Kundeanmeldelser

Prissammenligning

Beskrivelse

Poly DYKDDDDK (FLAG) Peptid lyophiliseret pulver blev syntetiseret af 23 aminosyrerester med molekylvægt 2.864 Da. Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Xaa-Asp-motivet gentages tre gange i peptidet. Otte aminosyrer på C-terminus udgør den klassiske FLAG-sekvens (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).

Egenskaber

Udseende (farve)

hvid

Udseende (form)

pulver

form

lyofiliseret pulver

renhed ved HPLC-MS

95.33 % (det seneste parti) Poly FLAG Peptid frysetørret pulver

Koncentration

(Anbefalet arbejdskoncentration er 200-400 μg/mL til eluering af FLAG-fusionsproteiner fra Anti-DYKDDDDK (FLAG)-perler.

Leveres i

Blå is

Opbevaringstemperatur

2-8°C

Anvendelse

Til brug ved kompetitiv eluering af DYKDDDDK (FLAG)-fusionsproteiner fra det ANTI-FLAGmonoklonale antistof i opløsning eller bundet til agarose på Anti-DYKDDDDK (FLAG)-perlerne.

Opmærksomhed

1. Læs brugermanualen omhyggeligt før første brug;
2. Undgå frysning, tørring og højhastighedscentrifugering under brug og opbevaring af perler;
3. Dette produkt er kun til R&D-brug, ikke til lægemidler, husholdningsbrug eller anden brug. Se venligst materialesikkerhedsdatabladet for oplysninger om farer og sikker håndteringspraksis.

Fremgangsmåde

Peptidudskillelse af DYKDDDDDDK(FLAG)-fusionsprotein fra Anti-DYKDDDDDDK(FLAG)-perler

1. Suspender Anti-Flag Affinitetsgelen grundigt i hætteglasset, så der opnås en ensartet suspension af harpiksen. 2. Overfør hurtigt 10μl af gel-suspensionen (ca. 5μl af det pakkede gelvolumen) til et nyt rør.

2. Tilsæt 0,6 mL TBS. Suspender Anti-Flag Affinity Gel grundigt ved at pipettere. Centrifuger harpiksen ved 5000 rpm i 30 sekunderog fjern forsigtigt supernatanten. Sørg for at fjerne al vaskebufferen uden at kassere harpiksen. Gentag 3-4 gange.

3. Tilsæt 500 μL celleperiplasmaekstrakter til den vaskede harpiks.

4. Rør forsigtigt prøverne i 2 timer ved 4 °C.
5. Centrifugér harpiksen i 30 sekunder ved 5.000 omdrejninger pr. minut. Overfør supernatanterne til et nyt rør.
6. Vask harpiksen med 0,5 ml TBS, indtil OD280 for supernatanten lyder＜0,05.
7. Elution af DYKDDDDK (FLAG)-fusionsprotein ved konkurrence med poly DYKDDDDDDK (FLAG)-peptid. Elution af det bundne DYKDDDDDDK(FLAG)-fusionsprotein ved konkurrerende eluering med fem alikvater af en kolonnevolumen af en opløsning, der indeholder 200-400 ug/mL Poly DYKDDDDDDK(FLAG)-peptid i TBS.
8. Genbrug af Anti-DYKDDDDDDK(FLAG)-perlerne
Poly DYKDDDDDDDDK(FLAG)-peptidet kan ikke eluere hele DYKDDDDDDK(FLAG)-fusionsproteinet, der er bundet til Anti-DYKDDDDDDK(FLAG)-perlerne. Det anbefales, at Anti-DYKDDDDDDK(FLAG)-perlerne regenereres umiddelbart efter brug ved at vaske med tre 5 mL alikvater af 0,1 M glycin HCl, pH 3,5. Gelen bør straks re-equilibreres i TBS, indtil udstrømningen har neutral pH.
Bemærk: Anti-DYKDDDDDDK(FLAG)-perlerne må ikke efterlades i glycin HCl i længere tid end 20 minutter.
9. Opbevaring af Anti-DYKDDDDDDK(FLAG)-perlerne
Vask Anti-DYKDDDDDDK(FLAG)-perlerne tre gange med 5 mL 50 % glycerol med 10 mM natriumphosphat, 150 mM natriumchlorid, pH 7,4, indeholdende 0.02% (w/v) natriumazid. tilsæt derefter yderligere 5 mL 50% glycerol med 10 mM natriumphosphat, 150 mM natriumchlorid, pH 7,4, indeholdende 0,02% (w/v) natriumazidog opbevar ved -20°C uden at dræne.

Opbevaring & stabilitet

Opbevar produktet ved 2-8°C.

File Download

Poly FLAG Peptide lyophiliseret pulver