Beszéljünk egy kicsit a DNS klónozásról, ami egy DNS-darab azonos másolatainak elkészítéséről szól, és általában ez egy olyan DNS-darab, ami kódol valamit, ami érdekel minket, ez egy gén, ami kifejezi magát, mint egy fehérje, amit hasznosnak tartunk valamilyen módon, talán hallottad már a klónozás kifejezést a klónok háborúja és a Star Wars vagy Dolly a birka kapcsán, és ez egy kapcsolódó ötlet. Ha egy állatot vagy egy organizmust klónozunk, mint például egy birkát, akkor egy olyan állatot hozunk létre, amely pontosan ugyanazzal a genetikai anyaggal rendelkezik, mint az eredeti állat, de amikor klónozásról és DNS-klónozásról beszélünk, akkor valami kicsit egyszerűbb dologról beszélünk, mint amit látni fogunk, ez még mindig elég lenyűgöző, egy DNS-darab azonos másolatáról van szó, szóval hogyan csináljuk ezt, mondjuk, hogy ez egy DNS-szál itt, és én csak egy vonalként rajzolom, de ez egy dupla DNS.és csak leírom, hogy ez egy kettős szál, nem akarom a többszörös szálak folyamatos rajzolásával bajlódni, hadd rajzoljam le, hadd próbáljam meg a két szálat lerajzolni, csak hogy emlékeztessük magunkat, szóval itt is van ez a kettős szálú DNS, és mondjuk, hogy a DNS ezen részén van egy gén, amit klónozni akarunk, másolatokat akarunk készíteni erről itt, tehát génről klónra génről klónra. valahogyan ki akarjuk vágni ezt a gént, és ezt restrikciós enzimek segítségével tesszük, és van egy csomó különböző restrikciós enzim, és én személy szerint lenyűgözőnek találom, hogy mi, mint civilizáció eljutottunk arra a pontra, hogy megtaláljuk és azonosítani tudjuk ezeket az enzimeket, és tudjuk, hogy a DNS mely pontjain tudják elvágni, felismernek bizonyos szekvenciákat, és akkor ki tudjuk találni, hogy melyik restrikciós enzimet használjuk a DNS különböző részeinek kivágására. de már eljutottunk erre a pontra, mint egy civilizáció, tehát használunk restrikciós enzimeket, használhatunk egy restrikciós enzimet, hadd használjak itt egy másik színt, ami beakad ide, és azonosítja a genetikai szekvenciát itt, és pontosan a megfelelő helyen vágja el, tehát ez lehet egy restrikciós enzim ott, és aztán használhatunk egy másik restrikciós enzimet, ami azonosítja a szekvenciát a másik oldalon, amit el akarunk vágni, tehát hadd címkézzem fel ezeket… ezeket a dolgokat ott, ezek restrikciós enzimek, restrikciós enzimek, és így most, miután a restrikciós enzimeket alkalmaztuk, csak a génünk marad meg, lehet, hogy egy kis maradék marad mindkét oldalon, de lényegében kivágtuk a gént, a restrikciós enzimeket használtuk a gén kivágására, és amit aztán tenni akarunk, az az, hogy beillesztjük egy úgynevezett plazmidba, és a plazmid egy genetikai anyagdarab. ami a kromoszómákon kívül helyezkedik el, de képes szaporodni, vagy azt hiszem, mondhatjuk, hogy képes a szervezet genetikai gépezetével együtt szaporodni, vagy akár önmagát is kifejezni, ahogy a szervezet génjei, amelyek a kromoszómákban vannak, kifejezik magukat. Tehát beillesztjük egy plazmidba, és annak érdekében, hogy illeszkedjenek, gyakran vannak ezek a túlnyúlások itt, tehát lehet, hogy van egy túlnyúlás ott, lehet, hogy van egy túlnyúlás ott, és így a plazmid, amibe beillesztjük, komplementer bázispárokat tartalmazhat a túlnyúlások felett, ami lehetővé teszi, hogy könnyebben reagáljanak egymással, ha vannak ezek a túlnyúlások, tehát hadd illesszük be a plazmidba, és ez az. mert nyilvánvalóan a GNA nem olyan dolog, amit a kezünkkel tudunk manipulálni, mintha szalaggal másolnánk és ragasztanánk be dolgokat. Elkészítjük ezeket az oldatokat, és alkalmazzuk a restrikciós enzimeket. A restrikciós enzimek tömegesen vágják ezeket a dolgokat, a megfelelő módon ütköznek, hogy a reakció megtörténjen, aztán fogjuk ezeket a G-ket, és a plazmidokhoz illesztjük, amik véletlenül a megfelelő szekvenciákkal rendelkeznek. a végükön, hogy összeilleszkedjenek, és aztán egy csomó DNS-ligáz DNS-ligázt is beleteszünk, hogy összekapcsoljuk a gerinceket itt, és láttunk egy DNS-ligázt is, amikor a replikációt tanulmányoztuk, tehát ez a DNS-ligáz, amire úgy gondolhatunk, hogy segít a beillesztésben, és most már megvan ez a plazmid, és be akarjuk illeszteni egy olyan szervezetbe, amely képes másolatokat készíteni nekünk, és egy szervezet, amit általában használunk, vagy egyfajta szervezet a baktérium és az e-baktérium.coli, különösen a baktérium, és így azt tehetjük, hogy mondjuk, hogy van egy csomó, mondjuk, hogy van itt egy fiola, van egy fiola, és van benne egy oldat egy csomó e. coli baktériummal.coli, egy csomó e.coli baktériumot, amit vizuálisan nem láthatunk, de van benne e coli, aztán beletesszük a plazmidokat, amiket még nehezebb lenne látni, és valahogy azt akarjuk, hogy az e coli baktérium felvegye a plazmidot, és az a technika, amit általában alkalmazunk, hogy a plazmidot az e coli baktériumoknak adjuk. hogy a baktérium felvegye a plazmidot, és a tipikus sokk a hősokk, és ez még nem teljesen tisztázott, hogy a hősokk hogyan működik, de működik, és az emberek már egy ideje használják ezt, tehát ha van egy baktérium, akkor van egy baktérium, ami pont a plazmid felett van. Itt van a meglévő DNS-e, tehát ez itt a meglévő genetikai anyaga, és hadd címkézzem fel, ez a baktérium, amit a plazmidjaink jelenlétében helyezünk el, tehát a plazmidunk jelenlétében helyezzük el, és alkalmazzuk a hősokkot, és a baktérium egy része be fogja venni a plazmidot. felveszi a plazmidot, és így csak úgy felveszi, felveszi, felveszi, és amit ezután csinálunk, az az, hogy elhelyezzük az oldatot, amiben a baktériumaink egy része felveszi a plazmidot, és beletesszük, majd megpróbáljuk a baktériumokat egy lemezen növeszteni, tehát hadd rajzoljam le, hadd rajzoljam le ide. van egy tányér, amin a baktériumokat növesztjük, és itt van rajta tápanyag, amin a baktériumok nőhetnek, van tápanyag, van tápanyag, van tápanyag, és akkor azt mondhatjuk, hogy oké, ezt ide tesszük, és akkor egy csomó baktérium fog nőni, tehát ilyen dolgokat látunk, ami sok-sok-sok-sok-sok-sok baktériumsejtből áll. baktérium kolóniák lennének, csak hagynád őket növekedni, de van itt egy probléma, mert említettem, hogy néhány baktérium felveszi a plazmidokat, néhány nem, és így nem tudod, hogy hé, tudod, amikor ez a baktérium, amikor tovább szaporodik, talán kialakul egy ilyen, talán kialakul egy ilyen… kolóniát, tehát ez egy olyan kolónia, ami tetszik, tehát ez egy jó kolónia, tegyél oda egy pipacsot, de lehet, hogy ezt a kolóniát egy olyan baktérium vagy baktériumcsoport alkotja, ami nem vette fel a plazmidot, tehát nem tartalmazza a kérdéses gént, tehát nem akarod azt, tehát hogyan szelektálod ki azokat a baktériumokat, amelyek… a plazmidot, nos, amit teszel, az az, hogy a gén mellett, amiről másolatot akarsz készíteni, egy antibiotikum rezisztencia gént is elhelyezel a plazmidban, így most már van egy antibiotikum rezisztencia géned, és így csak a baktériumokat, és szerintem elképesztő, hogy mi, az emberiség. képesek vagyunk ilyen dolgokra, de most már csak azok a baktériumok, amelyek felvették a plazmidot, rendelkeznek antibiotikum rezisztenciával, és így a tápanyagban van tápanyag plusz antibiotikum plusz antibiotikum antibiotikum, és így ez a baktérium túl fogja élni, mert rendelkezik a rezisztenciával, rendelkezik a génnel, ami… ami lehetővé teszi, hogy ne legyen fogékony a Mattox-ra, de ezek nem fognak túlélni, nem is fognak megtörténni, nem is fognak növekedni, mert antibiotikumot kevertek a tápanyaghoz, és ez egy nagyon klassz dolog, hogy elkezdted a génnel, ami érdekel, kivágtad és beillesztetted a tápanyagba. Hadd írjam le a címkéket a plazmidunkba, ami tartalmazott egy gént is, ami antibiotikum rezisztenciát adhat bármelyik baktériumnak, ami felveszi a plazmidot. Ezeket a plazmidokat a baktériumok jelenlétében helyezzük el, vagy valamilyen sokkot adunk, talán hősokkot, hogy a baktériumok egy része felvegye. és akkor a baktérium elkezd szaporodni, és ahogy szaporodik, úgy szaporítja a plazmidokat is, és mivel rendelkezik ezzel az antibiotikum-rezisztenciával, növekedni fog ezen a tápanyag-antibiotikum keveréken, és a többi baktérium, amelyik nem vette fel a plazmidokat, nem fog növekedni. foghatod ezt a kolóniát itt, és beleteheted egy másik oldatba, vagy folytathatod a növekedést, és a gén több példánya lesz a baktériumban. Most a következő kérdés, és eléggé leegyszerűsítem a dolgokat, hogy hogyan lesz egy csomó baktériumod, amelyiknek egy csomó a génnek egy csomó másolatát, hogyan használjuk fel, nos, a baktérium maga, mondjuk, hogy a gén valami olyasmihez kell, amit mondjuk inzulint akarunk előállítani a cukorbetegek számára, nos, használhatjuk a baktérium gépezetét, a szaporodási gépezetét, hogy tovább replikáljuk a genetikai információt, de azt is megtehetjük, hogy… de használhatjuk a termelő gépezetet is, mondhatnánk, hogy kifejezi a DNS-ét, de a plazmidon lévő géneket is kifejezheti, valójában ez adja a nénikéjét, ez adja a baktérium antibiotikum-rezisztenciáját, de ha ez a gén mondjuk inzulin lenne. a baktérium egy csomó inzulint fog termelni, egy csomó inzulin molekulát, amit valamilyen módon fel tudnánk használni, és nem fogok belemenni a részletekbe, hogy hogyan tudnánk kinyerni az inzulint, és hogyan tudnánk felhasználni, de mondanom sem kell, hogy ez nagyon király, hogy egyáltalán eljutottunk idáig.