Listen over markeringer og steder er udarbejdet af et panel af bluesforskere og -historikere. Stien er blevet gennemført i etaper efterhånden som der er blevet midler til rådighed. National Endowment for the Arts, National Endowment for the Humanities og Mississippi Department of Transportation har ydet tilskud til finansiering af forskellige markører, som er samfinansieret med midler fra lokalsamfundene. Markørteksterne er undersøgt og skrevet af de tidligere redaktører af Living Blues Magazine, Jim O’Neal og Scott Barretta, i samarbejde med et redaktions- og designteam, der har omfattet Wanda Clark, Chrissy Wilson, Allan Hammons og Sylvester Oliver.
Forud for grundlæggelsen af Mississippi Blues Trail blev der opsat to foreløbige markører i Indianola, Mississippi, ved et hjørne, hvor B.B. King spillede som ung mand, og ved Club Ebony.
De første tre markører for Mississippi Blues Trail blev indviet den 11. december 2006. Den første, ved Holly Ridge, er dedikeret til Delta blues-pioneren Charley Patton.
Den anden markør er placeret foran Southern Whispers Restaurant på Nelson Street i Greenville. Nelson Street, hvor der gennem årene har været mange natklubber, caféer og juke joints, var engang det primære centrum for afroamerikansk forretning, underholdning og socialt liv i Deltaet. I mange årtier trak denne historiske gade folkemængder til den blomstrende klubscene for at høre Delta blues, big band, jump blues, rhythm & blues og jazz.
Den tredje markeringsceremoni fandt sted på den oprindelige placering af WGRM-radiostationen i Greenwood, hvor B.B. King først sendte som gospelsanger.
I slutningen af 2016 havde Mississippi Blues Trail placeret næsten 200 markører, ikke kun til ære for individuelle kunstnere, klubber, pladeselskaber, radiostationer og historiske begivenheder, men også til fejring af plantager, gader, byer og amter, der var centre for bluesaktivitet. Mississippi State Penitentiary at Parchman blev også mindet, da folklorister som Alan Lomax optog blues af indsatte (især Bukka White) ved flere lejligheder, der går tilbage til 1930’erne.