Presenterat på: ASRM 2017 – San Antonio, Texas
Mål: Att bestämma förekomsten och ploidystatusen hos användbara embryon som härrör från oocyter som inte uppvisar två pronuclei (0PN) vid tidpunkten för bedömningen av befruktningen.
Design: För att kunna fastställa om det finns ett användbart embryo som härrör från oocyter som inte uppvisar två pronuclei (0PN) vid tidpunkten för bedömningen av befruktningen: Retrospektiv studie i ett privat laboratorium för in vitro-befruktning.
Material och metoder: Totalt 3 370 blastocyster identifierades som morfologiskt lämpliga för överföring av färska embryon, vitrifiering eller trophektodermbiopsi för genetisk testning av ploidystatus följt av vitrifiering (dvs. användbara blastocyster). Användbara blastocyster erhölls dag 5, 6 eller 7. Mogna oocyter befruktades med hjälp av ICSI och bedömningen av pronukleärerna utfördes och registrerades med hjälp av ett inverterat mikroskop 16-18 timmar efter inseminationen. Embryon med två pronukler separerades från alla andra embryon som uppstod från 0PN-, 1PN-, 3PN- och ≥4PN-zygoter. Embryona gruppodlades i ett kontinuerligt enkelodlingsmedium (Irvine Scientific). Det kromosomala kopieringsantalet bedömdes för lämpliga blastocyster med Illumina MiSeq-plattformen. Embryon som rapporterades som normala hade ingen påvisbar avvikelse i antalet kopior, vid ett tröskelvärde på ≤30 %. Ett tröskelvärde på ≥50 % definierades för varje ökning/förlust av hela kromosomer för kromosomerna 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12, 17, 19 och/eller 22. Ett tröskelvärde på ≥30 % fastställdes för kromosomerna 6, 7, 8, 9, 11, 13, 14, 15, 16, 18, 20, 21, X, Y och eventuella segmentala duplikationer och/eller deletioner för någon av kromosomerna. Ett resultat med komplexa avvikelser definierades som en kombination av tre eller fler avvikelser i antalet kopior bestående av trisomi och/eller monosomi.
Resultat: Under 18 månader resulterade 830 färska oocytuttagningar i 7 258 zygoter med två haploida pronukleer (2PN). Dessa 2PN-zygoter utvecklades till 3 349 användbara blastocyster (46 %). 2,9 % av de oocyter som hämtades hade användbara blastocyster som härrörde från oocyter som inte uppvisade pronukleier (0PN) vid tidpunkten för bedömningen av befruktningen. 24 användbara blastocyster (från 0PN-zygoter) från 24 olika patienter vitrifierades. 14 (58 %) av dessa blastocyster var inte testade för bekräftelse av kromosomalt kopieringsnummer. 10 blastocyster från 0PN-zygoter undersöktes med PGS. Fyra embryon (44 %) rapporterades som normala medan två embryon rapporterades som onormala XO och tre embryon som komplexa onormala XY. Ingen överföring av en användbar blasotocyst som härrör från en 0PN har ännu skett.
Tabell 1: Ploidiestatus för användbara 0PN-blastocyster
| Embryo | Trophectoderm Diagnos |
| 1 | Komplex +5, +8, +16; XY |
| 2 | Abnormalt; XO |
| 3 | Complex -2, -3, +6, -8, -12; XY |
| 4 | Komplex +3, -5, +19, -15, -16, -17, -18. -19, +20, +21; XO |
| 5 | Abnormalt; XO |
| 6 | Normal XX |
| 7 | Normal XX |
| 8 | Normal XY |
| 9 | Normal XY |
| 10-24 | Okänd |
Slutsats: Våra resultat visar att användbara blastocyster som härrör från zygoter med onormal pronukleärbildning (0PN) kan utvecklas till ett kromosomalt normalt embryo. Dessa embryon kan dock också ha en hög sannolikhet för multipla kromosomala vinster eller förluster. Dessa resultat liknar tidigare rapporter om utvecklingspotential, kromosomanalyser och pågående graviditeter från zygoter som innehåller onormala pronukleer1-3. Patienterna bör få råd om de kromosomala avvikelser som är förknippade med otestade användbara blastocyster som härrör från atypiska zygoter. Ytterligare undersökning av ploidystatus hos användbara blastocyster som härrör från onormala zygotiska embryon med en enda pronukleus (1PN), tre pronukleus (3PN) eller högre (≥4PN) kan ge ytterligare information om retentionsvärdet hos onormala pronukleära zygoter.