să vorbim puțin despre clonarea ADN-ului, care se referă la realizarea de copii identice ale unei bucăți de ADN și, de obicei, este o bucată de ADN care codifică pentru ceva la care ținem este o genă care se va exprima ca o proteină pe care o considerăm utilă într-un anumit fel acum s-ar putea să fi auzit termenul de clonare în termeni de Războiul clonelor și Războiul Stelelor sau oaia Dolly și aceasta este o idee înrudită. dacă clonezi un animal sau un organism, cum ar fi o oaie, atunci creezi un animal care are exact materialul genetic al animalului original, dar când vorbim despre clonare și despre clonarea ADN-ului, vorbim despre ceva puțin mai simplu, mai simplu decât toate cele pe care le vom vedea, dar totuși este destul de fascinant, este vorba de copii identice ale unei bucăți de ADN, deci cum facem asta, să spunem că acesta este un fir de ADN, chiar aici, pe care îl desenez ca o linie, dar acesta este un fir dublu.nu vreau să mă deranjez să desenez mai multe fire, de fapt, permiteți-mi să desenez, permiteți-mi să încerc să desenez cele două fire, ca să ne amintim, așa că, iată, acesta este ADN-ul dublu și să spunem că această parte a ADN-ului are o genă pe care vrem să o clonăm, vrem să facem copii ale acesteia de aici, deci, de la genă la genă, de la genă la genă, primul lucru pe care vrem să-l facem este să facem o copie a acesteia. vrem să tăiem cumva această genă și modul în care facem asta este să folosim enzime de restricție și există o grămadă de enzime de restricție diferite și, personal, găsesc fascinant faptul că noi, ca civilizație, am ajuns în punctul în care putem găsi și identifica aceste enzime și știm în ce puncte ale ADN-ului pot tăia, ele recunosc secvențe specifice și apoi ne putem da seama ce enzimă de restricție ar trebui să folosim pentru a tăia diferite bucăți de ADN. dar am ajuns la acest punct ca civilizație, așa că folosim enzime de restricție, putem folosi o enzimă de restricție, dați-mi voie să folosesc o culoare diferită aici, care se fixează aici și identifică secvența genetică chiar aici și taie exact în locul potrivit, așa că poate fi o enzimă de restricție chiar acolo, iar apoi putem folosi o altă enzimă de restricție care se identifică cu secvența din cealaltă parte pe care vrem să o tăiem, așa că dați-mi voie să le etichetez. aceste chestii de acolo sunt enzime de restricție enzime de restricție și astfel, după ce aplicați enzimele de restricție, veți avea doar acea genă, s-ar putea să mai rămână puțin pe ambele părți, dar, în esență, ați tăiat gena, ați folosit enzimele de restricție pentru a tăia gena și apoi doriți să o lipiți în ceea ce vom numi plasmidă, iar o plasmidă este o bucată de material genetic. care se află în afara cromozomilor, dar care se poate reproduce mult timp sau care ar putea, cred că am putea spune că se poate replica împreună cu mașinăria organismului sau cu mașinăria genetică a organismului sau chiar se poate exprima pe sine, la fel cum se exprimă genele organismului care se află în cromozomi, așa că aici tăiem, dați-mi voie să scriu asta, tăiem gena și apoi vrem să o lipim, apoi vrem să o lipim într-o plasmidă, iar plasmidele tind să fie ADN circular, așa că o vom lipi într-o plasmidă, iar pentru ca ele să se potrivească, există adesea aceste supraînălțări aici, așa că s-ar putea să aveți o supraînălțare acolo, s-ar putea să aveți o supraînălțare acolo, așa că plasmidul pe care îl introducem ar putea avea perechi de baze complementare peste supraînălțări, ceea ce le va permite să reacționeze mai ușor una cu cealaltă dacă au aceste supraînălțări. și este uimitor, pentru că, evident, GNA nu este o chestie pe care să o putem manipula cu mâinile noastre, așa cum am copia și lipi lucruri cu bandă adezivă. Faceți aceste soluții și aplicați enzimele de restricție. Enzimele de restricție taie în masă aceste lucruri, ele se ciocnesc în modul potrivit pentru a provoca această reacție, apoi luați acele G și le puneți în plasmidele care au secvențele potrivite. la capetele lor, astfel încât acestea să se potrivească, iar apoi puneți și o grămadă de ADN ligază ADN ligază pentru a conecta osemintele de aici și am mai văzut o ADN ligază atunci când am studiat replicarea, așa că aceasta este ADN ligază, la care vă puteți gândi că ajută la lipirea, iar acum avem această plasmidă și vrem să o inserăm într-un organism care poate face copii pentru noi, iar un organism care este folosit de obicei este sau un tip de organism este bacteria și e-coli, în special, așa că ceea ce am putea face este să spunem că avem o grămadă de… să spunem că avem o fiolă chiar aici, o fiolă care conține o soluție cu o grămadă de e-coli.coli, o grămadă de e.coli și, de fapt, nu ați putea vedea vizual, dar există E. coli în acea soluție, iar apoi ați putea pune plasmidele, care ar fi și mai greu de văzut, în acea soluție și, cumva, am vrea ca E. coli, am vrea ca bacteriile să preia plasmidul, iar tehnica care se folosește de obicei este de a administra plasmidă. un fel de șoc în sistem care să facă bacteria să ia plasmidele, iar șocul tipic este un șoc termic și nu se înțelege pe deplin cum funcționează șocul termic, dar funcționează, așa că oamenii folosesc acest lucru de ceva timp, așa că dacă aveți o bacterie, aveți o bacterie chiar deasupra… aici, are ADN-ul său existent, așa că acesta este materialul său genetic existent, chiar acolo, și dați-mi voie să etichetez aceasta este bacteria, o puneți în prezența plasmidelor noastre, așa că o puneți în prezența plasmidelor noastre și aplicați șocul termic, iar o parte din această bacterie va primi plasmidul. va absorbi plasmidul și așa, pur și simplu, îl va absorbi, și ceea ce trebuie să faceți este să puneți soluția în care se află bacteriile, dintre care unele au absorbit plasmidul, să o puneți și apoi să încercați să creșteți bacteriile pe o placă, așa că lăsați-mă să desenez asta, așa că lăsați-mă să desenez aici. avem o farfurie pe care să creștem bacteriile noastre și are nutrienți pe care pot crește bacteriile, are nutrienți, are nutrienți, are nutrienți, așa că puteți spune: “Bine, o să punem asta aici și o grămadă de bacterii vor crește, așa că veți vedea lucruri de genul ăsta, care vor fi multe, multe, multe, multe, multe celule de bacterii”. ar fi colonii de bacterii pe care le-ai putea lăsa să crească, dar există o problemă, pentru că am menționat că unele dintre bacterii vor prelua plasmidele, iar altele nu, așa că nu știi când această bacterie va continua să se reproducă, ar putea forma una dintre acestea, ar putea forma una dintre acestea. colonii, astfel încât aceasta este o colonie care vă place, deci aceasta este o colonie bună, puneți o bifă acolo, dar poate că această colonie este formată de o bacterie inițială sau de un set de bacterii care nu a preluat plasmidul, deci nu va conține gena în cauză, așa că nu o vreți pe aceea, deci cum selectați bacteriile care… de fapt a preluat plasmidul, ei bine, ceea ce faceți este ca, pe lângă gena care vă interesează și de care vreți să faceți copii, să puneți în plasmidă și o genă de rezistență la antibiotice, așa că acum aveți aici o genă de rezistență la antibiotice și astfel doar bacteriile și cred că este uimitor că noi, ca omenire, suntem… să reușim să facem astfel de lucruri, dar acum doar bacteriile care au preluat plasmidul vor avea rezistența la antibiotice și, astfel, ceea ce faceți este să mutați în nutrienți nutrienți plus antibiotice plus un antibiotic antibiotic și astfel aceasta va supraviețui pentru că are acea rezistență, are acea genă. îi permite să nu fie susceptibil la Mattox, dar aceștia nu vor supraviețui, nici măcar nu vor supraviețui, nici măcar nu vor crește, pentru că antibioticele au fost amestecate cu nutrienții, așa că e un lucru destul de mișto. în plasmidă, lăsați-mă să scriu etichetele în plasmidă, care conținea și o genă care poate da rezistență la antibiotice oricărei bacterii care ia plasmidul. Puneți aceste plasmide în prezența bacteriilor sau le oferiți un fel de șoc, poate un șoc termic, astfel încât unele dintre bacterii să o ia. și apoi bacteria începe să se reproducă și, pe măsură ce se reproduce, reproduce și plasmidele și, pentru că are această rezistență la antibiotice, se va dezvolta în acest amestec nutritiv de antibiotice, iar celelalte bacterii care nu au preluat plasmidele nu se vor dezvolta. puteți lua această colonie de aici și să o puneți într-o altă soluție sau să continuați să o creșteți și veți avea mai multe copii ale acelei gene în interiorul bacteriei. Acum, următoarea întrebare, și simplific lucrurile în mod dramatic, cum puteți avea o grămadă de bacterii care au o grămadă de plasmide? de copii ale acelei gene, cum o folosiți? Ei bine, bacteriile însele, să spunem că acea genă este pentru ceva ce vreți să produceți, să zicem, insulină pentru diabetici, ei bine, ați putea folosi de fapt mașinăria bacteriană pe care o folosim pentru a continua să replicăm informația genetică, dar puteți, de asemenea. să folosim mașinăria productivă, cred că am putea spune că își va exprima ADN-ul existent în ADN, dar poate exprima și genele care sunt pe plasmidă, de fapt, asta îi dă mătușa, asta ar da bacteriei rezistența la antibiotice, dar dacă această genă ar fi, să zicem, pentru insulină, atunci… bacteriile vor produce o grămadă de insulină o grămadă de molecule de insulină pe care ați putea să le folosiți în vreun fel și nu voi intra în toate detaliile despre cum veți obține insulina și cum ați putea să o folosiți, dar nu mai e nevoie să spun că e destul de mișto că am putut să ajungem în acest punct

.