Tidsbestämda dräktigheter hos möss kan sättas upp på två sätt: 1) Använd vaginal cytologi för att bestämma stadiet i musens östralcykel och lämplig tidpunkt för parning, och/eller 2) kontrollera honor för vaginala pluggar för att avgöra om parning har ägt rum.

Utvärdering av vaginal cytologi

För att erhålla ett vaginalt prov för att bestämma stadiet i östralcykeln, för in en fuktad bomullspinne i vaginalöppningen hos en manuellt fasthållen mus. De flesta kommersiellt tillgängliga svabbar är för stora för att lätt passa in i vaginalöppningen hos en mus av genomsnittlig storlek, men en svab av lämplig storlek kan tillverkas genom att man lindar en liten mängd steril bomullsull runt den trubbiga änden på en tandpetare. Vrid svabben försiktigt men stadigt i musens vagina och var noga med att hålla kontakten med vaginalväggen. När du tagit bort svabben torkar du av den på ett rent glasmikroskopglas för att överföra det vaginala provet till objektglaset. Låt objektglaset lufttorka och applicera sedan en 0,1 % vattenlösning av metylenblått för att färga det vaginala materialet. När färgen torkat undersöker du provet i mikroskop. Östrusstadiet kan bestämmas genom de typer och det relativa antalet närvarande celler:

• Om musen är i diöstrus kommer du att se mestadels polymorfonukleära leukocyter (PMN) och en del epitelceller.
• Om musen är i proöstrus kommer du att se mestadels kärnformade och kornifierade epitelceller. Du kommer att se en del PMN om musen är i tidig proestrus.
• Om musen är i estrus kommer du att se mestadels kornifierade epitelceller. Du kan se några få cellkärnor om musen är i tidig estrus.
• Om musen är i metrus kommer du att se mestadels kornifierade epitelceller och PMN:er samt några nukleerade epitelceller.

Både parning och ägglossning inträffar vanligen (men inte undantagslöst) under östrus, som i allmänhet inträffar ungefär sex timmar efter mörkerperiodens början och varar 12-14 timmar. För tidsbestämd avel, placera honan med en hane under proöstrusfasen. För att verifiera att parning har ägt rum, kontrollera om honan har en vaginal plugg nästa morgon (se nedan).

Kontroll av vaginal plugg

Även om utvärdering av vaginal cytologi vanligen används för att bestämma den bästa tiden för avel hos vissa husdjur (t.ex. hundar) är det inte lika praktiskt för möss eftersom de har en mycket kort brunstcykel (4-5 dagar totalt). Ett mer praktiskt tillvägagångssätt för möss är att helt enkelt placera hanen och honan tillsammans och sedan kontrollera honan tidigt följande morgon för att se om honan har en vaginal plugg. Proppen består av koagulerade sekret från hanens koagulerande och vesikulära körtlar. Den fyller i allmänhet honans vagina och kvarstår i 8-24 timmar efter parningen. För att se proppen lyfter man upp honan vid svansbasen och undersöker vaginalöppningen för att se om det finns en vitaktig massa. Den kan vara svår att se, särskilt om du har mindre erfarenhet av detta förfarande. Du kan se den bättre om du sprider vulvans läppar något med en bomullspinne eller den trubbiga änden på en platt tandpetare. Om det inte finns någon plugg, lämna honan med hanen och kontrollera henne varje morgon tills du ser en plugg.

Om du behöver ett stort antal tidsbestämda dräktiga honor kan du dra nytta av feromonernas och de sociala faktorernas påverkan på brunstcykeln. Hysa honorna i stora grupper utan hanar i närheten. Genom att göra detta förlängs diöstrus och östrus undertrycks, ett fenomen som kallas Whitten-effekten. Eftersom feromoner från hanmöss kan störa denna effekt måste man förhindra olfaktorisk stimulering av de grupphuggna honorna från hanmöss. När honorna placeras tillsammans med hanar (vanligen 1-3 honor per hane) kommer brunstcykeln hos de flesta honor att återupptas inom tre dagar. För att identifiera dem som har parat sig undersöker man dem dagligen för att se om de har en vaginalpropp.

Närvaron av en vaginalpropp är ingen garanti för dräktighet: den visar bara att sexuell aktivitet har ägt rum. Sannolikheten för dräktighet efter parning varierar med musstammen och med fasen i brunstcykeln när parningen sker. För de flesta stammar är graden av dräktighet högst bland östrusdämpade honor med vaginala proppar som hittas den tredje dagen efter att de placerats med en hane. Som exempel kan nämnas att medan dräktigheten är ~100 % respektive 44 % för C3H/HeJ- och BALB/cJ-honor med pluggar som hittas den tredje dagen, är den endast 62 % respektive 31 % för dem med pluggar som hittas den femte dagen. Däremot är dräktighetsprocenten för C57BL/6J-honor endast 39 % för dem med pluggar som hittats den tredje dagen, men 69 % för dem med pluggar som hittats den fjärde dagen.

Om den pluggade honan är dräktig anses den första dräktighetsdagen vara dagen efter att pluggen hittats.

.