromosoma completo para los cromosomas 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12, 17, 19 y/o 22. Se estableció un umbral de ≥30% para los cromosomas 6, 7, 8, 9, 11, 13, 14, 15, 16, 18, 20, 21, X, Y y cualquier duplicación y/o deleción segmentaria para cualquiera de los cromosomas. Un resultado de anormalidad compleja se definió como una combinación de tres o más anormalidades en el número de copias consistentes en trisomía y/o monosomía.
Resultados: A lo largo de 18 meses, 830 recuperaciones de ovocitos frescos dieron lugar a 7.258 cigotos con dos pronúcleos haploides (2PN). Estos cigotos 2PN se convirtieron en 3.349 blastocistos utilizables (46%). El 2,9% de las extracciones de ovocitos tenían blastocistos utilizables procedentes de ovocitos que no presentaban pronúcleos (0PN) en el momento de la evaluación de la fecundación. Se vitrificaron 24 blastocistos utilizables (procedentes de cigotos 0PN) de 24 pacientes diferentes. 14 (58%) de estos blastocistos no fueron analizados para confirmar el número de copias cromosómicas. 10 blastocistos derivados de cigotos 0PN fueron examinados mediante PGS. Cuatro embriones (44%) fueron declarados normales, mientras que dos embriones fueron declarados anormales XO y tres embriones anormales complejos XY. Todavía no se ha producido ninguna transferencia de un blastocisto utilizable derivado de un 0PN.
Tabla 1: Estado de ploidía de los blastocistos 0PN utilizables
| Embrión | Diagnóstico de trofectodermo |
| 1 | Complejo +5, +8, +16; XY |
| 2 | Anormal; XO |
| 3 | Complejo -2, -3, +6, -8, -12; XY |
| 4 | Complejo +3, -5, +19, -15, -16, -17, -18. -19, +20, +21; XO |
| 5 | Anormal; XO |
| 6 | Normal XX |
| 7 | Normal XX |
| 8 | Normal XY |
| 9 | Normal XY |
| 10-24 | Desconocido |
Conclusión: Nuestros resultados demuestran que los blastocistos utilizables derivados de cigotos con formación pronuclear anormal (0PN) pueden convertirse en un embrión cromosómicamente normal. Sin embargo, estos embriones también pueden tener una alta posibilidad de ganancias o pérdidas cromosómicas múltiples. Estos resultados son similares a informes anteriores sobre el potencial de desarrollo, el análisis cromosómico y los embarazos en curso de cigotos que contienen pronúcleos anormales1-3. Debe asesorarse a las pacientes sobre las anomalías cromosómicas asociadas a los blastocistos utilizables no analizados derivados de cigotos atípicos. La investigación adicional del estado de ploidía de los blastocistos utilizables derivados de embriones cigóticos anormales con un solo pronúcleo (1PN), tres pronúcleos (3PN) o superior (≥4PN) puede proporcionar más información sobre el valor de retención de los cigotos pronucleares anormales.