Asiakkaiden arvostelut
Tuotteen käyttö Citation(2)
Hintavertailu
Kuvaus
Poly DYKDDDDK (FLAG) Peptidi lyofilisoitu jauhe syntetisoitiin 23:lla 23:sta aminohappo jäännöksellä, joiden molekyylipainon arvo on 2,864 Da. Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp-motiivi toistuu peptidissä kolme kertaa. Kahdeksan aminohappoa C-terminaalissa muodostavat klassisen FLAG-sekvenssin (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).
Ominaisuudet
Valkoinen
Jauhe
Lyofilisoitu jauhe
95.33 % (viimeisin erä) Poly FLAG Peptidi lyofilisoitu jauhe
(Suositeltu työkonsentraatio on 200-400 μg/ml FLAG-fuusioproteiinien eluoimiseksi Anti-DYKDDDDK (FLAG) helmistä.
Sinisessä jäässä
2-8°C
Käyttökohde
Käytetään DYKDDDDK (FLAG) -fuusio proteiinien kilpailevaan eluutioon ANTI-FLAGmonoklonaalisesta vasta-aineesta liuoksessa tai agaroosiin sitoutuneena Anti-DYKDDDDK (FLAG) -helmillä.
Huomio
1. Lue käyttöohje huolellisesti ennen ensimmäistä käyttökertaa;
2. Vältä jäädyttämistä, kuivaamista ja nopeaa sentrifugointia helmien käytön ja varastoinnin aikana;
3. Tämä tuote on tarkoitettu vain R&D-käyttöön, ei lääke-, kotitalous- tai muuhun käyttöön. Tutustu käyttöturvallisuustiedotteeseen saadaksesi tietoa vaaroista ja turvallisista käsittelykäytännöistä.
Menettely
DYKDDDDK(FLAG)-fuusion proteiinin peptidieluutio Anti-DYKDDDDK(FLAG)-helmistä
1. Suspensioi Anti-Flag-affiniteettigeeli huolellisesti injektiopullossa, jotta hartsi suspendoituu tasaisesti. Siirrä nopeasti 10μl geelisuspensiota (noin 5μl pakatun geelin tilavuudesta) uuteen putkeen.
2. Lisää 0,6 ml TBS. Suspendoi Anti-Flag-affiniteettigeeli huolellisesti pipetoimalla. Sentrifugoi hartsia 5000 rpm 30 sekunnin ajan ja poista supernatantti varovasti. Muista poistaa kaikki pesupuskuri hävittämättä hartsia. Toista 3-4 kertaa.
3. Lisää pestyyn hartsiin 500 μL solujen periplasmista uutetta.
4. Sekoita näytteitä varovasti 2 tunnin ajan 4 °C:ssa.
5. Sentrifugoi hartsia 30 sekunnin ajan nopeudella 5000 rpm. Siirrä supernatantit tuoreeseen putkeen.
6. Pese hartsi 0,5 ml:lla TBS:ää, kunnes supernatantin OD280-luku on<0,05.
7. DYKDDDDK (FLAG) -fuusion proteiinin eluoituminen kilpailemalla poly-DYKDDDDK (FLAG) -peptidin kanssa. Eluutioidaan sitoutunut DYKDDDDK(FLAG)-fuusio proteiini kilpailullisella eluutiolla viidellä yhden kolonnin tilavuuden annoksella liuosta, joka sisältää 200-400 ug/ml Poly DYKDDDDK(FLAG)-peptidiä TBS:ssä.
8. Anti-DYKDDDDK(FLAG)-helmiä kierrättämällä
Poly DYKDDDDK(FLAG)-peptidiä ei ehkä eluoida kaikkea Anti-DYKDDDDK(FLAG)-helmiin sitoutunutta DYKDDDDK(FLAG)-fuusion proteiinia. On suositeltavaa, että Anti-DYKDDDDK(FLAG)-helmiä regeneroidaan välittömästi käytön jälkeen pesemällä kolmella 5 ml:n annoksella 0,1 M glysiinihydroksidia, pH 3,5. Geeliä on välittömästi tasapainotettava uudelleen TBS:ssä, kunnes poistuva vesi on neutraalissa pH:ssa.
Huomautus: Älä jätä Anti-DYKDDDDK(FLAG)-helmiä glysiini-HCl:ään yli 20 minuutiksi.
9. Anti-DYKDDDDK(FLAG)-helmien säilyttäminen
Pese Anti-DYKDDDDK(FLAG)-helmet kolme kertaa 5 ml:lla 50 % glyserolia, jossa on 10 mM natriumfosfaattia, 150 mM natriumkloridia, pH 7,4, joka sisältää 0.Lisää sitten toiset 5 ml 50-prosenttista glyserolia, jossa on 10 mM natriumfosfaattia, 150 mM natriumkloridia, pH 7,4, joka sisältää 0,02 % (w/v) natriumatsidia, ja säilytä -20 °C:ssa valuttamatta.
Säilytys & stabiilisuus
Säilytä tuote 2-8°C:ssa.
Tiedoston lataus
Poly FLAG Peptidi lyofilisoitu jauhe
.