1.2.2.6 Flawonoid
Sześć głównych flawonoidów, w tym sophoricoside, genistin, genistein, rutin, quercetin, i kaempferol, w Styphnolobium japonicum (Leguminosae) zostały jednocześnie oznaczone przez LC-ESI-MS/MS (Chang i in., 2013). Ilościowa różnica w zawartości sześciu związków aktywnych była przydatna do chemotaksonomii wielu próbek pochodzących z różnych źródeł oraz standaryzacji i różnicowania wielu podobnych próbek. Dwanaście związków flawonoidowych zostało wykorzystanych do różnicowania 34 próbek jagód rokitnika (Chen i in., 2007). Brak oczywistej różnicy pomiędzy Hippophae rhamnoides ssp. sinensis (Elaeagnaceae) i H. rhamnoindes ssp. yunnanensis sugeruje, że te dwa podgatunki mogą być bardzo blisko spokrewnione pod względem chemotaksonomii. Glikozydy flawonoidowe zostały użyte do potwierdzenia autentyczności ziołowego leku Unani – rumianku (Matricaria chamomilla) od jego zafałszowań, to jest Anthemis nobilis, Matricaria aurea i Inula vestita (Ahmad i in., 2009).
Farmakologicznie aktywne aglikony izoflawonów: genisteina, daidzeina, formononetyna i biochanina A posłużyły do klasyfikacji 13 gatunków Trifolium (koniczyna; Leguminosae), występujących w Polsce (Zgórka, 2009). Naphthodianthrones (e.g., hypericin and pseudohypericin), flavonol glycosides (e.g., isoquercitrin and hyperoside), biflavonoids (e.g., amentoflavone), phloroglucinol derivatives (e.g., hyperforin and adhyperforin), and xanthones may serve as chemotaxonomic markers at various taxonomic levels (i.e., rodziny do gatunków) (Crockett i Robson, 2011), wskazując, że poszczególne ścieżki biosyntezy zostały zachowane w obrębie danego taksonu lub, alternatywnie, powstały dwa lub więcej razy w obrębie jednego taksonu w wyniku konwergencji ewolucyjnej. Flawonoidy są użytecznymi markerami chemotaksonomicznymi rodzaju Iris (Iridaceae; Wang i in., 2010).
7-Metoksylowane flawonoidy są cechą chemotaksonomiczną często występującą w rodzinie Anacardiaceae (Feuereisen i in., 2014).
Rokitnik zwyczajny (Hippophae rhamnoides) jest bogaty w wiele związków bioaktywnych (np. witaminy, fenole i karotenoidy) ważnych dla zdrowia i odżywiania człowieka. Wśród fenoli, jagody i liście zawierają szeroką gamę flawonoli, które są biomarkerami jakości i autentyczności. Sześć odmian uprawnych jagód i liści rokitnika zwyczajnego (Hippophae rhamnoides ssp. carpatica) analizowano metodą UHPLC-PDA-ESI-MS (Pop i in., 2013). Jagody i liście zawierały głównie glikozydy izorhamnetyny (I) w różnych proporcjach. Natomiast I-3-neohesperydozyd, I-3-glukozyd, I-3-rhamnosylglukozyd, I-3-sophorozyd-7-rhamnozyd oraz wolna izorhamnetyna dominowały w przypadku jagód (spośród 17 zidentyfikowanych związków), I-3-rhamnozyloglukozyd, I-3-neohesperydozyd, I-3-glukozyd, kwercetyna-3-pentozyd, kaempferol-3-rutinozyd i kwercetyna-3-glukozyd były dominujące w liściach (z 19 zidentyfikowanych związków). Jagody zawierały średnio 917 mg/100 g DW glikozydów flawonolowych. Liście miały wyższą zawartość glikozydów flawonolowych niż jagody, średnio 1118 mg/100 g DW. Wariancja ilościowego zbioru danych analizowana za pomocą PCA stanowiła 91% całkowitej wariancji w przypadku jagód i 73% w przypadku liści, co świadczy o dobrej dyskryminacji pomiędzy próbkami. Pochodne flawonolu mogą być biomarkerami do rozróżniania odmian i specyficznego rozpoznawania składu jagód i liści.
Dasymaschalon i Desmos są dwoma niezależnymi rodzajami z rodziny Annonaceae, co jest poparte morfologią, anatomią liści i filogenezą molekularną. Rodzaje te zawierają flawonoidy z podstawionym pierścieniem A i niepodstawionym pierścieniem B, które mogą być markerami chemotaksonomicznymi (Zhou et al., 2012).
Glikokoniugaty flawonoidowe z korzeni i liści ośmiu północnoamerykańskich gatunków łubinu (Lupinus elegans, L. exaltatus, L. hintonii, L. mexicanus, L. montanus, L. rotundiflorus, L. stipulatus i Lupinus sp.), trzech gatunków śródziemnomorskich (L. albus, L. angustifolius, i L. luteus) oraz jednego gatunku z Ameryki Południowej udomowionego w Europie (L. mutabilis) analizowano przy użyciu dwóch systemów LC-MS (Wojakowska i in., 2013). W wyniku profilowania LC-MS z wykorzystaniem eksperymentów CID/MSn zidentyfikowano struktury 175 glikokoniugatów flawonoidowych występujących w 12 gatunkach łubinu na trzech poziomach ufności wg Metabolomics Standards Initiative, głównie na poziomie 2 i 3. Wśród pochodnych flawonoidów rozpoznanych w ekstraktach roślinnych znalazły się związki izomeryczne lub izobaryczne, różniące się stopniem hydroksylacji aglikonów oraz obecnością w cząsteczkach grup glikozydowych, acylowych lub alkilowych. Skład pierwiastkowy cząsteczek glikokoniugatów ustalono na podstawie dokładnych wartości m/z protonowanych/deprotonowanych cząsteczek (+/-) zmierzonych z dokładnością lepszą niż 5 ppm. Uzyskano informacje dotyczące struktury aglikonów, rodzaju cząsteczek cukrów (heksozy, deoksyheksozy lub pentozy), a w niektórych przypadkach ich rozmieszczenia na aglikonie oraz podstawników acylowych glikokoniugatów flawonoidowych. Informacje uzyskane na podstawie profilowania koniugatów flawonoidowych wykorzystano do porównania chemotaksonomicznego badanych gatunków łubinu. Uzyskano jednoznaczną dyskryminację łubinu śródziemnomorskiego i północnoamerykańskiego.
Niezbędne jest ustalenie HPLC fingerprint flawonoidów sześciu często stosowanych w chińskiej materia medica do regulacji przepływu Qi, w tym Citri grandis (Mao Ju Hong), C. grands (Guang Ju Hong), Citri Reticulatae Pericarpium (Chen Pi), Citri Reticulatae Pericarpium Viride (Qing Pi), Aurantii Fructus (Zhi Ke) i Aurantii Fructus Immaturus (Zhi Shi) z Citrus (Chen i Lin, 2011). HPLC przeprowadzono na kolumnie C18 z metanolem i wodą (z dodatkiem kwasu octowego). Sześć leków ziołowych podzielono na typ naringinowy i typ hesperydynowy. C. grandis i C. grands miały piętnaście wspólnych pików; Citri Reticulatae Pericarpium, Citri Reticulatae Pericarpium Viride, Aurantii Fructus i Aurantii Fructus Immaturus miały dziesięć wspólnych pików. Wszystkie zioła miały pięć wspólnych pików. Podobieństwo holistyczne chromatogramów C. grandis i C. grands mieściło się w zakresie 0,928-0,996. W przypadku Citri Reticulatae Pericarpium, Citri Reticulatae Pericarpium Viride i Aurantii Fructus Immaturus podobieństwo to mieściło się w zakresie 0,922-0,997. Ale podobieństwo pomiędzy Aurantii Fructus i modelem wzajemnym wynosiło tylko 0,454-0,773. Ustalone odciski palców flawonoidów mogą być wykorzystane do intuicyjnego porównania różnic. Wysokość piku i powierzchnie charakterystycznych pików są różne, ale czy jest to związane z różną funkcją regulowania przepływu Qi sześciu materiałów medycznych czeka na dalsze badania.
129 próbek liści z 35 gatunków i jednej odmiany chińskiego Epimedium (Berberidaceae), z których większość została umieszczona w subgen. Epimedium i sect. Diphyllon, były analizowane metodą HPLC (Guo et al., 2008a). Profile HPLC wszystkich próbek dla ikaryny i podobnych związków zostały uzyskane, posortowane i przeanalizowane. Zgodnie z drugą grupą pikową (grupa pikowa “ABCI”), chromatogramy zostały podzielone na cztery główne typy i dziewięć podtypów. Poprzez analizę korelacji z morfologią kwiatu, II-3 sugerowano jako najbardziej prymitywny typ; II-1, IV, i I-3 były prymitywne i blisko spokrewnione z II-3; I-1 był typem podstawowym; i I-2, I-4, III, i II-2 były typami pochodnymi. Podział chromatogramów HPLC na typy odpowiada klasyfikacji W. T. Stearna dotyczącej sekt. Diphyllon z czterema seriami w 2002 roku.
.