Opinie klientów
Zastosowanie produktu Cytaty(2)
Porównanie cen
Opis
Poli DYKDDDDK (FLAG) Peptyd liofilizowany w proszku został zsyntetyzowany przez 23 reszty aminokwasowe o masie cząsteczkowej 2,864 Da. Motyw Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp powtarza się w peptydzie trzykrotnie. Osiem aminokwasów na C-końcu tworzy klasyczną sekwencję FLAG (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).
Właściwości
Biały
Proszek
Proszek liofilizowany
95.33 % (ostatnia partia) Poly FLAG Peptide lyophilized Powder
(Zalecane stężenie robocze wynosi 200-400 μg/mL do elucji białek fuzyjnych FLAG z kulek Anti-DYKDDDDK (FLAG).
niebieskim lodzie
2-.8°C
Zastosowanie
Do stosowania w elucji konkurencyjnej białek fuzyjnych DYKDDDDK (FLAG) z przeciwciała ANTI-FLAGmonoklonalnego w roztworze lub związanego z agarozą na kulkach Anti-DYKDDDDK (FLAG).
Uwaga
1. Przed pierwszym użyciem należy uważnie przeczytać instrukcję obsługi;
2. Unikać zamrażania, suszenia i szybkiego wirowania podczas używania i przechowywania kulek;
3. Ten produkt jest przeznaczony wyłącznie do użytku R&D, nie jest przeznaczony do leków, użytku domowego ani innych zastosowań. Proszę zapoznać się z arkuszem danych bezpieczeństwa materiału w celu uzyskania informacji dotyczących zagrożeń i praktyk bezpiecznego obchodzenia się z produktem.
Procedura
Elucja peptydu białka fuzyjnego DYKDDDDK(FLAG) z kulek Anti-DYKDDDDK(FLAG)
1. Dokładnie zawiesić Anti-Flag Affinity Gel w fiolce, w celu uzyskania jednolitej zawiesiny żywicy. Szybko przenieść 10μl zawiesiny żelu (około 5μl objętości zapakowanego żelu) do świeżej probówki.
2. Dodać 0,6 mL TBS. Dokładnie zawiesić Anti-Flag Affinity Gel przez pipetowanie. Odwirowywać żywicę przy 5000 obr/min przez 30 sekund i ostrożnie usunąć supernatant. Upewnić się, że usunięto cały bufor płuczący, nie wyrzucając żywicy. Powtórzyć 3-4 razy.
3. Dodać 500 μL ekstraktów peryplazmatycznych komórek do wypłukanej żywicy.
4. Delikatnie mieszać próbki przez 2 godziny w temperaturze 4°C.
5. Odwirowywać żywicę przez 30 sekund przy 5000 obr/min. Przenieść supernatant do nowej probówki.
6. Przemywać żywicę 0.5mL TBS do momentu, gdy OD280 supernatantu wyniesie<0.05.
7. Elucja białka fuzyjnego DYKDDDDK (FLAG) przez konkurencję z peptydem Poly DYKDDDDK (FLAG). Eluować związane białko fuzyjne DYKDDDDK(FLAG) przez konkurencyjną elucję z pięciu jednokolumnowych porcji objętościowych roztworu zawierającego 200-400 ug/mL peptydu Poly DYKDDDDK(FLAG) w TBS. Peptyd Poly DYKDDDDK(FLAG) może nie wymywać całego białka fuzyjnego związanego z kulkami Anti-DYKDDDDK(FLAG). Zaleca się, aby kulki Anti-DYKDDDDK(FLAG) były regenerowane natychmiast po użyciu poprzez przemycie trzema 5 mL porcjami 0,1 M HCl glicyny, pH 3,5. Żel powinien być natychmiast ponownie ekwilibrowany w TBS, aż wypływ będzie miał neutralne pH.
Płukać kulki Anti-DYKDDK(FLAG) trzykrotnie 5 mL 50% glicerolu z 10 mM fosforanem sodu, 150 mM chlorkiem sodu, pH 7.4, zawierającego 0.02% (w/v) azydku sodu. następnie dodać kolejne 5 mL 50% glicerolu z 10 mM fosforanu sodu, 150 mM chlorku sodu, pH 7.4, zawierającego 0.02% (w/v) azydku sodu i przechowywać w temperaturze -20°C bez odsączania.
Przechowywanie & stabilność
Produkt przechowywać w temperaturze 2-8°C.
Pobieranie plików
Poly FLAG Peptide lyophilized powder
.