Klanten Beoordelingen
Product Gebruik Citaat(2)
Prijs Vergelijking
Beschrijving
De Poly DYKDDDDK (FLAG) Peptide vriesdroog poeder werd gesynthetiseerd door 23 aminozuur residuen met een molecuulgewicht 2.864 Da. Het Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp motief wordt in het peptide driemaal herhaald. Acht aminozuren aan de C-terminus vormen de klassieke FLAG-sequentie (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Lys).
Eigenschappen
Wit
Poeder
Gelyofiliseerd poeder
95.33 % (de laatste partij) Poly FLAG Peptide gelyofiliseerd poeder
(Aanbevolen werkconcentratie is 200-400 μg/mL voor het elueren van FLAG fusie-eiwitten uit de Anti-DYKDDK (FLAG) korrels.
Blauw ijs
2-8°C
Toepassing
Voor gebruik in competitieve elutie van DYKDDDDK (FLAG)-fusie-eiwitten van het ANTI-FLAGmonoklonaal antilichaam in oplossing of gebonden aan agarose op de Anti-DYKDDK (FLAG)-korrels.
Opgelet
1. Lees voor het eerste gebruik aandachtig de gebruiksaanwijzing;
2. Vermijd bevriezen, drogen en centrifugeren met hoge snelheid tijdens het gebruik en de opslag van de korrels;
3. Dit product is alleen voor R&D gebruik, niet voor geneesmiddelen, huishoudelijk of ander gebruik. Raadpleeg het veiligheidsinformatieblad voor informatie over de gevaren en veilige hantering.
Procedure
Peptide-elutie van DYKDDK(FLAG)-fusie-eiwit van Anti-DYKDDK(FLAG)-korrels
1. Suspendeer de Anti-Flag Affinity Gel grondig in de injectieflacon, voor een uniforme suspensie van de hars. Breng snel 10 μl van de gelsuspensie (ongeveer 5 μl van het verpakte gelvolume) over in een vers buisje.
2. Voeg 0,6 mL TBS toe. Pipetteer de Anti-Flag Affinity Gel grondig in suspensie. Centrifugeer de hars gedurende 30 seconden bij 5000 rpm en verwijder het supernatans zorgvuldig. Zorg ervoor dat alle wasbuffer wordt verwijderd zonder de hars weg te gooien. Herhaal dit 3-4 maal.
3. Voeg 500 pi van de cel periplasmatische extracten aan de gewassen hars.
4. Roer zachtjes de monsters gedurende 2 uur bij 4 ° C.
5. Centrifugeer de hars gedurende 30 seconden bij 5000 rpm. Breng het supernatans over in een nieuw buisje.
6. Was de hars met 0,5 ml TBS tot de OD280 van het supernatans 0,05.
7. Elutie van DYKDDDDK (FLAG) fusie-eiwit door competitie met poly-DYKDDK (FLAG) peptide. Elueer het gebonden DYKDDK(FLAG)-fusie-eiwit door competitieve elutie met vijf aliquots van één kolomvolume van een oplossing die 200-400 ug/ml Poly DYKDDK(FLAG)-peptide in TBS bevat.
8. Het recyclen van de Anti-DYKDDK(FLAG)-korrels
Poly DYKDDK(FLAG)-peptide kan niet alle DYKDDK(FLAG)-fusie-eiwit dat aan Anti-DYKDDK(FLAG)-korrels gebonden is, elueren. Aanbevolen wordt de Anti-DYKDDK(FLAG)-korrels onmiddellijk na gebruik te regenereren door te wassen met drie aliquots van 5 ml 0,1 M glycine HCl, pH 3,5. De gel moet onmiddellijk opnieuw worden geëquilibreerd in TBS totdat de uitstromende vloeistof de neutrale pH heeft bereikt.
Note: Laat de Anti-DYKDDK(FLAG)-korrels niet langer dan 20 minuten in glycine HCl liggen.
9. De Anti-DYKDDK(FLAG)-korrels bewaren
Was de Anti-DYKDDK(FLAG)-korrels driemaal met 5 mL 50% glycerol met 10 mM natriumfosfaat, 150 mM natriumchloride, pH 7,4, met 0.02% (w/v) natriumazide. Voeg vervolgens nog eens 5 mL 50% glycerol met 10 mM natriumfosfaat, 150 mM natriumchloride, pH 7,4, met 0,02% (w/v) natriumazide en bewaar bij -20 ° C zonder uitlekken.
Opslag & stabiliteit
Bewaar het product bij 2-8°C.
Bestand downloaden
Poly FLAG Peptide gelyofiliseerd poeder