1.2.2.6 Flavonoïden
Zes belangrijke flavonoïden, waaronder sophoricoside, genistine, genisteïne, rutine, quercetine en kaempferol, in Styphnolobium japonicum (Leguminosae) werden gelijktijdig bepaald met LC-ESI-MS/MS (Chang et al, 2013). Het kwantitatieve verschil in gehalte van zes actieve verbindingen was nuttig voor de chemotaxonomie van vele monsters van verschillende bronnen en de standaardisatie en differentiatie van vele vergelijkbare monsters. Twaalf flavonoïde verbindingen werden gebruikt om 34 monsters van duindoornbessen te onderscheiden (Chen et al., 2007). Geen duidelijk verschil tussen Hippophae rhamnoides ssp. sinensis (Elaeagnaceae) en H. rhamnoindes ssp. yunnanensis suggereerde dat de twee ondersoorten een zeer nauwe verwantschap zouden kunnen hebben op het vlak van chemotaxonomie. Flavonoïde glycosiden werden gebruikt om Unani-kruidengeneesmiddel kamille (Matricaria chamomilla) te authentificeren van zijn vervalsers, namelijk Anthemis nobilis, Matricaria aurea, en Inula vestita (Ahmad et al., 2009).
De farmacologisch actieve aglyconen van isoflavonen genisteïne, daidzeïne, formononetine en biochanine A werden gebruikt om 13 in Polen inheemse Trifolium (klaver; Leguminosae) soorten te classificeren (Zgórka, 2009). Naftodianthrones (bv. hypericine en pseudohypericine), flavonolglycosiden (bv. isoquercitrine en hyperoside), biflavonoïden (bv. amentoflavone), phloroglucinolderivaten (bv. hyperforine en adhyperforine), en xanthonen kunnen dienen als chemotaxonomische merkers op verschillende taxonomische niveaus (d.w.z, familie tot soort) (Crockett en Robson, 2011), wat aangeeft dat bepaalde biosynthetische routes geconserveerd zijn binnen een taxon of, als alternatief, twee of meer keer zijn ontstaan binnen een taxon door evolutionaire convergentie. Flavonoïden zijn nuttige chemotaxonomische markers van het geslacht Iris (Iridaceae; Wang et al., 2010).
7-Methoxylated flavonoïden zijn een chemotaxonomische eigenschap die vaak wordt aangetroffen in de familie Anacardiaceae (Feuereisen et al., 2014).
Zee duindoorn (Hippophae rhamnoides) is rijk aan vele bioactieve verbindingen (bijv. vitaminen, fenolen, en carotenoïden) die belangrijk zijn voor de menselijke gezondheid en voeding. Onder de fenolen bevatten bessen en bladeren een breed scala aan flavonolen die kwalitatief goede en authentieke biomarkers zijn. Zes variëteiten van gecultiveerde duindoorn (Hippophae rhamnoides ssp. carpatica) bessen en bladeren werden geanalyseerd met UHPLC-PDA-ESI-MS (Pop et al., 2013). Bessen en bladeren bevatten voornamelijk isorhamnetine (I) glycosiden in verschillende verhoudingen. Terwijl I-3-neohesperidoside, I-3-glucoside, I-3-rhamnosylglucoside, I-3-sophoroside-7-rhamnoside, en vrije isorhamnetine overheersten voor bessen (van de 17 geïdentificeerde verbindingen), I-3-rhamnosylglucoside, I-3-neohesperidoside, I-3-glucoside, quercetine-3-pentoside, kaempferol-3-rutinoside, en quercetine-3-glucoside waren overheersend in de bladeren (van de 19 geïdentificeerde verbindingen). Bessen bevatten gemiddeld 917 mg/100 g DW flavonolglycosiden. Bladeren hadden een hoger gehalte aan flavonolglycosiden dan bessen, gemiddeld 1118 mg/100 g DW. De variatie van de kwantitatieve dataset, geanalyseerd met PCA, was goed voor 91% van de totale variantie in het geval van bessen en 73% in het geval van bladeren, wat een goede discriminatie tussen de monsters aantoont. De flavonolderivaten kunnen biomarkers zijn om variëteiten te onderscheiden en om specifiek de bessen- versus bladsamenstelling te herkennen.
Dasymaschalon en Desmos zijn twee onafhankelijke genera van de familie Annonaceae, hetgeen wordt ondersteund door de grove morfologie, de bladanatomie en de moleculaire fylogenie. Deze genera bevatten formyl-gesubstitueerde flavonoïden met gesubstitueerde A-ring en niet-gesubstitueerde B-ring, die de chemotaxonomische markers zouden kunnen zijn (Zhou et al., 2012).
Flavonoïde glycoconjugaten van wortels en bladeren van acht Noord-Amerikaanse lupinesoorten (Lupinus elegans, L. exaltatus, L. hintonii, L. mexicanus, L. montanus, L. rotundiflorus, L. stipulatus, en Lupinus sp.), drie mediterrane soorten (L. albus, L. angustifolius, en L. luteus), en een in Europa gedomesticeerde soort uit Zuid-Amerika (L. mutabilis) werden geanalyseerd met behulp van twee LC-MS-systemen (Wojakowska et al, 2013). Als resultaat van de LC-MS profilering met behulp van de CID/MSn experimenten, werden de structuren van 175 flavonoïde glycoconjugaten, gevonden in 12 lupine soorten, geïdentificeerd op drie betrouwbaarheidsniveaus volgens het Metabolomics Standards Initiative, voornamelijk op niveau 2 en 3. Onder de flavonoïde derivaten die in de plantenextracten werden herkend, bevonden zich isomerische of isobarische verbindingen, die verschilden in de mate van hydroxylering van de aglyconen en de aanwezigheid van glycoside-, acyl- of alkylgroepen in de moleculen. De elementaire samenstelling van de glycoconjugaatmoleculen werd vastgesteld aan de hand van de exacte m/z-waarden van de geprotoneerde/deprotoneerde moleculen (+/-), gemeten met een nauwkeurigheid beter dan 5 ppm. Er werd informatie verkregen over de structuur van de aglyconen, het type suikermoeder (hexose, deoxyhexose of pentose) en, in sommige gevallen, hun plaats op de aglyconen, alsmede de acylsubstituenten van de flavonoïde-glycoconjugaten. Informatie verkregen uit de flavonoïde conjugaat profilering werd gebruikt voor de chemotaxonomische vergelijking van de bestudeerde lupine soorten. Een duidelijk onderscheid tussen de Mediterrane en de Noord-Amerikaanse lupine werd verkregen.
Het is noodzakelijk om de HPLC vingerafdruk van flavonoïden van zes veel gebruikte Chinese materia medica voor het reguleren van de Qi stroom vast te stellen, waaronder Citri grandis (Mao Ju Hong), C. grands (Guang Ju Hong), Citri Reticulatae Pericarpium (Chen Pi), Citri Reticulatae Pericarpium Viride (Qing Pi), Aurantii Fructus (Zhi Ke), en Aurantii Fructus Immaturus (Zhi Shi) van Citrus (Chen en Lin, 2011). HPLC werd uitgevoerd op een C18-kolom met methanol-water (met azijnzuur). De zes kruidengeneesmiddelen werden onderverdeeld in het naringinetype en het hesperidinetype. C. grandis en C. grands hadden vijftien gemeenschappelijke pieken; Citri Reticulatae Pericarpium, Citri Reticulatae Pericarpium Viride, Aurantii Fructus, en Aurantii Fructus Immaturus hadden tien gemeenschappelijke pieken. Alle kruiden hadden vijf gemeenschappelijke pieken. De holistische overeenkomst van de chromatogrammen van C. grandis en C. grands lag in het bereik van 0,928-0,996. Voor Citri Reticulatae Pericarpium, Citri Reticulatae Pericarpium Viride, en Aurantii Fructus Immaturus lag de overeenkomst tussen 0,922-0,997. Maar de overeenkomst tussen Aurantii Fructus en het onderlinge model was slechts 0,454-0,773. De vastgestelde vingerafdrukken van flavonoïden kunnen worden gebruikt om de verschillen intuïtief te vergelijken. De piekhoogte en piekoppervlakken van karakteristieke pieken zijn verschillend, maar of dit verband houdt met de verschillende functie van het reguleren van de Qi stroom van de zes medische materialen wacht op verdere studie.
129 bladmonsters van 35 soorten en één variëteit van de Chinese Epimedium (Berberidaceae), waarvan de meeste werden geplaatst onder subgen. Epimedium en sect. Diphyllon, werden geanalyseerd met behulp van de HPLC-methode (Guo et al., 2008a). De HPLC-profielen van alle monsters voor icariïne en soortgelijke verbindingen werden verkregen, gesorteerd en geanalyseerd. Volgens de tweede piekgroep (“ABCI” piekgroep) werden de chromatogrammen onderverdeeld in vier hoofdtypes en negen subtypes. Door correlatieanalyse met de bloemmorfologie werd II-3 als het meest primitieve type voorgesteld; II-1, IV en I-3 waren primitief en nauw verwant aan II-3; I-1 was het basistype; en I-2, I-4, III en II-2 waren afgeleide types. De HPLC-chromatogramtype-indeling komt overeen met de indeling van W. T. Stearn op sect. Diphyllon met vier series in 2002.