Puhutaanpa hieman DNA:n kloonauksesta, jossa on kyse identtisten kopioiden tekemisestä DNA:n palasesta, ja yleensä se on DNA:n pala, joka koodaa jotakin, josta välitämme, se on geeni, joka ilmentää itseään proteiinina, joka on mielestämme jollakin tapaa hyödyllinen. Olet ehkä kuullut termiä kloonaaminen Kloonien sodan ja Tähtien sodan tai lammas-Dollyn yhteydessä. jos kloonaamme eläimen tai organismin, kuten lampaan, luomme eläimen, jolla on täsmälleen sama geneettinen materiaali kuin alkuperäisellä eläimellä, mutta kun puhumme kloonauksesta ja DNA:n kloonauksesta, puhumme jostain hieman yksinkertaisemmasta asiasta, joka on silti melko kiehtovaa.ja kirjoitan sen vain ylös, että tämä on kaksoisjuoste, en halua nähdä vaivaa piirtäessäni useita juosteita, vaan yritän vain piirtää kaksi juostetta, jotta muistutamme itseämme, joten tässä on kaksoissäikeinen DNA, ja sanotaan, että tässä DNA:n osassa on geeni, jonka haluamme kloonata. Haluamme tehdä kopioita tästä, joten geeni kloonaa geeni kloonaa. haluamme leikata tämän geenin pois jotenkin, ja teemme sen restriktioentsyymien avulla, ja on olemassa joukko erilaisia restriktioentsyymejä, ja minusta on kiehtovaa, että me sivilisaationa olemme päässeet siihen pisteeseen, että pystymme löytämään ja tunnistamaan nämä entsyymit, ja tiedämme, missä kohdin DNA:ta ne voivat leikata, ja ne tunnistavat tiettyjä sekvenssejä, ja sitten voimme miettiä, mitä restriktioentsyymiä meidän pitäisi käyttää DNA:n erilaisten pätkien leikkaamiseen. mutta olemme päässeet siihen pisteeseen sivilisaationa, joten käytämme restriktioentsyymejä. Saatamme käyttää yhtä restriktioentsyymiä, joka kiinnittyy tähän ja tunnistaa geneettisen sekvenssin tässä ja leikkaa juuri oikeassa paikassa, joten se saattaa olla restriktioentsyymi tuolla, ja sitten saatamme käyttää toista restriktioentsyymiä, joka tunnistaa sekvenssin, jonka haluamme leikata toiselta puolelta. Nämä ovat restriktioentsyymejä restriktioentsyymejä, ja nyt, kun olette käyttäneet restriktioentsyymejä, teillä on vain tuo geeni, ja ehkä vähän jää jommallekummalle puolelle, mutta periaatteessa olette leikanneet geenin, olette käyttäneet restriktioentsyymejä geenin leikkaamiseen, ja sitten haluatte liittää sen johonkin, jota kutsumme nimellä plasmidi, ja plasmidi on pala geneettistä materiaalia. joka sijaitsee kromosomien ulkopuolella, mutta joka voi lisääntyä pitkään tai joka voi kai sanoa, että se voi lisääntyä organismin geneettisen koneiston mukana tai jopa ilmentää itseään aivan kuten organismin geenit, jotka ovat kromosomeissa, ilmentävät itseään, joten tässä siis leikataan geeni pois ja sitten se halutaan liittää plasmidiin, ja plasmidit ovat yleensä ympyränmuotoinen DNA, joten liimaamme sen plasmidiin, ja jotta ne mahtuisivat plasmidiin, siellä on usein nämä ylityskohdat, joten siellä voi olla ylityskohta, ja plasmidissa, johon laitamme sen, voi olla komplementaarisia emäspareja ylityskohtien päällä, mikä helpottaa niiden reagoimista toistensa kanssa, jos niissä on nämä ylityskohdat. Tämä on hämmästyttävää, koska ilmeisesti GNA:ta ei voi manipuloida käsin niin kuin kopioimme ja liimaamme asioita teipillä. Teemme näitä liuoksia ja käytämme restriktioentsyymejä. Restriktioentsyymit leikkaavat massana näitä asioita, ne törmäävät juuri oikealla tavalla aiheuttaakseen reaktion, sitten otamme nämä G:t ja yhdistämme ne plasmideihin, joissa sattuu olemaan oikeita sekvenssejä. niiden päissä niin, että ne sopivat yhteen, ja sitten laitetaan myös joukko DNA-ligaasia DNA-ligaasia yhdistämään selkärangat toisiinsa, ja näimme myös DNA-ligaasin tutkiessamme replikaatiota, joten se on DNA-ligaasi, jonka voi ajatella auttavan liittämisessä, ja nyt meillä on tämä plasmidi ja haluamme lisätä sen organismiin, joka voi valmistaa kopioita puolestamme, ja organismeja, joita tyypillisesti käytetään, tai eräs organismin laji on bakteerit, ja e-coli ja erityisesti bakteerit, joten voisimme tehdä niin, että meillä olisi vaikkapa joukko, vaikkapa tässä on pullo, jossa on liuos, jossa on joukko e. coli -bakteereita.coli, joukko e.colibakteereja, ja sitä ei itse asiassa pystyisi näkemään silmämääräisesti, mutta siinä liuoksessa on e colibakteereja, ja sitten siihen liuokseen laitetaan plasmidit, joita olisi vielä vaikeampi nähdä, ja jollakin tavalla halutaan, että e colibakteerit ottavat plasmidin, ja tekniikka, joka tyypillisesti tehdään, on antaa e colibakteereille e colibakteereja, jotka eivät ole e colibakteereja. jonkinlainen shokki järjestelmälle, joka saa bakteerit ottamaan plasmidit, ja tyypillinen shokki on lämpöshokki, eikä vielä täysin ymmärretä, miten lämpöshokki toimii, mutta se toimii, ja ihmiset ovat käyttäneet tätä jo jonkin aikaa. Tässä on bakteeri, jolla on olemassa olevaa DNA:ta, joten tämä on sen olemassa olevaa geneettistä materiaalia tuolla, ja merkitsen tämän bakteeriksi. Se laitetaan plasmidiemme läsnäollessa, joten se laitetaan plasmidiemme läsnäollessa, ja siihen kohdistetaan lämpöshokki, ja osa bakteerista ottaa plasmidia. ottaa plasmidia, ja aivan samalla tavalla se ottaa sitä, ja sitten laitetaan liuos, jossa on bakteereja, joista osa on ottanut plasmidia, ja laitetaan se, ja sitten yritetään kasvattaa bakteereja lautasella, joten piirrän sen, joten piirrän sen tänne. meillä on levy, jolla voimme kasvattaa bakteerejamme, ja siinä on ravinteita, joita bakteerit voivat kasvattaa, siinä on ravinteita, siinä on ravinteita, ja voitte sanoa, että laitetaan tämä tähän, ja sitten joukko bakteereja kasvaa, joten näette tällaisia asioita, jotka ovat monia, monia, monia, monia, monia bakteerisoluja. bakteeripesäkkeitä, niiden voisi antaa kasvaa, mutta tässä on ongelma, koska mainitsin, että osa bakteereista ottaa plasmidit ja osa ei, joten ei tiedä, että kun tämä bakteeri jatkaa lisääntymistään, se saattaa muodostaa tällaisen bakteerin, se saattaa muodostaa tällaisen bakteerin… pesäkkeitä, joten tämä on pesäke, josta pidät, joten tämä on hyvä pesäke, laita siihen rasti, mutta ehkä tämä pesäke on muodostunut alkuperäisestä bakteerista tai bakteerien joukosta, joka ei ole ottanut plasmidia, joten se ei sisällä varsinaista kyseistä geeniä, joten et halua sitä, joten miten valitaan bakteerit, jotka plasmidin ottaneet bakteerit valitaan sen geenin lisäksi, josta halutaan tehdä kopioita, plasmidiin laitetaan myös antibioottiresistenssigeeni, joten nyt tässä on antibioottiresistenssigeeni, ja vain bakteerit, ja minusta on hämmästyttävää, että meillä ihmiskunnalla – pystymme tekemään tällaisia asioita, mutta nyt vain bakteereilla, jotka ovat ottaneet plasmidin, on antibioottiresistenssi, ja niinpä ravinteiden sekaan siirretään ravinteita ja antibiootteja ja antibiootti-antibioottia, ja tämä bakteeri selviytyy, koska sillä on resistenssi. jonka ansiosta se ei ole altis Mattoxille, mutta nämä eivät selviä hengissä, ne eivät edes kasva, koska antibiootteja on sekoitettu ravinteiden joukkoon, ja tämä on aika hieno juttu. Plasmidiin, joka sisälsi myös geenin, joka voi antaa antibioottiresistenssin kaikille bakteereille, jotka ottavat plasmidin vastaan. Nämä plasmidit laitetaan bakteerien läsnäollessa tai annetaan jonkinlainen shokki, ehkä lämpöshokki, jotta osa bakteereista ottaa sen vastaan. ja sitten bakteeri alkaa lisääntyä ja lisääntyessään se lisääntyy myös plasmidien kanssa, ja koska sillä on antibioottiresistenssi, se kasvaa tällä ravinne-antibioottiseoksella, ja muut bakteerit, jotka eivät ole ottaneet plasmideja, eivät kasva. voitte ottaa tämän pesäkkeen täältä ja laittaa sen toiseen liuokseen tai jatkaa sen kasvattamista, ja teillä on useita kopioita tuosta geenistä, jotka ovat tuon bakteerin sisällä. Nyt seuraava kysymys, ja yksinkertaistan asioita melko dramaattisesti, miten teillä on nyt joukko bakteereja, joilla on joukko kopioita tuosta geenistä, miten sitä hyödynnetään bakteereissa itsessään, sanotaan vaikka, että geeni on jotain varten, jota halutaan valmistaa, vaikkapa insuliinia diabeetikoille, voitaisiin itse asiassa käyttää bakteerien koneistoa, jota me käytämme lisääntymiskoneistona geneettisen informaation monistamiseen, mutta voidaan myös käyttää sen tuotantokoneistoa voisi kai sanoa, että se ilmentää olemassa olevaa DNA:ta, mutta se voi myös ilmentää plasmidissa olevia geenejä, itse asiassa se antaa sille sen tädin, joka antaisi bakteerille antibioottiresistenssin, mutta jos tämä geeni olisi vaikkapa insuliinia varten. bakteeri tuottaa kasan insuliinia, kasan insuliinimolekyylejä, joita voisi ehkä käyttää jollakin tavalla, enkä aio mennä yksityiskohtiin siitä, miten insuliini saadaan ulos ja miten sitä voisi käyttää, mutta sanomattakin on selvää, että on aika siistiä, että olemme päässeet edes tähän pisteeseen.