DNAクローンと組み換えDNA

DNAクローンについて少しお話ししましょう。これはDNAの断片の同一のコピーを作ることで、通常、気になるものをコードするDNAの断片が、何らかの形で役に立つと考えられるタンパク質として発現する遺伝子です。 動物や羊のような生物のクローンを作る場合、元の動物と全く同じ遺伝物質を持つ動物を作ることになりますが、クローンやDNAクローンについて話すときは、もう少し単純なことを話しているのです。このDNAのこの部分に、クローンを作りたい遺伝子があるとします。 この遺伝子をどうにかして切り出したいのです その方法は制限酵素を使うことです 制限酵素はたくさんあります 個人的には文明としてこれらの酵素を見つけ出し 識別できるところまで来たことが魅力的です DNAのどの部分を切断できるかがわかり 特定の配列を認識できます そしてどの制限酵素を使ってDNAの異なる部分を切り出せばよいかがわかるのです しかし、私たちは文明としてその地点に到達しました だから制限酵素を使うのです 1つの制限酵素を使うかもしれません ここに違う色を使ってみましょう それはここの右側に引っ掛かって、ここの遺伝子配列を識別します そして正しい場所で切断します それはここの制限酵素かもしれません そして、切断したい反対側の配列と識別する別の制限酵素を使うかもしれません では、これらのラベルを付けてみましょう 制限酵素制限酵素制限酵素制限酵素制限酵素制限酵素制限酵素制限酵素制限酵素制限酵素制限酵素制限酵素をかけると、その遺伝子だけになります。 染色体の外側にあるのですが、長い間複製することができたり、生物の遺伝子の仕組みと一緒に複製することができたり、染色体の中にある生物の遺伝子が自己表現するように、自己表現もできます。 円形のDNAなので、それをプラスミドに貼り付けます。そして、プラスミドに適合させるために、しばしば、ここにオーバーハングがあります。 GNAはテープでコピー&ペーストするように手で操作できるものではないからです。 そして、DNAリガーゼDNAリガーゼの束を入れて、この背骨をつなぎます。複製を勉強したときに、DNAリガーゼも見ました。大腸菌は特にそうです。そこで何ができるかというと、例えば、ここにたくさんの大腸菌があるとして、その中に溶液を入れ、その中にたくさんの大腸菌を入れるとします。coliの束があります。大腸菌がたくさん入っていて、目視ではわかりませんが、その中に大腸菌がいます。 典型的なショックは熱ショックで、シート状の熱ショックがどのように作用するかは完全には解明されていませんが、作用しています。 これは既存のDNAで、これは既存の遺伝物質で、ラベルを付けておきます。 というように、プラスミドを取り込みます。そこで、次にすることは、プラスミドを取り込んだバクテリアの入った溶液を置き、それをプレート上でバクテリアを増殖させようとします。 このプレートにはバクテリアが育つための栄養素があり、その栄養素を利用してバクテリアが育ちます。 しかし、ここで問題があります。先ほど、プラスミドを取り込むバクテリアと取り込まないバクテリアがいると言いましたが、そのため、このバクテリアが複製を続けていると、いつ、このようなものができるのか、このようなものができるのかがわからないのです。 しかし、このコロニーはプラスミドを取り込まなかった最初のバクテリアかバクテリアのセットで形成されている可能性があり、問題の実際の遺伝子を含まないので、そのコロニーは必要ありません。 そのプラスミドを実際に取り込むと、どうなるかというと、コピーを作りたい気になる遺伝子の他に、抗生物質耐性遺伝子をプラスミドに入れるのです。 このようなことができるのですが、プラスミドを取り込んだバクテリアだけがその抗生物質耐性を持つことになります。 しかし、これらは生き残ることができず、成長することさえできません。なぜなら、栄養素に抗生物質が混ざっているからです。 このプラスミドには、プラスミドを取り込んだバクテリアに抗生物質耐性を与える遺伝子も含まれています。このプラスミドをバクテリアの存在下に置くか、ある種の衝撃、例えば熱ショックを与えて、バクテリアの一部がそれを取り込むようにします。 そして、その細菌は繁殖を始め、繁殖する際にプラスミドも繁殖し、この抗生物質耐性を持っているので、この栄養抗生物質混合物の上で成長し、プラスミドを取り込まなかった他の細菌は成長することができませんので、ちょうどこのように、あなたはこれを取ることができます。 このコロニーをここに持ってきて、別の溶液に入れたり、育て続けると、そのバクテリアの中にその遺伝子の複数のコピーを持つことができるのです。 その遺伝子のコピーをどのように利用するかですが、例えば、その遺伝子が糖尿病患者用のインスリンを製造するためのものだとしますと、実際にその細菌の機械を使うことができます。 でも、もしこの遺伝子がインスリンだったら……。 細菌はインスリンを大量に生産します。インスリン分子の束は、何らかの形で利用できるかもしれません。インスリンをどうやって取り出すのか、どうやって利用するのか、詳しい説明はしませんが、言うまでもなく、この時点に至るまで、かなりクールです

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