Kundrecensioner
Produktanvändning Citat(2)
Prisjämförelse
Beskrivning
Poly DYKDDDDK (FLAG) Peptide lyophilized powder syntetiserades av 23 aminosyrarester med molekylvikten 2,864 Da. Motivet Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp upprepas tre gånger i peptiden. Åtta aminosyror vid C-terminalen utgör den klassiska FLAG-sekvensen (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).
Egenskaper
Vit
Pulver
Lofiliserat pulver
95.33 % (det senaste partiet) Poly FLAG Peptide lyophilized powder
(Rekommenderad arbetskoncentration är 200-400 μg/mL för att eluera FLAG-fusionsproteiner från Anti-DYKDDDDK (FLAG)-pärlor.
Blå is
2-8°C
Användning
För användning vid kompetitiv eluering av DYKDDDDK (FLAG)-fusionsproteiner från den monoklonala ANTI-FLAG-antikroppen i lösning eller bundna till agaros på Anti-DYKDDDDK (FLAG)-pärlor.
Uppmärksamhet
1. Läs bruksanvisningen noggrant före första användningen;
2. Undvik frysning, torkning och höghastighetscentrifugering under användning och förvaring av pärlor;
3. Denna produkt är endast avsedd för R&D-användning, inte för läkemedelsanvändning, hushållsanvändning eller annan användning. Se säkerhetsdatabladet för information om faror och säker hantering.
Procedur
Peptid Elution av DYKDDDDK(FLAG) Fusionsprotein från Anti-DYKDDDDDDK(FLAG) pärlor
1. Suspendera Anti-Flag Affinitetsgelen grundligt i flaskan, för att få en jämn suspension av hartset. Överför snabbt 10μl av gelsuspensionen (ca 5μl av packad gelvolym) till ett nytt rör.
2. Tillsätt 0,6 ml TBS. Suspendera Anti-Flag Affinity Gel noggrant genom att pipettera. Centrifugera hartset vid 5000 rpm i 30 sekunder och ta försiktigt bort supernatanten. Var noga med att ta bort all tvättbuffert utan att kasta hartset. Upprepa 3-4 gånger.
3. Tillsätt 500 μL cellperiplasmaextrakt till den tvättade hartsen.
4. Omrör proverna försiktigt i 2 timmar vid 4 °C.
5. Centrifugera hartset i 30 sekunder vid 5000 rpm. Överför supernatanten till ett nytt rör.
6. Tvätta hartset med 0,5 ml TBS tills OD280 för supernatanten är＜0,05.
7. Elution av DYKDDDDK (FLAG)-fusionsprotein genom konkurrens med poly DYKDDDDDDK (FLAG)-peptid. Eluera det bundna DYKDDDDDDK(FLAG)-fusionsproteinet genom kompetitiv eluering med fem alikvotar av en kolonnvolym av en lösning som innehåller 200-400 ug/mL Poly DYKDDDDDDK(FLAG)-peptid i TBS.
8. Återvinning av Anti-DYKDDDDDDK(FLAG)-pärlorna
Poly DYKDDDDDDK(FLAG)-peptidmåste inte eluera allt DYKDDDDDDK(FLAG)-fusionsprotein som är bundet till Anti-DYKDDDDDDK(FLAG)-pärlorna. Det rekommenderas att Anti-DYKDDDDDDK(FLAG)-pärlorna regenereras omedelbart efter användning genom att tvättas med tre 5 mL alikvotar av 0,1 M glycin HCl, pH 3,5. Gelen bör omedelbart återbalanseras i TBS tills utflödet har ett neutralt pH-värde.
Notera: Låt inte Anti-DYKDDDDDDK(FLAG)-pärlorna ligga i glycin HCl längre än 20 minuter.
9. Förvaring av Anti-DYKDDDDDDK(FLAG)-pärlor
Tvätta Anti-DYKDDDDDDK(FLAG)-pärlor tre gånger med 5 mL 50 % glycerol med 10 mM natriumfosfat, 150 mM natriumklorid, pH 7,4, innehållande 0.Tillsätt sedan ytterligare 5 mL 50 % glycerol med 10 mM natriumfosfat, 150 mM natriumklorid, pH 7,4, innehållande 0,02 % (w/v) natriumazid och förvara vid -20 °C utan att dränera.
Förvaring & stabilitet
Förvara produkten vid 2-8°C.
Filhämtning
Poly FLAG Peptide lyophilized powder