Clostridium botulinum – Botulizm (Postacie kliniczne). Testy do diagnostyki botulizmu. Wykrywanie toksyny u pacjentów, w żywności, paszy, szlamie lub osadach wodnych; ptactwo wodne, inne próbki. Zalecane testy: wykrywanie toksyny, hodowla C. botulinum, typowanie toksyny botulinowej; diagnostyka molekularna (PCR).

Charakterystyka Clostridium botulinum i toksyny botulinowej/s

Clostridium botulinum jest ściśle beztlenową gram dodatnią bakterią, rodzaj Clostridium, rodzina Clostridiaceae, przetrwalnikującą, która wytwarza neurotoksyczną toksynę. Bakteria ta występuje zwykle w glebie oraz w nieoczyszczonej wodzie słodkiej i osadach (oceany, jeziora), a jej występowanie jest ogólnoświatowe. W pewnych okolicznościach organizm ten może zanieczyścić żywność i rozwijać się w niej, wytwarzając toksyny. Botulizm, poważna forma zatrucia pokarmowego, jest skutkiem spożycia żywności zawierającej toksynę. Chociaż choroba ta jest rzadka, jej śmiertelność jest wysoka. Gdy określono typ toksyny wśród 1036 przypadków wykrytych w USA w latach 1899-1990, 384 przypadki dotyczyły toksyny A, 106 – toksyny B, 105 – toksyny E i 3 – toksyny F. Czasami mogą wystąpić przypadki spowodowane dwiema toksynami, np. A i B.

Wszystkie formy botulizmu ludzi i zwierząt, są spowodowane wchłonięciem toksyny botulinowej powstałej podczas namnażania się bakterii Clostridium botulinum. Toksyna ma bardzo wysoką toksyczność (neurotoksyczność), tak że wywiera swoje działanie przy bardzo niskich poziomach, jest termolabilna, natomiast przetrwalniki bakterii są odporne na wysoką temperaturę i przeżywają w żywności podgrzanej do ponad 100ºC, np. w konserwach poddanych obróbce termicznej. Ponadto niektóre szczepy C. botulinum, C. butyricum, C. baratii i C. argentinense mogą wytwarzać neurotoksyny botulinowe.

Istnieje siedem typów toksyn (A – G), które można różnicować za pomocą testów neutralizacji, przydatnych w praktyce klinicznej i epidemiologicznej. Typy A, B, E i F są głównymi przyczynami botulizmu u ludzi, natomiast typy C i D występują w przypadkach botulizmu u zwierząt, przy czym najbardziej dotknięte są dzikie ptaki i drób, bydło, konie i niektóre gatunki ryb. Typy A i B są najczęściej spotykane u mężczyzn i są związane głównie z zanieczyszczeniem przygotowywanych w domu konserw warzywnych, ale w Europie typy te zostały również wykryte w odniesieniu do produktów mięsnych. Typ E (rybi) występuje w środowisku wodnym i koreluje z przypadkami botulizmu E dotyczącymi zanieczyszczonych ryb lub skorupiaków, a jego częstość wzrasta. Typ F jest wyjątkowy. Typ C dzieli się na C1 (neurotoksyna) i C2 (nie jest neurotoksyną, wpływa na przepuszczalność naczyń krwionośnych i jest enterotoksyczny). Typ G jest produkowany przez C. argentiniense (wyizolowany z ziemi w Argentynie, surowicy zmarłych pacjentów, chociaż jest to niejasne zaangażowanie).

Toksyny są syntetyzowane podczas wzrostu bakterii jako nieaktywne białko (150 kDa), które jest uwalniane z bakterii podczas lizy. W celu aktywacji powstała toksyna powinna ulec degradacji do dwóch łańcuchów polipeptydowych (50 i 100 kDa).

C. botulinum, można podzielić na grupy w zależności od cech hodowlanych, biochemicznych i fizjologicznych. Wszystkie kultury typu A i niektóre typu B i F są proteolityczne. Kultury C. botulinum wytwarzające toksyny typu C i D nie są proteolityczne, gdy są hodowane w podłożu z koagulowanym białkiem jaja lub miąższem. Wszystkie typy E i niektóre z typu B i F są nieproteolityczne, ale mają cechy metabolizmu węglowodanów, które różnią się od nieproteolitycznych grup typu C i D. Szczepy typu G nie mają To zostało zbadane wystarczająco szczegółowo do skutecznego i zadowalającego charakterystyki.

Optymalna temperatura do wzrostu i produkcji toksyn jest około 35 ° C dla szczepów proteolitycznych; dla szczepów nieproteolitycznych jest 26-28 ° C. Szczepy nieproteolityczne typu B, E i F mogą wytwarzać toksyny w temperaturach chłodniczych (3-4ºC). Toksyny szczepów nieproteolitycznych wykazują maksymalną toksyczność dopiero po aktywacji toksyny trypsyną. Toksyny szczepów proteolitycznych są na ogół wytwarzane w jej aktywowanej postaci.

Kliniczne postacie botulizmu

Występują cztery kliniczne postacie botulizmu u ludzi:

• Zatrucie pokarmowe (botulizm pokarmowy), spowodowane spożyciem żywności zanieczyszczonej Clostridium botulinum, w której powstaje toksyna.

• Zatrucie jadem kiełbasianym, powstające w wyniku zakażenia rany bakterią Clostridium botulinum i wytworzenia toksyny in vivo po wyhodowaniu bakterii w ranie.

• Zatrucie jadem kiełbasianym niemowląt, powstające w wyniku wytworzenia toksyny w przewodzie pokarmowym małych dzieci skolonizowanych przez Clostridium botulinum (najczęstszą przyczyną jest spożycie skażonego miodu lub syropu kukurydzianego), a następnie wchłonięcie toksyny. U tych pacjentów mogą występować przeciwciała przeciwko toksynie.

• Jelitowy zatrucie jadem kiełbasianym u dorosłych, spowodowane kolonizacją przewodu pokarmowego przez Clostridium botulinum u osób starszych, po której następuje wchłonięcie toksyny. Pacjenci ci mogą mieć przeciwciała przeciwko toksynie.

W każdej z klinicznych postaci botulizmu ludzkiego, a także w równym stopniu w botulizmie zwierzęcym, toksyna przenika do krwi z przewodu pokarmowego po spożyciu wstępnie uformowanej z pokarmem, lub gdy jest wytwarzana przez bakterię kolonizującą przewód pokarmowy (małe dzieci lub dorośli), lub w wyjątkowych przypadkach dzieci z zakażonej bakterią rany. Istnieją pewne produkty żywnościowe, które są bardziej prawdopodobne niż inne, aby zawierać toksynę botulinową. Pokarmy o pH poniżej 4,5 są trudniejsze do wywołania botulizmu, ponieważ przy takim pH C. botulinum nie jest w stanie namnażać się i produkować toksyny (dotyczy to soków owocowych, potraw marynowanych w occie itp.) Odwrotnie, żywność o pH równym lub wyższym niż 4,5 może powodować zatrucia jadem kiełbasianym, ponieważ w niej możliwe jest namnażanie się i wytwarzanie toksyn (tak jest w przypadku mięsa, ryb, warzyw, dań gotowych, itp.), na wszystkich tych pokarmach ekspozycja bez dostępu tlenu, tak jak w przypadku żywności pakowanej w puszki lub próżniowo, i o pH większym niż 4,6. Przykładem jest żywność niebezpieczna: szynka peklowana, wędzona, konserwy rybne lub warzywne (poddane obróbce termicznej niewystarczającej do zabicia przetrwalników) itp. Puszki skażone C. botulinum są zwykle zakrzywione, choć nie zdarza się to w przypadku typu E.

Wchłonięta toksyna nieodwracalnie wiąże się z połączeniami nerwowo-mięśniowymi neuronów ruchowych, uniemożliwiając uwalnianie acetylocholiny i powodując porażenie wiotkie lub osłabienie mięśni.

Klinicznie charakteryzuje się ostrym porażeniem wiotkim, które zwykle zaczyna się od dwustronnego zaangażowania nerwów czaszkowych, wpływając na mięśnie twarzy, głowy i gardła, a następnie zstępuje symetrycznie, aby wpłynąć na mięśnie klatki piersiowej i kończyn. Śmierć, jeśli już nastąpi, spowodowana jest niewydolnością oddechową na skutek porażenia języka i mięśni gardła zamykających górne drogi oddechowe lub na skutek porażenia przepony i mięśni międzyżebrowych. Z tego powodu pacjenci powinni otrzymać antytoksynę botulinową i potrzebną intensywną terapię oddechową.

Testy diagnostyczne w kierunku zatrucia jadem kiełbasianym

Wykrywanie toksyny botulinowej w próbkach lub żywności bez posiewu (patrz zalecana próbka w części “Testy oferowane przez IVAMI i wymagane próbki”).

Jest to zalecane u pacjenta z klinicznymi dowodami botulizmu.

Wykrywanie toksyny botulinowej można przeprowadzić w płynie, takim jak surowica uzyskana z krwi. Można ją również wykryć z resztek spożytego pokarmu, który był przyczyną przypadku lub ogniska botulizmu. Do wykonania badania z wykorzystaniem resztek pokarmu konieczne jest uzyskanie z niego filtratu ekstraktu. W przypadkach botulizmu niemowląt lub botulizmu jelitowego można wykryć obecność toksyny w kale dzieci lub pacjentów, ale za bardziej wskazane uważa się wykonanie wstępnej hodowli kału (patrz niżej ). Wykrywanie toksyny botulinowej w każdym z tych przypadków odbywa się poprzez inokulację u myszy, u których po inokulacji toksyną botulinową rozwijają się objawy paraliżujące, a następnie śmierć. Aby potwierdzić, że myszy zmarły od zaszczepionej toksyny botulinowej, konieczne jest wykonanie testu neutralizacji, który potwierdza, że toksyna botulinowa była obecna i identyfikuje rodzaj obecnej toksyny botulinowej. Ten test neutralizacji jest wykonywany w konfrontacji z inokulowanym produktem (surowica osoby lub zwierzęcia, ekstrakt z połkniętej żywności, …) ze specyficznymi antysurowicami każdego typu toksyny.

Przed etapem testu neutralizacji konieczne jest obliczenie minimalnej dawki śmiertelnej (MLD). W ten sposób obliczamy maksymalne (najwyższe) rozcieńczenie, które powoduje śmierć zakażonych zwierząt, a inokulowana objętość spowodowała śmierć zwierząt zawierają minimalną dawkę śmiertelną (LMD).

Aby zidentyfikować typ toksyny, po poznaniu “Minimalnej dawki śmiertelnej”, jest ona konfrontowana z różnymi antysurowicami toksyny typu botulinowego. Mieszaniny te zostaną zaszczepione w równej objętości myszom doświadczalnym, a te, które przeżyją, zostały zaszczepione mieszaniną “minimalnej dawki śmiertelnej” plus surowica do typu, który był w stanie zneutralizować.

Detekcja toksyny w próbkach/produktach po wstępnej hodowli (patrz Zalecana próbka po w teście oferowanym przez IVAMI i wymagane próbki).

Gdy bakteria Clostridium botulinum, która wytwarza toksynę, może być znaleziona w próbce, zaleca się wcześniejszą hodowlę, aby zbadać toksynę po hodowli próbki. Ma to miejsce w przypadku kału pacjenta z botulizmem niemowlęcym lub jelitowym, pozostałości po spożytej żywności, w której namnożyły się bakterie (np. konserwy w puszkach), podejrzanej żywności, która może zawierać bakterie (np. wybrzuszone konserwy), żywności pod kontrolą w celu wykluczenia obecności tej bakterii (np, kiełbasy, szynki, puszki), lub inne próbki, takie jak osady słodkowodne lub wodne osady morskie, itp. z obszarów, gdzie zaobserwowano śmiertelność u ptactwa wodnego.

Podczas hodowli w laboratorium, w odpowiednich podłożach hodowlanych, toksyna jest wytwarzana, jeśli jest bakteria i uzyskanie przesączu hodowlanego może być przydatne do zbadania jej obecności, zaszczepiając przesącz myszom. Jeżeli zaszczepione myszy są dotknięte chorobą, wskazuje to na prawdopodobną obecność Clostridium botulinum w próbce o wzrost w hodowli. Jednak myszy mogły umrzeć z innej przyczyny, dlatego konieczne jest, przed wydaniem raportu, sprawdzenie, czy rzeczywiście umarły z powodu zaszczepienia toksyną botulinową.

Aby potwierdzić obecność toksyny botulinowej w hodowli można wykonać testy neutralizacyjne z użyciem specyficznych surowic odpornościowych dla każdego typu toksyny botulinowej (test neutralizacyjny) lub wykryć obecność genów Clostridium botulinum i jej typu w podłożu hodowlanym (wykrywanie molekularne metodą PCR).

Test neutralizacji jest wykonywany wobec inokulowanej próbki (filtratu hodowli) wobec specyficznych antysurowic dla każdego typu toksyny.

Przed etapem testu neutralizacji konieczne jest obliczenie minimalnej dawki śmiertelnej (MLD). W ten sposób oblicza się (najwyższe) maksymalne rozcieńczenie, które powoduje śmierć zaszczepionych zwierząt, a zaszczepiona objętość spowodowała śmierć zwierząt zawiera minimalną dawkę śmiertelną.

Aby zidentyfikować typ toksyny, po poznaniu “minimalnej dawki śmiertelnej”, przeprowadza się konfrontację minimalnej dawki śmiertelnej z różnymi typami surowic antybotulinowych. Mieszaniny te zostaną zaszczepione w równej objętości myszom doświadczalnym, a te, które przeżyją, zostały zaszczepione mieszaniną “minimalnej dawki śmiertelnej” plus surowica do typu, który był zdolny do neutralizacji.

Molekularne wykrywanie przez PCR pozwala uniknąć czasu wymaganego do obliczenia minimalnej dawki śmiertelnej (MLD) i testu neutralizacji.

Wykrywanie przeciwciał przeciwko toksynie botulinowej (patrz zalecana próbka po w części Badanie oferowane przez IVAMI i wymagane próbki)

• Pacjenci leczeni rozcieńczoną toksyną botulinową, tacy jak pacjenci otrzymujący botoks do zabiegów estetycznych lub medycznych (e. gr. pain due facial trigeminal neuralgia), w celu wykrycia obecności przeciwciał uniemożliwiających jej działanie.

• Pacjenci z podejrzeniem zatrucia jadem kiełbasianym u niemowląt lub zatrucia jadem kiełbasianym u dorosłych, u których nie udało się stwierdzić obecności bakterii Clostridium botulinum toxin w kale lub surowicy.

• Osoby zaszczepione, które są zainteresowane sprawdzeniem statusu ochrony.

Toksyna botulinowa Clostridium botulinum, w bardzo dużych rozcieńczeniach, była stosowana przez miejscowe podawanie w leczeniu procesów spastycznych. Procesy te okazały się być użytecznym środkiem leczniczym. Procesy te mają zazwyczaj charakter przewlekły, co wymaga stałego podawania toksyny. W związku z tym w trakcie leczenia może powstać oporność z powodu postępującej immunizacji pacjenta w trakcie leczenia, w którym to przypadku efekt byłby ograniczony. W celu wykrycia tej immunizacji wymagany jest dokładny i czuły pomiar istnienia przeciwciał przeciwko toksynie botulinowej A i/lub B.

Przyjętą metodą referencyjną do wykrywania i ilościowego określania przeciwciał przeciwko toksynie botulinowej jest test neutralizacji u myszy (Mouse Neutralization Assay), w którym rozcieńczenie toksyny botulinowej, określone ilościowo przez dawkę śmiertelną 50% dla myszy (DL50), miesza się z różnymi rozcieńczeniami podstawowymi 2 lub podstawowymi 4 surowicy/osocza, a po inkubacji każde z nich zaszczepia się dootrzewnowo grupom myszy. Najwyższe rozcieńczenie surowicy testowej, które zmniejsza toksyczność, odpowiada mianu przeciwciał przeciwko odpowiedniej toksynie botulinowej. Rozcieńczenie to, w porównaniu do standardu międzynarodowego, pozwala uzyskać wyniki w jednostkach międzynarodowych (IU/mL) (1 IU jest definiowana jako ilość przeciwciała, która neutralizuje 10 000 LD50 toksyn A lub B, lub 1000 LD50 typu E). Ilość toksyny używanej w testach to taka, która jest neutralizowana przez 0,02; 0,005 i 0,0125 IU/mL antytoksyny dla typów A, B i E, odpowiednio (Hatheway et al. 1984). Surowicy, które chronią myszy miana 1: 4 są zgłaszane jako <0.08 IU / mL dla typu A, lub <0.02 IU / mL dla typu B. Test jest pracochłonne, drogie i długi czas wykonywania, więc alternatywy zostały poszukiwane enmzimoinmunoanálisisis oparte metody (ELISA) przy użyciu mikropłytki pokryte toksyną botulinową. Jednak wartości uzyskane przez ELISA czasami nie w pełni korelują z testem neutralizacji u myszy.

Przed testem neutralizacji krok jest konieczne, aby obliczyć minimalną dawkę śmiertelną (DLM) toksyny. Obliczenie minimalnej dawki śmiertelnej wykonuje się przez rozcieńczenie przesączu hodowlanego do 10, rozcieńczenie połowy solą fizjologiczną w celu uzyskania takiego samego rozcieńczenia jak toksyna zmieszana z surowicą lub osoczem pacjenta i zaszczepienie każdej mieszaniny rozcieńczeń myszom laboratoryjnym. W ten sposób oblicza się (najwyższe) maksymalne rozcieńczenie, które powoduje śmierć zakażonych zwierząt. Objętość inokulowana, która spowodowała śmierć zwierząt, zawiera minimalną dawkę śmiertelną (MLD).

Po poznaniu minimalnej dawki śmiertelnej, obliczyć minimalną dawkę nieśmiertelną (dmnm) odpowiadającą minimalnej ilości toksyny w obecności stałej ilości antytoksyny, która nie zabija zaszczepionych myszy. Ta ilość toksyny jest neutralizowana przez odpowiednie jednostki antytoksyny anty-A lub antytoksyny anty-B. Minimalna dawka nieśmiertelna jest nazywana tak, ponieważ jest to minimalna ilość toksyny, która nie powoduje śmierci myszy w obecności antytoksyny.

Testy oferowane przez IVAMI i wymagane próbki:

• Wykrywanie toksyny botulinowej w ludzkich przypadkach lub ogniskach zatrucia jadem kiełbasianym przenoszonym drogą pokarmową:

• • Surowica pacjenta (co najmniej 5 mL) ostatnio otrzymana w celu zaszczepienia myszy i typowania toksyny, jeśli myszy zostały dotknięte.

• W przypadkach botulizmu niemowlęcego lub botulizmu jelitowego toksyna botulinowa może być wykryta w kale dzieci/pacjentów, ale zalecamy raczej wykonanie wstępnej hodowli kału.

• Detection of toxin and / or Clostridium botulinum in foods ingested, suspected of causing botulism, or food subject to control

• Próbka podejrzanej lub kontrolowanej żywności (zalecane co najmniej ok. 100 gramów) w celu przygotowania próbki przeznaczonej do zaszczepienia myszy i wykrycia obecności preformowanej toksyny w żywności, jak również do wykonania posiewu w celu uzyskania przesączu do zaszczepienia myszy i stwierdzenia, czy w próbce znajdowały się bakterie wytwarzające toksynę; W przypadku posiadania tylko resztek pokarmu zaleca się przesłanie pełnej dostępnej ilości.

• Wykrywanie Clostridium botulinum w przypadkach botulizmu niemowlęcego lub botulizmu jelitowego

• Kał w przypadkach botulizmu niemowlęcego lub botulizmu jelitowego spowodowanego kolonizacją jelit (10 g), do hodowli i wykrywania toksyn w przesączu hodowlanym przez zaszczepienie myszy.

• Wykrywanie Clostridium botulinum w przypadkach zatrucia jadem kiełbasianym z rany

• Wysięk z rany w przypadkach podejrzenia zatrucia jadem kiełbasianym z rany, do celów hodowli i wykrywania toksyn w przesączu hodowli przez inokulację myszy. Jeśli próbka jest transportowana tlenowo, Clostridium botulinum mogło ulec inaktywacji, wygodniej byłoby wykonać test molekularny na obecność genów Clostridium botulinum i w przypadku wyniku pozytywnego zidentyfikować typ toksyny botulinowej poprzez wykrycie genów odpowiadających każdemu typowi toksyny.

• Detekcja Clostridium botulinum w próbkach osadów słodkowodnych lub wodnych osadów morskich, oraz innych produktów nie ujętych w poprzednich sekcjach

• Próbki o masie 100 g w przybliżeniu do wykonania hodowli na wzrost Clostridium botulinum i uzyskania filtratu z hodowli do zaszczepienia myszy.

• Wykrywanie przeciwciał przeciwko toksynie botulinowej w surowicy lub osoczu

• • Surowica lub osocze (około 10 mL), do badania na obecność przeciwciał neutralizujących w surowicy lub osoczu przeciwko różnym toksynom dostępnym w laboratorium. Badanie to jest interesujące w celu określenia obecności specyficznych przeciwciał u osób leczonych toksyną botulinową, u pacjentów z podejrzeniem botulizmu niemowlęcego, u dorosłych, u których nie udało się znaleźć bakterii w kale, lub u osób szczepionych w celu sprawdzenia statusu ochrony. W przypadku osób leczonych toksyną botulinową należy podać rodzaj toksyny podanej pacjentowi.

Czas oczekiwania na raport wyników (TAT)

• Nie możemy podać dokładnych czasów. Jeśli badanie dotyczy tylko wykrycia toksyny przez zaszczepienie myszy i wynik jest negatywny, raport z wynikami będzie trwał maksymalnie jeden tydzień. Jeśli testowanie obejmuje hodowlę próbki, a następnie wykrywanie toksyny wykonane przez inokulację filtratu kultury myszy, czas wynosiłby dwa tygodnie. Jeżeli którykolwiek z tych testów inokulacji myszy, ekstraktu z próbki lub filtratu hodowli, byłby pozytywny, należy wykonać test neutralizacji na myszach w celu potwierdzenia, że jest to toksyna botulinowa i zidentyfikowania jej typu poprzez testy neutralizacji, czas wykonania wynosi 15 dni.

• Testy PCR w czasie rzeczywistym, raport jest w 3 lub 4 dni.

Formularz z charakterystyką produktu i wybranymi badaniami

• W przypadku ubiegania się o przeprowadzenie badań z produktem należy złożyć pismo, w którym należy przedstawić charakterystykę produktu i wybrane badania, które mają być wykonane z przesłaną próbką.

Objętość próbki

• Patrz w każdym przypadku, w zależności od rodzaju testów oferowanych przez IVAMI.

Warunki przechowywania i wysyłki próbek

• Próbki są wysyłane w warunkach, w jakich zazwyczaj znajduje się próbka, zabezpieczone na czas transportu. W przypadku próbek, które mogą ulec rozkładowi, ponieważ są skażone bakteriami lub są organiczne (produkty łatwo psujące się, surowice zwierzęce lub ludzkie, odchody, osady, … …), próbki muszą być przechowywane i wysyłane w stanie zamrożonym lub przynajmniej w warunkach zapewniających chłodzenie podczas transportu (pojemnik z próbką w pudełku z polistyrenu ekspandowanego (biały korek) z zamrożonymi zimnymi opakowaniami). Uwaga: organizm ten sam w sobie nie stwarza ryzyka skażenia przez ekspozycję biologiczną.

Koszt badania

• Wykrywanie toksyn w ludzkich przypadkach / ogniskach botulizmu przenoszonego drogą pokarmową

• • Szczepienie myszy surowicą od pacjenta lub ekstraktem z połkniętej żywności ………………………………. ……………………………………………………………………………………………………………Skonsultuj się z [email protected]

  .

• Jeśli wynik jest dodatni, test potwierdzający w celu neutralizacji i identyfikacji rodzaju toksyny …………….. …………………………………………………………………………………………………………..Konsultacja [email protected] .

Wykrywanie toksyny i/lub Clostridium botulinum w żywności spożytej, podejrzanej o wywołanie botulizmu lub żywności podlegającej kontroli

Wykrywanie Clostridium botulinum w przypadkach botulizmu niemowląt lub botulizmu jelitowego

• Opcjonalnie: Test inokulacji myszy surowicą lub ekstraktem z połkniętej żywności ………………………………….. ……………………………………………………………………………………………………………Consult [email protected]

• Zalecane. Test hodowlany, a następnie inokulacja myszy filtratem z hodowli ………………………….. …………………………………………………………………………………………………………..Consult [email protected]

• Jeśli wynik jest pozytywny, test potwierdzający w celu neutralizacji i identyfikacji rodzaju toksyny ……………………. …………………………………………………………………………………………………………..Konsultacja [email protected]

Wykrywanie Clostridium botulinum w przypadkach botulizmu ran

• Test hodowlany, a następnie zaszczepienie myszy przesączem hodowlanym ……………………. Skonsultuj się z [email protected]

• Jeśli wynik jest pozytywny, test potwierdzający w celu neutralizacji i identyfikacji rodzaju toksyny …………….. …………………………………………………………………………………………………………..Consult [email protected]

• Wykrywanie Clostridium botulinum w próbkach szlamu / wody słodkiej lub osadów morskich oraz innych produktów nieuwzględnionych w poprzednich sekcjach

• Test hodowlany, a następnie zaszczepienie myszy filtratem hodowlanym ……………………. Skonsultuj się z [email protected]

• Jeśli wynik jest pozytywny, test potwierdzający w celu neutralizacji i identyfikacji rodzaju toksyny ………………. ………………………………………………………………………………………………………….. Skonsultuj się z [email protected]

• Wykrywanie toksyny antybotulinowej w surowicy lub osoczu (odnosi się do rodzaju przeciwciał, więc musi wskazywać rodzaj toksyny podanej danej osobie) ……………………………………………….. Consult [email protected]